一种低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白的制备方法技术

本发明专利技术公开了一种低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白的制备方法。本发明专利技术公开的低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白的制备方法包括：将大豆豆粕与水混合后，调节pH值大于7，离心，使蛋白质进入上清液中，收集上清液，该上清液即为蛋白提取液；调节蛋白提取液的pH值小于7，离心，使蛋白质进入沉淀中，收集沉淀，该沉淀即为酸沉大豆分离蛋白；向酸沉大豆分离蛋白中加水，调节pH至6.5～7.5，得到酸沉大豆分离蛋白溶液；向酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶，孵育，得到大豆分离蛋白。本发明专利技术的方法得到的大豆分离蛋白可以降解7S亚基，而11S亚基被完整保留，且植酸与己醛含量明显下降，具有很好的市场前景。

A preparation method of soybean protein isolate with low sensitization and phytic acid deodorization

The invention discloses a preparation method of low sensitization and low phytic acid deodorizing soybean protein isolate. The preparation method of the low sensitization and low phytic acid deodorizing soybean protein isolate disclosed by the invention includes: mixing soybean meal with water, adjusting the pH value to be greater than 7, centrifuging, making the protein enter the supernatant, collecting the supernatant, which is the protein extract; adjusting the pH value of the protein extract to be less than 7, centrifuging, making the protein enter the precipitation and collecting the precipitation, which is acid. Soybean protein isolate was precipitated by adding water to the acid-precipitated soybean protein isolate and adjusting the pH to 6.5-7.5 to obtain the acid-precipitated soybean protein isolate solution; neutral protease was added to the acid-precipitated soybean protein isolate solution and incubated to obtain soybean protein isolate. The soybean protein isolate obtained by the method of the invention can degrade 7S subunit, while 11S subunit is completely retained, and the content of phytic acid and hexanal decreases significantly, which has a good market prospect.

