一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法技术

本发明专利技术公开了一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，具体按照以下步骤实施：取经大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液，将其浓缩至体积为原来的1/5，得到预处理废液；用氯仿萃取预处理废液，得到水相一；用苯萃取水相一，得到水相二；用石油醚萃取水相二，得到水相三；将水相三用水稀释后加入改性蛭石吸附剂，然后搅拌、静置、过滤，收集滤渣；往滤渣中加入相当于滤渣重量50倍的水，然后在60‑80℃下超声处理，处理完毕后过滤，收集滤液；滤液减压浓缩后重结晶，即得莽草酸提取物。本发明专利技术能够对大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液中的莽草酸进行很好的提取，得到的产品品质好，含量高，具备广泛应用前景。

A method for preparing shikimic acid extract from waste liquid of Ginkgo biloba extract chromatography

The invention discloses a method for preparing shikimic acid extract from waste liquor of Ginkgo biloba extract chromatography, which is implemented in the following steps: taking waste liquor from the preparation of Ginkgo biloba extract by macroporous resin column chromatography, concentrating it to 1/5 of its original volume, and obtaining pretreated waste liquor; using chloroform extraction to pretreat waste liquor, to obtain water phase; using benzene to extract water phase to obtain water phase; 2. Extracting water phase two with petroleum ether to obtain water phase three; diluting water phase three with modified vermiculite adsorbent, stirring, stationary, filtering, and collecting filter residue; adding water equivalent to 50 times the weight of filter residue into filter residue, then ultrasonic treatment at 60 80 C, after treatment, filtering and collecting filtrate; recrystallization of filtrate after vacuum concentration, shikimic acid extract is obtained. The invention can extract shikimic acid from waste liquid produced in the preparation of Ginkgo biloba extract by macroporous resin column chromatography, and the product has good quality and high content, and has broad application prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法
本专利技术属于植物提纯
，具体涉及一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法。
技术介绍
银杏叶的成分比较复杂，化学成分主要有黄酮苷类、萜内酯类、聚异戊烯醇类、6-羟基犬尿喹啉酸、有机酸、银杏酚酸类及烷基酚、烷基酚酸(又称银杏酸)4ˊ-甲氧基吡哆醇等，长期以来，人们对银杏叶的研究重点主要集中在银杏叶中银杏萜内酯类和黄酮苷类成分的提取，而其他化学成分则随提取废液废弃。近年来，随着罗氏公司公布抗禽流感特效药"达菲"是由提炼自八角中的莽草酸为合成原料以来，莽草酸进入人们的视野，并受到越来越多的关注，而从天然植物中提取莽草酸也成为研究的热点。银杏叶中也含有一定量的莽草酸，因此，如何在银杏叶提取银杏萜内酯和黄酮苷后的废弃液中提取出莽草酸，也成为人们研究的方向。现有技术在提取银杏叶中银杏萜内酯和黄酮苷时，经常采用大孔树脂吸附进行提取，工艺过程中产生的层析液一般都作为废液处理。该废液中含有一定量的莽草酸，由于工业常用的大孔树脂对银杏叶提取液中的莽草酸吸附能力较弱，所以莽草酸一般都损失在上述废液中，难以利用。公布号为CN108191639A的中国专利技术专利公开了一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，该方法仍然是采用大孔树脂层析柱对废液中的莽草酸进行提取，因此提取出来的莽草酸的含量低，最高仅在50％左右，如果要将其应用于医疗领域，还需进一步纯化，因此，很有必要开发出一种新的提取工艺，以提高从银杏叶提取物层析废液中提取到的莽草酸提取物的含量。
技术实现思路
