治疗活性的α-MSH类似物制造技术

本发明专利技术描述了α－促黑素细胞激素（α－ＭＳＨ）的肽类似物，所述肽类似物与天然α－ＭＳＨ肽相比具有提高的功效。与α－ＭＳＨ相比，α－ＭＳＨ类似物表现出提高的抗炎效果以及提高的防止局部缺血情况的能力。本发明专利技术进一步公开了该肽用于制备药物组合物的用途，和药物组合物，所述药物组合物用于治疗或预防哺乳动物的一个或多个器官的组织的病况。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及a-促黑素细胞激素(a-MSH)的肽类似物，所述肽类似物与 天然a -MSH肽相比具有提高的功效。与a -MSH相比，a -MSH类似物表现 出提高的抗炎效果以及提高的治疗或预防与局部缺血或后面是血管再灌注的 局部缺血相关的全身损伤、器官损伤或细胞损伤的能力。
技术介绍
天然肽ot-促黑素细胞激素(cc-MSH)作为1型、3型、4型和5型黑皮 质素(MC)受体的天然激动剂已经为人们熟知。MC受体属于G-蛋白偶联受 体的类型。所有的受体亚型都被偶联到激活型G-刺激蛋白(G-stimulatory protein),这意味着受体激活涉及到提高的cAMP含量。ACTH是2型受体 (MC2)的天然配基。在许多组织中关于MC受体已经进行了大量的研究。已经知道，a-MSH 以极大的亲和力结合到其上的1型受体(MC1 )在一些组织和细胞例如脑中表 达，包括星形细胞、睾丸、卵巢、巨噬细胞和嗜中性粒细胞。然而，MCI可 能能在更宽范围的组织中表达，尽管这还需要去建立。MC受体结合不同MSH 肽的选择性是变化的。MCI以极大的亲和力结合a-MSH，也以较低的亲和力 结合e-MSH、 y-MSH和ACTH。据报导，MC2仅结合ACTH，而不结合任 何一种MSH肽。对其他受体的配基的最高亲和力包括Y-MSH (MC3-受体) 和I3-MSH (MC4-受体)。相反，MC5以与MC1相同的方式以非常低的亲和 力结合MSH肽(即对a-MSH最高的亲和力)。通过激活MC-受体起作用的MSH-肽具有各种功能，包括免疫、抗炎、体 温调节、痛感、醛固酮合成、血压调节、心率、血管紧张度、脑血流量、神经 生长、胎盘发育、许多激素(例如醛固酮、曱状腺素、催乳激素、FSH)的合 成/释放。ACTH在激活类固酮生成(steroidoneogenesis )上具有主要作用。a -MSH也诱导皮肤色素形成。需要重点强调的是，MSH肽，特别是cc-MSH的关于哪些受体被涉及的 许多作用还没有完全建立起来。据推测cc-MSH的抗炎作用涉及各种过程包括 干扰NO生产、内皮素-l作用、白介素10形成，这又关Jf关到巨噬细胞和单核 细胞中表达的MC1受体。已经证实MC受体对ot-MSH的激活作用在各种炎症过程中是重要的 (Lipton和Catania 1997 ): 1 )抑制嗜中性粒细胞的趋药性迁移(Catania 1996 )。 2) oc-MSH包括其类似物抑制对LPS处理响应的细胞因子(IL-l, TNF-oc) 的释放(Goninard 1996 )。 3 )抑制对细菌内毒素响应的TNF- a ( Wong, K.Y. 等，1997)。 4) ICV或IP给药ot-MSH抑制通过局部给予LPS而引起的中枢 系统的TNF-a生产。5)已经证实a-MSH减轻实验性炎症性肠病(Rajora， N.等，1997)和局部缺血诱导的急性肾衰竭(Star, R.A.等，1995)的炎症。6) 通过抑制接触性过敏的诱导和激发，a -MSH还具有一定的预防效果以及诱导 半抗原耐受性，并且人们推测a-MSH可能介导皮肤炎症和高增生皮肤病的重 要的负调节(Luger，T.A.， 1997)。最后，a-MSH导致来自皮肤微维管结构的 内皮细胞的提高的IL-8释放(Hartmeyer， M., 1997 )。