一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉制造技术

本发明专利技术提供了一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉，该复合牦牛骨胶原蛋白肽粉由牦牛骨胶原蛋白通过酶解法制得，在该酶解法中使用复合酶。还提供了该复合牦牛骨胶原蛋白肽粉的制备方法和用途。所述制备方法具有更有效的脱钙效果，并且制得的复合牦牛骨胶原蛋白肽具有良好的细胞修复效果。

A Composite Yak Bone Collagen Peptide Powder for Human Cell Repair

The invention provides a composite yak bone collagen peptide powder for repairing human cells. The composite yak bone collagen peptide powder is prepared by enzymatic hydrolysis of yak bone collagen protein, and the composite enzyme is used in the enzymatic hydrolysis. The preparation method and application of the composite yak bone collagen peptide powder are also provided. The preparation method has more effective decalcification effect, and the prepared composite yak bone collagen protein peptide has good cell repair effect.

【技术实现步骤摘要】
一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉
本专利技术属于食品深加工
，其涉及由牦牛骨制备胶原蛋白肽的方法以及由该方法制得的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉，更具体地，涉及一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉及其制备方法和用途。
技术介绍
牦牛是高寒地区的特有牛种，是我国和世界稀有珍贵的地方类半野生特有种群，它生长在高寒缺氧、枯草期和冰封期长达半年左右的严峻自然条件下，生长在无污染的蓝天、碧水和牧草茂盛的青藏高原，牧草中还生长着众多有益的中草药，牦牛自由地生长在海拔3500米以上绿色生态的安多大草原环境中，草场无重金属残留，纯正、自然。在这样的自然环境下生存的牦牛，不仅拥有发达的骨骼与肌腱运动系统，而且是真正无污染的绿色产品，是特别优质的胶原提取宝库。与一般牛骨相比，因牦牛鲜骨骨骼密度大，骨质优良，骨骼中蕴藏的胶原蛋白小肽量大，氨基酸含量高，是非常适合的小分子骨胶原肽的提取来源。牦牛骨胶原蛋白肽牦牛骨胶原蛋白肽，是从海拔3000米以上、天然牧养的牦牛骨中提取的优质活性骨胶原蛋白肽，是极易被人体吸收的小分子胶原蛋白肽。胶原蛋白多肽是胶原蛋白或明胶经蛋白酶水解的小分子蛋白质，分子量一般约为10Da-10kDa。从结构上讲，胶原多肽是胶原蛋白的三螺旋结构彻底打开，肽链被降解为短链肽的多肽混合物。胶原蛋白肽一般由数量很少的氨基酸组成，市场上出现的常为寡肽或小肽产品，因其分子量小，具有易吸收的功效。此外，胶原蛋白肽具有一些特殊的活性功能，例如：免疫调节、抗氧化、抑菌、抗高血压、抗衰老、预防与治疗骨关节炎和骨质疏松等作用。施用胶原蛋白肽化合物已被证明在吸收循环后能够在软骨积累，该机制有助于饱受关节疾病折磨的关节病患者，其可作为促进骨形成添加剂和骨健康基本补充剂。另外，由于伤口愈合过程中基质金属蛋白酶(MMPs)的蛋白降解活性与肉芽组织合成和沉积胶原蛋白的细胞活性之间的平衡是必要的，因此许多新的基于胶原蛋白的伤口护理产品旨在减少过度的蛋白酶水平并使伤口环境恢复平衡。此外，这些胶原蛋白肽产品有助于促进功能性细胞外基质蛋白来刺激愈合过程，研究显示大甲鲹和红牙鱼或的骨骼中提取的I型胶原蛋白在伤口愈合中的疗效进行了研究，证实施用这些胶原蛋白的膜制剂对Wistar大鼠切除型伤口的愈合起到了促进作用。CN105385737A公开了一种牦牛骨胶原寡肽的制备工艺，由以下步骤组成：将阴干的牦牛骨粉碎至50目，并用碱、酸处理牦牛骨，除去脂肪和其它杂质，提取获得高纯度的牦牛骨胶原蛋白提取液；然后用两步酶解法酶解胶原蛋白提取液，酶解结束后，采用离心机协同多级膜分离系统纯化酶解液，得到牦牛骨胶原寡肽溶液；然后喷雾干燥牦牛骨胶原寡肽溶液，得到纯度大于90％，分子量小于1000Da的牦牛骨胶原寡肽。