本专利技术提供了一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，解决了现有技术中从银杏叶提取物层析废液中提取到的莽草酸提取物的含量较低的问题。本专利技术提供了一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，具体按照以下步骤实施：步骤1，取经大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液，将废液减压浓缩至体积为原来的1/5，得到预处理废液；步骤2，用相当于预处理废液体积1/2的氯仿萃取预处理废液2-3次，保留水相，得到水相一；再用相当于预处理废液体积1/2的苯萃取水相一2-3次，继续保留水相，得到水相二；最后用相当于预处理废液体积1/2的石油醚萃取水相二2-3次，继续保留水相，得到水相三；步骤3，将水相三煮沸，并保持沸腾状态15min，冷却后用水稀释5倍后往其中加入改性蛭石吸附剂，然后在80-100r/min的搅拌速度下搅拌20-30min，搅拌完毕后静置1-2h，再过滤，收集滤渣；其中，改性蛭石吸附剂与稀释5倍后的水相三的质量比为1：80-100；步骤4，往滤渣中加入相当于滤渣重量50倍的水，然后在60-80℃下超声处理20-30min，处理完毕后趁热过滤，收集滤液；步骤5，将滤液减压浓缩后采用丙酮重结晶，即得莽草酸提取物。优选的，所述大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液是指以银杏叶提取液经大孔树脂柱层析制备银杏叶提取物时产生的废液，所述废液为层析流穿液或层析洗涤液中的一种或两种。优选的，所述改性蛭石吸附剂的制备方法如下：将蛭石粉与壳聚糖粉按照8：1的质量比混合均匀，然后往其中加入异丙醇，并调成均匀糊状，得到糊状物；将糊状物在70℃下干燥2h，然后置于管式炉中，在氮气保护氛围下，以3℃/min的升温速度升温至150℃并保温0.5h；然后以3℃/min的升温速度升温至280℃并保温2h，保温完毕后自然冷却至室温，得到干燥产品，将干燥产品研细后过10目筛，即得到所述改性蛭石吸附剂。优选的，所述蛭石粉与所述壳聚糖粉的粒径均为20目。优选的，所述步骤4中超声处理的超声波功率为120W，超声频率为32kHz。与现有技术相比，本专利技术的有益效果在于：1)本专利技术首先将经大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液浓缩，使其体积减少，有利于减少后续萃取操作中所用有机溶剂的用量。2)本专利技术采用三级萃取工艺对废液进行萃取，利用不溶莽草酸的有机溶剂氯仿、苯、石油醚除去了废液中大部分能够溶于有机溶剂的干扰杂质，如没有被提取完全的黄酮苷类、萜内酯类成分以及其他易溶于有机溶剂中的化学成分，从而使废液中有机酸、尤其是莽草酸的纯度得到提高；银杏叶中含有一定量的原儿茶酸，其能够高温分解成二氧化碳；还含有酚酸类物质，其含量约占银杏叶干重的1-2％，主要是由银杏酸、白果酚、白果二酚、白果酸、氢化白果酸、氢化白果亚酸组成，这类化合物的溶解性质比较接近脂肪酸，难溶于水和一般有机溶剂，但是易溶于苯，在萃取的时候也能够将这一类酸除去；此外，6-羟基犬尿喹啉酸在有机溶剂和水中均有一定的溶解性，经过有机溶剂萃取后，仍有少量6-羟基犬尿喹啉酸进入水相，和莽草酸混杂在一起。3)经过三级萃取后，废液中大部分的有机物得到了去除，主要剩余莽草酸、醇类以及少量的其它有机酸，本专利技术利用改性蛭石吸附剂来对废液做进一步处理，蛭石经过壳聚糖改性后，壳聚糖分子中胺基活化，在蛭石孔隙内部产生众多能够和羧基相结合的活性位点，同时蛭石的表面也会形成聚电解质膜，活性位点和聚电解质膜均能有针对性的和羧基结合，从而使改性蛭石吸附剂吸附羧酸的能力大大提高，同时，废液中的醇类基本上不会被改性蛭石吸附剂吸附，从而将羧酸与醇类分离开来，即将莽草酸与醇类分离出来，莽草酸得到进一步的纯化；吸附完毕后得到的吸附有莽草酸的吸附剂再在高温和超声条件下解吸，超声波能够在吸附于吸附剂上的莽草酸的分子间产生气泡或空穴，从而使莽草酸分子与吸附剂的结合能力减弱，高温条件使超声波的这种功能得到强化，因此吸附剂上的莽草酸分子能够大量解吸，并溶于高温水中，趁热过滤即可将吸附剂与莽草酸分离开来。4)本专利技术能够对大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液中的莽草酸进行很好的提取，得到的产品品质好，含量高，具备广泛应用前景。具体实施方式为了使本领域技术人员更好地理解本专利技术的技术方案能予以实施，下面结合具体实施例来对本专利技术作进一步说明，但所举实施例不作为对本专利技术的限定。下述各实施例中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法；所用材料如无特殊说明，均可在市场上购买得到。实施例1一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，具体按照以下步骤实施：步骤1，取以银杏叶提取液经大孔树脂柱层析制备银杏叶提取物时产生的层析流穿液10L，该废液中莽草酸的含量为0.86％，将废液减压浓缩至体积为2L，得到预处理废液；步骤2，用1L的氯仿萃取预处理废液2次，保留水相，得到水相一；再用1L的苯萃取水相一2次，继续保留水相，得到水相二；最后用1L的石油醚萃取水相二2次，继续保留水相，得到1.76L的水相三；步骤3，将1.76L的水相三煮沸，并保持沸腾状态15min，冷却后用水稀释至8.8L，再往其中加入110g改性蛭石吸附剂，然后在80r/min的搅拌速度下搅拌30min，搅拌完毕后静置1h，然后过滤，收集滤渣；步骤4，往滤渣中加入相当于滤渣重量50倍的水，然后在60℃下超声处理30min，超声处理完毕后过滤，收集滤液；其中，超声处理的超声波功率为120W，超声频率为32kHz；步骤5，将滤液减压浓缩至干后得到干浸膏，将干浸膏与丙酮按照1g：10mL的比例进行重结晶，重结晶完毕即得到73.46g纯度为98.8％的莽草酸提取物，经计算，其本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1，取经大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液，将废液减压浓缩至体积为原来的1/5，得到预处理废液；步骤2，用相当于预处理废液体积1/2的氯仿萃取预处理废液2‑3次，保留水相，得到水相一；再用相当于预处理废液体积1/2的苯萃取水相一2‑3次，继续保留水相，得到水相二；最后用相当于预处理废液体积1/2的石油醚萃取水相二2‑3次，继续保留水相，得到水相三；步骤3，将水相三煮沸，并保持沸腾状态15min，冷却后用水稀释5倍后往其中加入改性蛭石吸附剂，然后在80‑100r/min的搅拌速度下搅拌20‑30min，搅拌完毕后静置1‑2h，再过滤，收集滤渣；其中，改性蛭石吸附剂与稀释5倍后的水相三的质量比为1：80‑100；步骤4，往滤渣中加入相当于滤渣重量50倍的水，然后在60‑80℃下超声处理20‑30min，处理完毕后趁热过滤，收集滤液；步骤5，将滤液减压浓缩后采用丙酮重结晶，即得莽草酸提取物。

