用于治疗急性肝功能衰竭的药物制造技术

本发明专利技术涉及用作治疗或预防急性肝衰竭的药物的化合物，其中所述急性肝衰竭是在给予该化合物之前或之后由于中毒而诱发的。因此，本发明专利技术涉及用于治疗中毒的化合物，其中该中毒未经治疗预期会导致急性肝功能衰竭或未经治疗会足以诱发急性肝功能衰竭。本发明专利技术还提供用于治疗的化合物，以及治疗足以诱发急性肝衰竭的中毒的相应方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗急性肝功能衰竭的药物本专利技术涉及用作治疗或预防急性肝功能衰竭的药物的化合物，该急性肝功能衰竭例如是在给予该化合物之前或之后由于中毒而诱发的。因此，本专利技术涉及用于治疗中毒的化合物，该中毒如果未经治疗预期会导致急性肝功能衰竭或如果未经治疗足以诱发急性肝功能衰竭。本专利技术还提供用于所述治疗的化合物，以及治疗足以诱发急性肝功能衰竭的中毒的相应方法。优选在中毒后的最多4天内给予该化合物，以防止由中毒引起的急性肝功能衰竭。该化合物可以配制成药物组合物，优选用于静脉注射，例如作为溶液(优选作为水溶液)、作为脂质体和/或作为胆固醇酯和/或作为纳米颗粒(例如与载体一起)。已经显示，给予该化合物显著地防止了由于事先注射过量对乙酰氨基酚或注射足以诱发细胞凋亡的FAS激动剂抗体而人工诱发的急性肝功能衰竭。该化合物适用于静脉注射，并且已显示出预防或防止急性肝功能衰竭的显著活性，在不存在所述化合物的情况下，预期所述急性肝功能衰竭是由中毒(例如存在毒性剂，如非病毒毒性剂或病毒)引起的。现有技术的说明US2012/0264805描述了大量与编码p53上调细胞凋亡调节因子(PUMA)的mRNA杂交的siRNA分子，其用于在治疗功能性肝功能受损中和在预防急性肝功能衰竭中减少或防止PUMA的表达。已知用于治疗急性肝功能衰竭的治疗包括在病毒诱发的肝功能衰竭的情况下使用抗病毒治疗和在药物滥用的情况下(例如在对乙酰氨基酚中毒的情况下)给予化学解毒剂(例如乙酰半胱氨酸)。Ward等人,ProcNatlAcadSciUSA111,12169-12174(2014)描述了患有扑热息痛(对乙酰氨基酚)肝毒性或缺血性肝炎的患者中miR-125b-5p的血清水平升高。EP2261334B1描述了稳定的RNA分子，其5′核苷酸在5′碳上具有磷酸化和/或在3个5′-末端核苷酸中至少一个的2′碳上具有O-烷基化。EP2123579B1描述了稳定的RNA分子，其具有2个5′-末端核苷酸的2′-O-烷基修饰和至少一个嘧啶的2′-O-烷基修饰。Sharma等人,Hepatology53,1651-1661(2011)描述了microRNA-221调节FAS诱导的暴发性肝功能衰竭。EP2203559B1描述了一种反义寡核苷酸，用于在HCV的治疗中抑制miR-122，该反义寡核苷酸是锁核酸。EP2205737B1描述了具有7-10个核碱基的寡聚物，其是锁核酸。专利技术目的本专利技术的一个目的是提供一种化合物，其用于预防或至少显著减少急性肝功能衰竭，优选用于由于存在毒性剂而预期会发生的急性肝功能衰竭。专利技术描述本专利技术通过权利要求的特征、特别是通过提供具有miR-125b-5p的核碱基序列(UCCCUGAGACCCUAACUUGUGA，SEQIDNO:1)的化合物实现了该目的，其用于治疗足以引起急性肝功能衰竭的中毒。化合物miR-125b-5p优选包含在药学上可接受的注射用(例如静脉注射用)制剂中。该制剂例如可以是脂质体制剂，其含有该化合物、化学修饰物(例如通过连接的胆固醇酯)、与纳米颗粒结合的miR-125b-5p模拟物、或使用腺相关的载体，或这些中至少两种的组合。本文中，关于miRNA是指21至22nt，通常为22nt的功能性miRNA分子，其在细胞中由通常具有66nt的前体miRNA产生，该前体miRNA是初级miRNA的转录产物。化合物miR-125b-5p可以是化学修饰的(如现有技术所知，用于增强在血液中的稳定性)，例如以锁核酸的形式，通过在5′-末端核苷酸的5′碳上的磷酸化和/或3个5′-末端核苷酸中至少一个的2′碳上的O-烷基化、2个5′-末端核苷酸的2′-O-烷基修饰和至少一个嘧啶的2′-O-烷基修饰，或以肽核酸的形式，或这些中至少两种的组合，其中该化合物具有SEQIDNO:1的核碱基序列。对于锁核酸，胞嘧啶部分可以是5′-甲基胞嘧啶，并且所有核苷间键可以是硫代磷酸酯键。该化合物作为药物的用途具有直接减少或预防急性肝功能衰竭的优点，因为在给予患者后不需要来自编码序列的转录。该化合物优选被配制成在中毒后最多4天内、最多3天内、优选最多2天内、更优选最多1天内、最优选最多12小时至6小时内给予患者。