【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及,属于医药
技术介绍
斑马鱼是一种用于生长发育和遗传研究的重要模式生物,在过去20年已经成为一种研究胚胎发育的重要模式生物。目前斑马鱼已经获得较为完整的基因组学、分子遗传学和胚胎学的资料,并被广泛应用于环境毒物的监测,已经被用于环境中许多化学物质如有害重金属、农药以及卤代芳香烃化合物等致癌物的累积效应和毒性研究。斑马鱼胚胎和幼鱼体积很小,可用微孔培养板培养,故其适合于高通量筛选。同时斑马鱼属于脊椎动物,是一种活体研究体系,可保留药物的代谢动力学过程,故其与其他的体外研究体系相比更加适合用于中药这种复杂化学体系的药效学和毒性筛选。斑马鱼的受精卵或者鱼苗能够便利地从培养介质中吸收亲水或亲脂的物质,使得其检测中药的活性变得非常方便。 当前,采用斑马鱼进行中药药效筛选模型有一些报道,但是进行毒性筛选的研究报道较少,即使有部分报道和相关研究性的模型,但是缺乏相关的研究数据评估该模型的适宜性和可靠性,并成为成熟和认可的毒性筛选模型。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种易操作、准确度高的。本专利技术可以通过下列步骤来实现(I)将中药药材粉碎或者提取或者直接已经成药的中药复方。(2)根据初步的预实验,将样品溶于水中,配制成不同的浓度供试液。(3)试验时挑选大小相近、健康活泼的斑马鱼,随机投入到干净的玻璃缸中(每缸中12条),在试验期过程中不喂食,以避免饲料的影响,实验窜温度为(20±2)°C。试验开始后持续观察4h,同时在120h内不定时观察,至少每6h观察I次,发现死鱼及时捞出,(4)当鱼苗中毒停止呼吸以后,用小镊子夹鱼尾柄部,10分钟内鱼苗 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用模式生物斑马鱼筛选中药毒性的方法,其特征在于该方法包括以下步骤 (1)将中药药材粉碎或者提取或者直接已经成药的中药复方。(2)根据初步的预实验,将样品溶于水中,配制成不同的浓度供试液。(3)试验时挑选大小相近、健康活泼的斑马鱼,随机投入到干净的玻璃缸中(每缸中12条),在试验期过程中不喂食,以避免饲料的影响,实验窜温度为(20±2)°C。试验开始后持续观察4h,同时在120h内不定时观察,至少每6h观察I次,发现死鱼及时捞出, (4)当鱼苗中毒停止呼吸以后,用小镊子夹鱼尾柄部,10分钟内鱼苗不出现反应,则判断为死亡,计算各组斑马鱼累计死亡率并作记录。以寇氏法计算LC50及95%可信限。(5)根据LC50 进行毒性分级口 =LC50 < I. Omg,剧毒;LC50 = I. O 100. Omg,高毒;LC50=100. O 1000. Omg,中等毒性;LC50 = 1000 10000. Omg,...
【专利技术属性】
技术研发人员:钱勇,谢天培,魏国志,王新亮,邓春来,杨双明,
申请(专利权)人:上海佰年诗丹德检测技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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