一种肝脏细胞的miR-429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用制造技术

本发明专利技术涉及一种肝脏细胞的miR‑429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用，调节物包括促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物；促进肝细胞增殖的调节物包括促进原癌基因Jun表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；抑制肝细胞增殖的调节物包括抑制原癌基因Jun表达和/或抑制肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；调节肝脏细胞药物包括含有促进肝细胞增殖的调节物的药物和/或含有抑制肝细胞增殖的调节物的药物以调节肝细胞的增殖或凋亡。本申请人研究出了miR‑429模拟物和miR‑429抑制物，二者分别具有显著的抑制肝细胞增殖和促进肝细胞增殖的作用，故可制成相应的药物，来实现对肝细胞的调节。

A Mi-429 Regulator for Liver Cells and Its Application in the Preparation of Drugs for Therapeutic Regulation of Liver Cells

The present invention relates to a Mir 429 regulator of liver cells and its application in the preparation and treatment of drugs regulating liver cells, including regulators promoting hepatocyte proliferation and/or inhibiting hepatocyte proliferation; regulators promoting hepatocyte proliferation include regulators promoting the expression of proto-oncogene Jun and/or promoting the expression of hepatocyte proliferation-related protein; Regulators of proliferation include those that inhibit the expression of proto-oncogene Jun and/or the expression of hepatocyte proliferation-related proteins, and those that regulate hepatocyte proliferation include those containing regulators that promote hepatocyte proliferation and/or those containing regulators that inhibit hepatocyte proliferation to regulate hepatocyte proliferation or apoptosis. The applicant has developed mimic and inhibitor of microRNA 429, which can significantly inhibit the proliferation of hepatocytes and promote the proliferation of hepatocytes, respectively. Therefore, they can be made into corresponding drugs to achieve the regulation of hepatocytes.

