一种高血压肝阳上亢证大鼠模型的制备方法技术

本发明专利技术涉及一种用于高血压肝阳上亢证中药筛选及药效评价的高血压肝阳上亢证模型的制备方法。在高血压大鼠模型的基础上连续灌服0.5～2.0g/ml的复方附子汤(含麻黄碱0～6.0mg/ml)，2～6周后制成高血压肝阳上亢证大鼠模型。针对高血压肝阳上亢证的中医证侯，将一般体征、面温、抓力、自主活动、血压作为高血压肝阳上亢证主要特征性指标。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于医药
，本专利技术涉及，该模型用于治疗高血压肝阳上亢证中药的筛选及药效评价。
技术介绍
高血压是最常见心血管病之一，全球患者超6亿，我国02年调查 达I. 6亿，并快速增长，需要长期治疗。高血压病是以动脉血压增高为主要临床表现的疾病。传统中医理论中并无“血压”的概念，目前较为公认的说法为古代文献记载的“眩晕”等证部分应相当于现代的高血压病的表现。多年来，众多学者致力于心脑血管病的研究，探索研究多种高血压中医证候动物模型，包括阴虚型、阳虚型、阴阳两虚型、实火型、肝阳上亢型、血瘀型等。肝阳上亢证为高血压常见证型。有研究表明，高血压属肝阳上亢证者占87%以上。肝阳上亢证以肾水亏于下，水不涵木，而致肝阳偏亢或肝阳绝对亢盛为主要病机，多见于高血压病，而高血压肝阳上亢证其主要病理生理基础为外周交感一肾上腺髓质功能偏亢。目前对相关证型的动物模型尚在探索中，本专利技术建立了一种用于治疗高血压肝阳上亢证中药筛选及药效评价的高血压肝阳上亢证动物模型的制备方法。通过此法制备的模型大鼠出现血压升高、面温升高、抓力下降、自主活动增多、尖叫、咬人、同笼打斗等行为学变化，即表现出中医肝阳上亢之“面部烘热”、“腰膝酸软”、“躁动不安”、“躁狂易怒”、“毛发干枯”等证侯；血管调节因子方面，出现RAAS系统功能亢奋，AngIKPRL和ALD含量均升高，cGRP水平下降，TXB2/6-k-PGFla 平衡破坏。中医认为，附子辛、甘，大热之品，入心、肾、脾经，具有助阳补火之功效，“其性走而不守”(《本草纲目》)；干姜性热，味辛，温中散寒，“干姜......守而不走”，“附子无姜不热”，二者相须为用。肉桂性热，味辛、甘，“通血脉，理疏不足，宣导百药”，又有补火助阳之效，三者联合应用，所致的肝阳上亢证较单味附子汤显效更快更持久。故在高血压动物模型的基础上，联合复方附子汤可制备高血压肝阳上亢证动物模型。目前在现代药理学对模型的筛选主要集中在生化指标方面，而本专利技术以中医证侯特征性指标为主要指标进行模型的制备，可为高血压肝阳上亢证中药筛选及药效评价提供更可靠的模型。肝阳上亢证常出现面部烘热、急躁易怒、心悸失眠等肝阳亢盛之证侯，同时伴有腰膝酸软、头重脚轻、脉弦或弦细数等肝肾阴虚为一般证侯。选用面部温度来量化“面部烘热”，用抓力量化“腰膝酸软”，用自主活动量化“躁动不安”，用眩晕时间及血压来量化“眩晕”，用一般行为观察的等级计数(以分级统计，I级为捉持颈部时尖叫、惊跳，II为捉持颈部时咬人，III级提尾时尖叫、惊跳甚至咬人或同笼频繁打斗)来显示“狂躁易怒”；“肾，其华在发”，肝阳上亢实为肾阴不制阳，故也观察毛发色泽。肝阳上亢模型大鼠在一定程度上均表现出面温升高、抓力下降、自主活动增多、眩晕时间延长、尖叫、咬人、同笼打斗等行为学变化及收缩压升高。因此，一般体征(毛发干枯、无光泽，尖叫、易怒、不易抓取、同笼打斗、撕咬)、面温、抓力、自主活动、血压可以作为肝阳上亢证中医证侯特征性指标。
技术实现思路