【技术实现步骤摘要】
一种低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白的制备方法
本专利技术涉及生物
中，一种低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白的制备方法。
技术介绍
大豆分离蛋白(SPI)是以低温脱脂豆粕为原料，经过碱溶酸沉工序制得的一种蛋白含量高达90％以上的功能性食品添加剂。但由于大豆分离蛋白自身存在的缺陷，一定程度上限制了其应用范围和使用量。首先，大豆蛋白是典型的致敏源之一，限制了食用人群。其中，大豆分离蛋白所含的β-伴大豆球蛋白(7S蛋白)被认为是主要的致敏组分。其次，大豆分离蛋白具有较重的豆腥味(主要成分是己醛)，影响了食品的风味。此外，大豆分离蛋白具有一定的植酸含量。植酸被证实是一种抗营养因子，会妨碍蛋白质及金属离子的消化和吸收。酶解是一种常用的降低蛋白致敏性的方法。然而，目前对大豆蛋白采取的酶解缺少针对性；在水解7S蛋白的同时，其它蛋白组分如11S经过水解会产生苦味肽。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是如何降低大豆分离蛋白的致敏性和植酸含量，以及降低大豆分离蛋白腥味。为解决上述技术问题，本专利技术首先提供了大豆分离蛋白的制备方法，所述方法包括：1)将大豆豆粕与水混合后，然后调节pH值，得到混合物料，所述混合物料的pH大于7；将所述混合物料离心，使蛋白质进入上清液中，收集上清液，该上清液即为蛋白提取液；2)调节所述蛋白提取液的pH值，得到酸沉前液，所述酸沉前液的pH小于7；将所述酸沉前液离心，使蛋白质进入沉淀中，收集沉淀，该沉淀即为酸沉大豆分离蛋白；3)向所述酸沉大豆分离蛋白中加水，然后调节pH值，得到酸沉大豆分离蛋白溶液，所述酸沉大豆分离蛋白溶液的pH为6.5～7.5；向所述酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶，得到中性蛋白酶酶解前液；孵育所述中性蛋白酶酶解前液进行酶解，得到中性蛋白酶酶解产物，所述中性蛋白酶酶解产物即为大豆分离蛋白。上述方法中，大豆豆粕是大豆提取豆油后得到的一种副产品。所述大豆豆粕可为脱脂豆粕。所述脱脂豆粕具体可为低温脱脂豆粕。所述低温脱脂豆粕具体可为山松生物制品有限公司产品。所述混合物料中大豆豆粕与水的质量比可为1:(10～15)。进一步，所述混合物料中大豆豆粕与水的质量比可为1:10。所述混合物料的pH具体可为7.5～8.5。所述混合物料的pH进一步可为8。步骤1)还可包括在离心前将所述混合物料在40～50℃的温度下孵育50～60min。进一步，所述孵育的温度可为50℃。所述孵育的时间可为50min。所述孵育过程中，可对所述混合物料进行搅拌。步骤1)中调节pH可利用氢氧化钠进行。所述氢氧化钠可为食品级氢氧化钠。所述酸沉前液的pH具体可为4.8～5.2。进一步，所述酸沉前液的pH具体可为5。步骤2)中还可包括在离心前将所述酸沉前液孵育10～20min。所述孵育的时间具体可为20min。所述孵育过程中，可对所述酸沉前液进行搅拌。步骤2)中调节所述酸沉前液的pH可利用盐酸进行。所述盐酸可为食品级盐酸。所述酸沉大豆分离蛋白溶液的pH进一步可为7。步骤3)中，调节pH可利用氢氧化钠进行。所述氢氧化钠可为食品级氢氧化钠。步骤3)中，向所述酸沉大豆分离蛋白中加水时所述酸沉大豆分离蛋白与水的质量比可(10％～15％):(90％～85％)。上述方法中，所述中性蛋白酶酶解前液中所述中性蛋白酶与所述酸沉大豆分离蛋白的配比可为a1)或a2)：a1)(0.3-0.5)AU:100g；a2)0.4AU:100g。步骤3)中所述孵育的时间可为8～10min。步骤3)在向所述酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶前还可包括将所述酸沉大豆分离蛋白溶液进行加热。步骤3)中所述孵育的时间进一步可为10min。步骤3)中所述孵育可在50℃下进行。将所述酸沉大豆分离蛋白溶液进行加热可包括将所述酸沉大豆分离蛋白溶液于70～75℃加热10～15min然后再冷却至45～50℃。所述中性蛋白酶具体可为诺维信公司产品。上述方法在步骤2)前还可包括：向所述上清液中加入乳酸菌进行发酵得到所述蛋白提取液。上述方法中，将所述上清液利用乳酸菌进行发酵得到所述蛋白提取液可包括：向所述上清液中加入所述乳酸菌，得到发酵前液；将所述发酵前液发酵，得到发酵产物；所述发酵产物即为所述蛋白提取液。所述发酵前液中蛋白质与所述乳酸菌的配比可为b1)或b2)或b3)：b1)1g:(1×108～1.8×108)cfu；b2)1g:(1.25×108～1.8×108)cfu；b3)1g:(1.5×108～1.8×108)cfu。上述方法还包括在发酵前调节所述发酵前液的pH，所述发酵前液的pH为6～7。调节所述发酵前液的pH可利用盐酸进行。所述盐酸可为食品级盐酸。上述方法中，所述乳酸菌可为干酪乳酸菌或植物乳杆菌。所述发酵的时间可为50～70min。所述发酵的时间进一步可为60-70min。所述发酵的温度可为35～43℃。所述发酵的温度进一步可为37-40℃，如40℃。上述方法在步骤3)前还可包括：向步骤2)得到的沉淀中加入植酸酶进行酶解得到所述酸沉大豆分离蛋白。上述方法中，向步骤2)得到的沉淀中加入植酸酶进行酶解得到所述酸沉大豆分离蛋白可包括：向所述沉淀中加入所述植酸酶，得到酶解前物；将所述酶解前物在45～55℃下进行酶解，得到酶解产物；所述酶解产物即为所述酸沉大豆分离蛋白。所述酶解的温度进一步可为50℃。所述酶解时间可为50～60min。上述方法中，所述酶解前物中所述植酸酶和蛋白质的配比可为c1)或c2)或c3)：c1)(3-6)U:1g；c2)(4-6)U:1g；c3)(5-6)U:1g。所述植酸酶具体可为Sigma的货号为P-1259的产品。向步骤2)得到的沉淀中加入植酸酶进行酶解前还可包括将步骤2)得到的沉淀进行水洗。水洗时步骤2)得到的沉淀与水的体积比可为1:(2～3)。上述方法中，还可包括对得到的大豆分离蛋白进行杀菌、闪蒸和/或干燥。所述杀菌可为UHT杀菌。UHT杀菌的条件可为：温度120～140℃，时间10～15s。所述闪蒸的条件可为：负压0.07～0.08MPa，时间50～60min。所述干燥可为喷雾干燥。所述喷雾干燥的条件可为：压力25～40MPa，进风温度160～180℃，排风温度60～70℃。所述大豆分离蛋白的制备方法得到的大豆分离蛋白，也属于本专利技术的保护范围。本专利技术中，所用水均为可食用水。实验证明，本专利技术的大豆分离蛋白的制备方法得到的大豆分离蛋白可以降解7S亚基，而11S亚基被完整保留，且植酸与己醛含量明显下降，为低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白，本专利技术在降低大豆分离蛋白致敏性的同时不会带来不良风味，所制备大豆分离蛋白具有很好的市场前景。附图说明图1为己醛检测结果。A为标准品；B为普通大豆分离蛋白产品；C为目的低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白产品。图2为己醛含量检测结果。图3为植酸检测结果。普通碱溶酸沉法SPI为普通大豆分离蛋白产品；实施例法SPI为目的低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白产品。图4为植酸含量检测结果。图5为SDS-PAGE电泳检测结果。Lane1为普通大豆分离蛋白产品；Lane2为目的低致敏性低植酸去腥大豆分离蛋白产品。α’,α,β为7S蛋白的亚基；A和B为11S蛋白的亚基。图6为SDS-PAGE电泳检测结果。具体实施方式下面结合具体实施方式对本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.大豆分离蛋白的制备方法，包括：1)将大豆豆粕与水混合后，然后调节pH值，得到混合物料，所述混合物料的pH大于7；将所述混合物料离心，使蛋白质进入上清液中，收集上清液，该上清液即为蛋白提取液；2)调节所述蛋白提取液的pH值，得到酸沉前液，所述酸沉前液的pH小于7；将所述酸沉前液离心，使蛋白质进入沉淀中，收集沉淀，该沉淀即为酸沉大豆分离蛋白；3)向所述酸沉大豆分离蛋白中加水，然后调节pH值，得到酸沉大豆分离蛋白溶液，所述酸沉大豆分离蛋白溶液的pH为6.5～7.5；向所述酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶，得到中性蛋白酶酶解前液；孵育所述中性蛋白酶酶解前液进行酶解，得到中性蛋白酶酶解产物，所述中性蛋白酶酶解产物即为大豆分离蛋白。