低氧症(局部缺血)和再灌注损伤两者在人病理生理学中都是重要的因素。 组织低氧症的实例(在再灌注过程中预先处理为损伤)包括循环系统休克、心 肌局部缺血、中风、 一过性肾局部缺血、大外科手术和器官移植。因为归因于 局部缺血的疾病是极其常见的发病率和死亡率原因，并且因为器官移植越来越 频繁，为了改善公众的健康水平，非常需要具有限制再灌注损伤能力的治疗策 略。局部缺血再灌注损伤的基础病理生理学是复杂的，不仅涉及到对嗜中性粒 细胞-浸润的典型的炎症再灌注反应，而且涉及到再灌注组织/器官内细胞因子 的基因表达，所述细胞因子包括肿瘤坏死因子-cc (TNF-cx)、白介素(IL)-l P、 IL-6、 IL-8、干扰素-y和胞间粘附分子-l (ICAM-1)。此外，人们认为， 通过直4妻抑制收缩性和诱导细胞凋亡，局部产生的TNF-oc促成如在梗死后心 脏中引起局部缺血后器官机能障碍。由于局部缺血和/或再灌注复杂的性质， 已经证实简单的抗炎治疗概念是无效的因此，大多数实验研究指向这样的事 实，即为了保护避免再灌注损伤，需要有与一个以上激活通路的伴行的相互作 用。已经证实，a-MSH同时具有抗炎的、抗氧化的和抗细胞凋亡的能力，这对于该化合物为了保护避免再灌注损伤的效力给出了很好的解释。已知OC-MSH氨基酸序列的氨基酸残基的特定修饰可导致肽提高的受体亲和力(对例如MC4受体)、延长的生物活性或更多的受体特异性结合分布型 (receptor-specific binding profile ) ( Schi6th等，1997; Hruby等,1995; Sawyer 等，1980; Hiltz等1991; Scardenings等，2000)。然而，当旨在生产肽药物 时，这些肽还具有对酶降解低稳定性的问题。如上所述，开发肽治疗活性的药物的问题是肽快速并且非常高效地被酶降 解，通常具有在几分钟范围内的半衰期。蛋白酶和其他蛋白水解酶是无所不在 的，特别是在胃肠道中更是如此，因此在口服时肽常常在多个位点对降解敏感， 并且在血、肝、肾和血管内皮中在某种程度上也对降解敏感。此外，特定肽常 常在主链内的一个以上键上对降解敏感；每一个水解位置由特定蛋白酶介导。 即使克服了这些障碍，特别是对于神经肽，已经遇到了在它们跨越血-脑屏障 运输方面的困难。为了提高肽的代谢稳定性，Larsen等1999 ( WO 99/46283 )已经开发出了 一种被称为SIP (结构诱导探针)的技术。SIP技术基于结构诱导探针的使用， 该结构诱导探针以短肽序列为代表，即附加到亲本肽的C-端或N-端或者同时 附加到C-端和N-端的(Lys)6。基于分子内的氢键，结构诱导探针强迫亲本肽成 为更有序的构象，借此，与处于无规巻曲构象的肽相反，肽嵌合体(连接到才罙 针的肽)对蛋白酶敏感度低。作为结构化的结果，肽嵌合体更难于被蛋白酶降 解。附加SIP到生物活性肽常常导致肽的酶稳定性的提高而同时生物活性保持 不变(Rizzi等2002 )。 专利技术概述令人意外的是，本专利技术已经证实，与天然a-MSH肽相比，a-MSH和a -MSH类似物在肽的N-端的SIP-修饰提高了肽的最大功效。与天然a -MSH肽 相比，本专利技术的肽显示出了提高的抗炎效果和提高的预防局部缺血症状的能 力。因此，本专利技术涉及特定的肽，所述肽包括在肽的N-端部分的SIP修饰和 在肽的C-端部分的cc -MSH或a -MSH变体的氨基酸序列。第一方面，本专利技术提供了总计为12 19个氨基酸残基的肽，所述肽包括如下氨基酸序列X-Aai-Aa2-Aa3-Aa4-Aa5-Y-Aa6-Aa7-Z其中X包括6个氨基酸残基R1-R2-R3-R4-R5-R6，其中Rl、 R2、 R3、 R4、 R5和R6可以独立地是Lys或Glu,和其中Y包括选自His-Phe-Arg本文档来自技高网...