【技术实现步骤摘要】
一种肝脏细胞的miR-429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用
本专利技术属于生物医药
，具体涉及一种能够调节肝脏细胞的miR-429的模拟物、抑制物、抑制物的重组表达载体及其用途。
技术介绍
肝脏是机体的重要器官，具有储存、代谢、生物转化、解毒、造血、合成胆色素、分泌、再生等功能。研究肝再生相关基因对肝细胞增殖和肝再生的作用，对揭示肝再生机制、构建人工肝、建立治疗和预防肝病方法等都有重要理论意义和应用价值。microRNA(miRNA)是一类由内源基因编码的长度约为22个核苷酸的非编码单链RNA分子，到目前为止，在动植物以及病毒中已经发现有许多种miRNA分子。miRNA识别并连接靶基因转录的mRNA3'UTR，从而阻断靶基因的翻译和蛋白在转录后水平的表达。根据靶基因的功能不同，miRNA可参与细胞周期、分化和凋亡，越来越多地受到研究人员的高度重视。miR-429是miR-200s家族中的一员，同该家族其余4个成员miR-200c、miR-141、miR-200b和miR-200a广泛表达于不同组织的上皮细胞中。其能调节Jun、TRAF6、HSPA9、ZEB2等多个靶基因的表达。其中原癌基因Jun能调节细胞增殖、分化和发育。细胞质中的Jun和fos蛋白经修饰加工后，跨核膜进入细胞核内，二者通过亮氨酸拉链形式构成异源二聚体(Fos:Jun)或同源二聚体(Jun:Jun)，与目的基因上调节区转录激活蛋白1(AP1)结合位点相结合后影响目的基因表达，进而调节细胞的增殖和凋亡。
技术实现思路
本专利技术提供了一种肝脏细胞的miR-429调节物及其在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用，该miR-429模拟物及抑制物可用于调节Jun蛋白表达，以及调节肝细胞增殖或凋亡的基础医学和临床医学的研究，有利于为开发相关药物提供高效的、大通量的筛选和评价平台及手段，将大大促进miRNA在肿瘤预防、诊断和治疗中的应用。本专利技术的目的是通过以下技术方案实现的：一种肝脏细胞的miR-429调节物在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用，所述调节物包括促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物；所述促进肝细胞增殖的调节物包括促进原癌基因Jun表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述抑制肝细胞增殖的调节物包括抑制原癌基因Jun表达和/或抑制肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述调节肝脏细胞药物包括含有促进肝细胞增殖的调节物的药物和/或含有抑制肝细胞增殖的调节物的药物以调节肝细胞的增殖或凋亡。进一步地，所述抑制肝细胞增殖的调节物包括能够抑制原癌基因Jun表达的miR-429模拟物，所述miR-429模拟物的碱基序列为：SEQIDNO.1，该SEQIDNO.1为：uaauacugucugguaaugccgu。进一步地，所述促进肝细胞增殖的调节物包括能够促进原癌基因Jun表达的抑制物，所述抑制物的碱基序列为：SEQIDNO.2，该SEQIDNO.2为：agagagaccgtcgggggctgaggggcaacgaagaaaaaaaataacacagagagacagacttgagaacttgacaagttgcgacggagagaaaaaagaagtgtccgagaactaaagccaagggtatccaagttggactgggttgcgtcctgacggcgcccccagtgtgcacgagtgggaaggacttggcgcgccctcccttggcgtggagccagggagcggccgcctgcgggctgccccgctttgcggacgggctgtccccgcgcgaacggaacgttggacttttcgttaacattgaccaagaactgcatggacctaacattcgatctcattcagtattaaaggggggagggggagggggttacaaactgcaatagagactgtagattgcttctgtagtactccttaagaacacaaagcggggggagggttggggaggggcggcaggagggaggtttgtgagagcgaggctgagcctacagatgaactctttctggcctgccttcgttaactgtgtatgtacatatatatattttttaatttgatgaaagctgattactgtcaataaacagcttcatgcctttgtaagttatttcttgtttgtttgtttgggtatcctgcccagtgttgtttgtaaataagagatttggagcactctgagtttaccatttgtaataaagtatataatttttttatgttttgtttctgaaaattccagaaaggatatttaagaaaatacaataaactattggaaagtactcccctaacctcttttctgcatcatctgtagatactagctatctaggtggagttgaaagagttaagaatgtcgattaaaatcactctcagtgcttcttactattaagcagtaaaaactgttctctattagactttagaaataaatgtacctgatgtacctgatgctatggtcaggttatactcctcctcccccagctatctatatggaattgcttaccaaaggatagtgcgatgtttcaggaggctggaggaaggggggttgcagtggagagggacagcccactgagaagtcaaacatttcaaagtttggattgtatcaagtggcatgtgctgtgaccatttataatgttagtagaaattttacaataggtgcttattctcaaagcaggaattggtggcagattttacaaaagatgtatccttccaatttggaatcttctctttgacaattcctagataaaaagatggcctttgcttatgaatatttataacagcattcttgtcacaataaatgtattcaaataccaaaaaaaaaaaaaaaaa。进一步地，所述抑制物为能够与所述miR-429进行结合的抑制物，所述抑制物与所述miR-429的结合位点为CAGTATT。进一步地，所述抑制物的碱基序列SEQIDNO.2中的5'和3'末端均添加有限制性酶切位点，该限制性酶切位点为在酶切后产生粘性末端的限制性酶切位点。进一步地，所述的限制性酶切位点分别为XhoⅠ和NotⅠ对应的核苷酸序列；所述XhoⅠ酶切位点位于5'末端，所述NotⅠ酶切位点位于3'末端。进一步地，所述促进肝细胞增殖的调节物还包括能够促进肝脏细胞增殖的重组表达载体，所述重组表达载体中包含所述的抑制物。进一步地，所述重组表达载体中的标记基因为双荧光素酶。进一步地，所述重组表达载体是通过将所述的抑制物连接到psi-CHECK-2(即psi-CHECKTM-2)载体中得到的重组表达载体。一种能够调节肝脏细胞的调节物，所述调节物为上述任意一项所述的调节物，该调节物为上述的促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物。一种肝脏细胞的调节物在制备治疗促进、抑制肝脏细胞增殖中的应用，所述调节物为上述任一项所述的本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种肝脏细胞的miR‑429调节物在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用，其特征在于，所述调节物包括促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物；所述促进肝细胞增殖的调节物包括促进原癌基因Jun表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述抑制肝细胞增殖的调节物包括抑制原癌基因Jun表达和/或抑制肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述调节肝脏细胞药物包括含有促进肝细胞增殖的调节物的药物和/或含有抑制肝细胞增殖的调节物的药物以调节肝细胞的增殖或凋亡。

【技术特征摘要】
1.一种肝脏细胞的miR-429调节物在制备治疗调节肝脏细胞药物中的应用，其特征在于，所述调节物包括促进肝细胞增殖的调节物和/或抑制肝细胞增殖的调节物；所述促进肝细胞增殖的调节物包括促进原癌基因Jun表达和/或促进肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述抑制肝细胞增殖的调节物包括抑制原癌基因Jun表达和/或抑制肝细胞增殖相关蛋白表达的调节物；所述调节肝脏细胞药物包括含有促进肝细胞增殖的调节物的药物和/或含有抑制肝细胞增殖的调节物的药物以调节肝细胞的增殖或凋亡。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述抑制肝细胞增殖的调节物包括能够抑制原癌基因Jun表达的miR-429模拟物，所述miR-429模拟物的碱基序列为：SEQIDNO.1。3.根据权利要求1或2所述的应用，其特征在于：所述促进肝细胞增殖的调节物包括能够促进原癌基因Jun表达的抑制物，所述抑制物的碱基序列为：SEQIDNO.2。4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述抑制物为能够与所述miR-429进行结合的抑制物，所述抑制物与所述miR-429的结合位点为CAGTATT。5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述抑制物的...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐存拴，李玲玲，张春艳，郭建林，常翠芳，靳伟，石金保，
申请(专利权)人：河南师范大学，
类型：发明
国别省市：河南,41