【技术特征摘要】
1.一种从银杏叶提取物层析废液中制备莽草酸提取物的方法，其特征在于，具体按照以下步骤实施：步骤1，取经大孔树脂柱层析制备银杏提取物时产生的废液，将废液减压浓缩至体积为原来的1/5，得到预处理废液；步骤2，用相当于预处理废液体积1/2的氯仿萃取预处理废液2-3次，保留水相，得到水相一；再用相当于预处理废液体积1/2的苯萃取水相一2-3次，继续保留水相，得到水相二；最后用相当于预处理废液体积1/2的石油醚萃取水相二2-3次，继续保留水相，得到水相三；步骤3，将水相三煮沸，并保持沸腾状态15min，冷却后用水稀释5倍后往其中加入改性蛭石吸附剂，然后在80-100r/min的搅拌速度下搅拌20-30min，搅拌完毕后静置1-2h，再过滤，收集滤渣；其中，改性蛭石吸附剂与稀释5倍后的水相三的质量比为1：80-100；步骤4，往滤渣中加入相当于滤渣重量50倍的水，然后在60-80℃下超声处理20-30min，处理完毕后趁热过滤，收集滤液；步骤5，将滤液减压浓缩后采用丙酮重结晶，即得莽草酸提取物。2.根据权利要求1所述的从银杏叶提取物层析废液中制...

【专利技术属性】
技术研发人员：尚淑梅，高晓旭，张宗学，杨银，周丽娟，田玉红，陈世美，
申请(专利权)人：长江师范学院，
类型：发明
国别省市：重庆,50