本专利技术的目的是建立一种用于治疗高血压肝阳上亢证中药筛选及药效评价的高血压肝阳上亢证模型的制备方法。为了解决上述技术问题，本专利技术通过以下技术方案实现在高血压大鼠模型的基础上连续灌服0. 5 2. Og/ml的复方附子汤(含麻黄碱0 6. Omg/ml)，2 6周后制成高血压肝阳上亢证大鼠模型。其中高血压大鼠模型可以是自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、肾性高血压大鼠或是SD大鼠连续灌服I. O %盐水后造成的闻血压大鼠。模型筛选指标为高血压肝阳上亢证中医证侯的特征性指标，主要为一般体征(毛发干枯、无光泽，尖叫、易怒、不易抓取、同笼打斗、撕咬)、面温、抓力、自主活动、血压。具体实施例方式实施例I I实验材料与仪器I. I造模药附子汤为附子(090702，四川)、肉桂(030127，广西)、干姜(090606，浙江)按I : I : I比例制成的水提液，浓度为lg/ml。以上各味药材经鉴定，附子为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的子根加工品，干姜为姜科植物Zingiberofficinale Rose.的干燥根莖，肉桂为樟科植物肉桂Cinnamomum cassia Presl.的干燥树皮。麻黄碱，纯度99% (解放军第八医院提供)，食盐(090605，浙江盐业集团公司)。1.2动物SD大鼠，雄性，180-220g，20只，由浙江省实验动物中心提供，合格证号SCXK (浙)20080033。1.3仪器CODA多通道无创伤大鼠尾动脉血压仪，美国Kent Scienfic公司；YLS-I多功能大鼠自主活动记录仪、YLS-13A大小鼠抓力测定仪，山东省医学科学院设备供应维修站；8877红外线非接触式额温量测器，北京东方海汇电子技术有限责任公司；LP123电子天平，常熟市衡器厂2实验方法2. I造模筛选出收缩压120mmHg以下的SD大鼠20只，随机分成2组正常对照组、模型对照组每组10只。造模第I周，每天灌服浓度为lg/ml的复方附子汤(含麻黄碱3.25mg/ml);第2周至4周，每天灌服复方附子汤(含麻黄碱5. 00mg/ml),灌胃容积均为lml/100g，并自由饮用1%盐水。同时，正常给予蒸馏水，灌胃容积为lml/100g，持续4周。2.2测定指标于造模后14d、28d观察大鼠一般体征(性情变化，以分级统计，I级为尖叫，II级为不易抓取、惊跳，III级咬人、同笼打斗)。于造模第7d、14d、21d、28d时测定自主活动、抓力、面部温度、血压。造模末期，禁食IOh后采血，采用放免法测定肾素(PRL)、血管紧张素II (AngII)、醛固酮(ALD)、心钠素(ANP)、降钙素相关基因肽(cGRP)、内皮素(ET)。2.3统计分析计量资料数据以X±s表示，组间比较采用t-test检验；计数资料米用X2检验。3实验结果3.1 —般体征正常对照组大鼠皮毛干爽光滑，活泼、易动、精神状态良好，模型对照组大鼠毛发干枯、无光泽，尖叫、易怒、不易抓取、同笼打斗、撕咬(P<0.01)。表I大鼠一般体征的观察士S，n=10)本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高血压肝阳上亢证大鼠模型的制备方法，其特征在于在高血压大鼠模型的基础上连续灌服0. 5 2. Og/ml的复方附子汤(含麻黄碱0 6. Omg/ml)，2 6周后制成高血压肝阳上亢证大鼠模型。2.根据权利要求I一种高血压肝阳上亢证大鼠模型的制备方法，其特征是高血压大鼠模型可以是自发性高血压大鼠(SHR大鼠)、肾性高血压大鼠或是SD大鼠灌服连续灌服I.0%盐水后造成的高血压大鼠。3.根据权利要求I一种高血压肝阳上亢证大鼠模型的制备方法，其特征是复方附子汤制备方法为取附子干姜...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈素红，吕圭源，苏洁，李巍，陈宁，
申请(专利权)人：温州医学院，
类型：发明
国别省市：