其中，在没有合适治疗的情况下，该中毒足以造成急性肝功能衰竭。没有治疗导致急性肝功能衰竭的中毒可以例如是由于病毒剂(如乙型肝炎病毒)和/或由于药物的存在(例如由于药物滥用)引起的，所述药物例如选自扑热息痛(对乙酰氨基酚)和/或酒精。优选地，该化合物用于治疗足以引起急性肝功能衰竭的中毒，其中该中毒是由合成或天然化合物(例如对乙酰氨基酚)引起的，并且优选不包括病毒感染，其中进一步优选所述中毒是在治疗前最多4天、更优选在治疗前最多3天、2天或1天发生的。出于本专利技术的目的，急性肝功能衰竭包括暴发性和亚暴发性(subfulminant)肝功能衰竭，并且例如与未患病(如健康的个人)的相应参数相比，其特征在于谷胱甘肽的消耗，例如较低的血清谷胱甘肽与谷胱甘肽二硫化物的比例(GSH/GSSG水平)、增加的TUNEL阳性细胞核、较高的丙氨酸转氨酶血清水平、较高的天冬氨酸转氨酶血清水平、增加的血清谷氨酸脱氢酶的血清水平、增加的血清线粒体DNA水平和肝脏形态恶化。优选地，用于本专利技术目的的急性肝功能衰竭不包括肝癌。实施例表明，在发生足以导致急性肝功能衰竭的中毒(例如由致死剂量的对乙酰氨基酚或由诱发细胞凋亡的致死剂量的抗-CD95抗体导致的中毒)之后，将具有miR-125b-5p的核碱基序列的化合物给予哺乳动物(例如小鼠)可以预防急性肝功能衰竭。关于对乙酰氨基酚，将小鼠中获得的结果作为外推的基础，在人类中，在中毒后最多4天、优选最多3天、更优选最多2天或1天给予该化合物将使急性肝功能衰竭被减少或预防到至少能够存活的程度。现在通过实施例描述本专利技术，使用对乙酰氨基酚或FAS激动剂抗体来代表导致急性肝功能衰竭的中毒。在本文中，并且在实施例中，miRNA也称为模拟物，因为它可以通过合成产生。模拟物可任选地具有化学修饰。在附图中，在没有用于抵抗急性肝功能衰竭(例如通过施用对乙酰氨基酚或通过抗-CD95抗体引起的急性肝功能衰竭)的化合物的情况下的数据被指定为对照，在没有毒剂以及没有用于抵抗急性肝功能衰竭的化合物的情况下产生的数据被指定为未受损伤的，在优选化合物miR-125b-5p存在下产生的数据被指定为miR-125b-5p模拟物。*表示P<0.05，双尾学生t检验；**表示P<0.01，双尾学生t检验。这些实施例参考了附图，其中:-图1显示用miRNA转染、随后用对乙酰氨基酚使之中毒的培养原代肝细胞中的GSH/GSSG比率，-图2显示用miRNA抑制剂转染、随后用对乙酰氨基酚使之中毒的培养原代肝细胞中的GSH/GSSG比率，-图3显示用miRNA或用miRNA抑制剂转染、随后通过抗-CD95抗体诱发细胞凋亡的培养原代肝细胞中的TUNEL试验结果，-图4显示miR-125b-5p在病毒体转导的小鼠中的相对表达，-图5显示在注射乙酰氨基酚诱发急性肝功能衰竭后过表达miR-125b-5p的小鼠的存活率，-图6显示对照和本专利技术的病毒颗粒的AST(左栏)和ALT(右栏)的血清水平，-图7显示注射本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.化合物，其用于治疗足以引起急性肝功能衰竭的中毒，其特征在于所述化合物具有SEQ ID NO:1(miR‑125b‑5p)的核碱基序列。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.06.06 EP 16173158.31.化合物，其用于治疗足以引起急性肝功能衰竭的中毒，其特征在于所述化合物具有SEQIDNO:1(miR-125b-5p)的核碱基序列。2.根据权利要求1的化合物，其特征在于该化合物具有由SEQIDNO:1组成的核碱基序列。3.根据前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于所述核碱基序列是RNA、化学稳定的RNA、化学修饰的RNA的形式和/或被配制成脂质体和/或纳米颗粒的形式。4.根据前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于所述中毒发生在治疗前最多4天。5.根据前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于所述中毒是由对乙酰氨基酚和/或其他药物和/或酒精和/或病毒引起的。6.根据前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于所述急性肝功能衰竭是由肝细胞凋亡和/或坏死引起的。7...

【专利技术属性】
技术研发人员：A夏尔马，M欧特，T坎茨，D杨，
申请(专利权)人：汉诺威医学院，
类型：发明
国别省市：德国,DE