【技术保护点】
总计为１２～１９个氨基酸残基的肽，所述肽包括如下氨基酸序列：　　　　Ｘ－Ａａ↓［１］－Ａａ↓［２］－Ａａ↓［３］－Ａａ↓［４］－Ａａ↓［５］－Ｙ－Ａａ↓［６］－Ａａ↓［７］－Ｚ　　　　其中Ｘ包括６个氨基酸残基Ｒ１－Ｒ２－Ｒ３－Ｒ４－Ｒ５－Ｒ６，其中Ｒ１、Ｒ２、Ｒ３、Ｒ４、Ｒ５和Ｒ６可以独立地是Ｌｙｓ或Ｇｌｕ，和　　　　其中Ｙ包括选自Ｈｉｓ－Ｐｈｅ－Ａｒｇ、Ｈｉｓ－（Ｄ－Ｐｈｅ）－Ａｒｇ、Ｈｉｓ－Ｎａｌ－Ａｒｇ和Ｈｉｓ－（Ｄ－Ｎａｌ）－Ａｒｇ的氨基酸序列，和　　　　其中Ｚ包括选自Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－Ｖａｌ和Ｌｙｓ－Ｐｒｏ－（Ｄ－Ｖａｌ）的氨基酸序列，和　　　　其中Ａａ↓［１］、Ａａ↓［２］、Ａａ↓［３］、Ａａ↓［４］、Ａａ↓［５］、Ａａ↓［６］和Ａａ↓［７］可以独立地是任何一种天然或非天然氨基酸残基或者缺失，和　　　　其中所述肽的羧基端是－Ｃ（＝Ｏ）－Ｂ１，其中Ｂ１选自ＯＨ、ＮＨ↓［２］、ＮＨＢ２、Ｎ（Ｂ２）（Ｂ３）、ＯＢ２和Ｂ２，其中Ｂ２和Ｂ３独立地选自可以被取代的Ｃ↓［１－６］烷基、可以被取代的Ｃ↓［２－６］链烯基、可以被取代的Ｃ↓［６－１０］芳基、可以被取代的Ｃ↓［７－１６］芳烷基和可以被取代的Ｃ↓［７－１６］烷基芳基；和　　　　其中所述肽的氨基端是（Ｂ４）ＨＮ－、（Ｂ４）（Ｂ５）Ｎ－或（Ｂ６）ＨＮ－，其中Ｂ４和Ｂ５独立地选自Ｈ、可以被取代的Ｃ↓［１－６］烷基、可以被取代的Ｃ↓［２－６］链烯基、可以被取代的Ｃ↓［６－１０］芳基、可以被取代的Ｃ↓［７－１６］芳烷基和可以被取代的Ｃ↓［７－１６］烷基芳基；Ｂ６是Ｂ４－Ｃ（＝Ｏ）－。...

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】

【专利技术属性】
技术研发人员：托马斯恩格尔布雷希特诺克尔德约纳森，瑟伦尼尔森，约尔延弗洛基尔，比亚内迪尤拉尔森，
申请(专利权)人：阿克申制药公司，
类型：发明
国别省市：DK[丹麦]