【技术特征摘要】
1.大豆分离蛋白的制备方法，包括：1)将大豆豆粕与水混合后，然后调节pH值，得到混合物料，所述混合物料的pH大于7；将所述混合物料离心，使蛋白质进入上清液中，收集上清液，该上清液即为蛋白提取液；2)调节所述蛋白提取液的pH值，得到酸沉前液，所述酸沉前液的pH小于7；将所述酸沉前液离心，使蛋白质进入沉淀中，收集沉淀，该沉淀即为酸沉大豆分离蛋白；3)向所述酸沉大豆分离蛋白中加水，然后调节pH值，得到酸沉大豆分离蛋白溶液，所述酸沉大豆分离蛋白溶液的pH为6.5～7.5；向所述酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶，得到中性蛋白酶酶解前液；孵育所述中性蛋白酶酶解前液进行酶解，得到中性蛋白酶酶解产物，所述中性蛋白酶酶解产物即为大豆分离蛋白。2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述中性蛋白酶酶解前液中所述中性蛋白酶与所述酸沉大豆分离蛋白的配比为a1)或a2)：a1)(0.3-0.5)AU:100g；a2)0.4AU:100g；和/或，步骤3)中所述孵育的时间为8～10min；和/或，步骤3)在向所述酸沉大豆分离蛋白溶液中加入中性蛋白酶前还包括将所述酸沉大豆分离蛋白溶液进行加热。3.根据权利要求1或2所述的方法，其特征在于：所述方法在步骤2)前还包括：向所述上清液中加入乳酸菌进行发酵得到所述蛋白提取液。4.根据权利要求3所述的方法，其特征在于：将所述上清液...

【专利技术属性】
技术研发人员：郭顺堂，万洋灵，赵忠良，郭诗文，范玲慧，
申请(专利权)人：中国农业大学，
类型：发明
国别省市：北京,11