CN107630061A公开了一种牦牛骨Ⅰ型胶原蛋白的制备方法，其包括以下步骤：步骤一：将冷冻牦牛骨原料经过优选和清理后通过硬质骨破碎机破碎制得牦牛骨破碎料；步骤二：将所述牦牛骨破碎料进行清洗去杂；步骤三：将经过清洗去杂的所述牦牛骨破碎料采用乙醚脱脂处理后，再使用EDTA或HCl的方法进行脱钙处理得到脱脂脱钙牦牛骨；步骤四：将脱脂脱钙牦牛骨使用乙酸进行溶解并加入胃蛋白酶进行酶解处理；步骤五：将酶解后所得上清液加入NaCl溶液进行盐析；步骤六：将盐析后产物进行离心得到沉淀物；步骤七：将沉淀物冻干得到牦牛骨Ⅰ型胶原蛋白成品。CN106148466A公开了一种牦牛胶原蛋白的制备方法，其包括以下步骤：(1)将牦牛组织粉碎；(2)将经步骤(1)的牦牛组织进行酶解，得到组织液；(3)从所述组织液中分离中胶原蛋白液；(4)将所述胶原蛋白液层析，得到胶原蛋白固体。CN105753972A公开了一种牦牛骨胶原多肽螯合钙与骨多肽联产的方法，其包括如下步骤：步骤一、从牦牛骨中提取出分子量2KDa-4KDa的胶原多肽和其他胶原多肽；步骤二、将步骤一中得到的分子量2KDa-4KDa的胶原多肽与Ca2+进行螯合以得到牦牛骨胶原多肽螯合钙，螯合中，温度为50-55℃，pH值为6.8-7.2，螯合时间为1.5-2小时；和步骤三、将步骤一中得到的其他胶原多肽浓缩得到骨多肽。CN103783254A公开了一种牦牛骨胶原蛋白肽的制备方法，工艺过程包括原料前处理，明胶提取，分离胶原蛋白提取液，复合酶解，灭酶灭菌，分离肽液，脱色脱腥，浓缩干燥。其复合酶解时所采用的复合酶是由蛋白酶、淀粉酶、果胶酶、纤维素酶、木聚糖酶组成。其优点是，明胶提取过程简单，利用混合液的流动，将油脂和明胶完全分离；酶解温度为48-52℃，时间为4-6小时。CN102229971A公开了一种用牦牛鲜骨制备胶原蛋白肽的方法，所述的方法包括下列步骤：1)酶解：将去髓牦牛鲜骨粗碎，加水分散，再加入相应量的酶和缓冲溶液，恒温搅拌酶解，用纱布过滤，得一次酶解液；2)二次酶解：在一次酶解液中加入另一种酶，恒温搅拌酶解，升温使酶失活，得二次酶解液；3)过滤：在二次酶解液中加絮凝剂，搅拌沉淀杂质，滤布过滤，得滤液；4)超滤：将滤液通过超滤膜除杂，滤液略微浓缩，得浓缩液；5)喷雾干燥：将浓缩液喷雾干燥，即得产品。CN105018554B公开了一种小分子牛骨胶原肽及其制备方法，所述制备方法依次包括以下步骤：粉碎、提取分离、酶解、复合过滤、浓缩和干燥；所述酶解过程为：在牛骨胶原蛋白提取液中加入骨胶原蛋白酶进行一次酶解；一次酶解后，用混合酸调节一次酶解液的pH值至6-7，然后加入脯氨酸蛋白酶进行二次酶解，二次酶解时间为2h-4h，脯氨酸蛋白酶的加入量为牛骨胶原蛋白质量的0.1％-0.3％。CN108208851A公开了一种五元复合小分子胶原蛋白肽粉，以重量百分比计，由以下组份制成：牛骨胶原蛋白肽10％-50％，鱼胶原蛋白肽10％-50％，核桃肽10％-30％，小麦肽5％-20％，玉米肽5％-20％，通过采用牛骨胶原蛋白肽、深海鳕鱼皮胶原蛋白肽、核桃肽、小麦肽、玉米肽五种胶原蛋白肽粉，制得五元复合小分子胶原蛋白肽粉。CN107648205A公开了一种促进伤口愈合的胶原肽敷料，其各成分的质量百分比如下所示：牛骨胶原低聚肽50-70％，改性几丁聚糖溶液0.5-5％，海参寡肽或天蚕素B5-20％或1-5％，人参寡肽1-5％，保湿剂0-20％，余量为溶剂。“牛骨营养品质评价与牦牛骨胶原蛋白肽功效研究”，贾伟，《甘肃农业大学》，2017，采集我国4个地域牦牛和7个主要地域牛种的肱骨、股骨、脊骨、肋骨四个部位为样本进行营养组分检测,使用主成分、聚类、判别分析方法对牛骨样本进行营养品质评价，以甘南牦牛骨为原料，研究了酸法制备牦牛骨胶原蛋白和酶解制得不同分子量牦牛骨胶原多肽的结构及组成，并以人成骨细胞为体外模型评价了牦牛骨胶原多肽的营养功效。“胶原蛋白肽含药血清促进成骨细胞增殖和分化”，刘俊丽等，《中国骨质疏松杂志》，2018(6)，阐明了牛骨CP化合物血清对成骨细胞增殖与分化的影响，通过制备牛骨CP化合物大鼠血清，牛骨CP化合物处理的实验组和未经处理的对照组大鼠血清浓度为3％、6％、10％,加到无血清的DMEM溶液中，用MTT法和流式细胞术分别检测牛骨CP血清对MC3T3-E1细胞增殖和细胞周期的影响。然而，在现有的牦牛骨胶原蛋白肽制备技术中，由牦本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉，其中该复合牦牛骨胶原蛋白肽粉由牦牛骨胶原蛋白通过酶解法制得，在该酶解法中使用复合酶。

【技术特征摘要】
1.一种修复人体细胞的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉，其中该复合牦牛骨胶原蛋白肽粉由牦牛骨胶原蛋白通过酶解法制得，在该酶解法中使用复合酶。2.根据权利要求1所述的复合牦牛骨胶原蛋白肽粉，其中该复合牦牛骨胶原蛋白肽粉中的胶原蛋白肽的分子量呈双峰分布，分别分布在700-1000Da范围内和320-400Da范围内。3.一种制备复合牦牛骨胶原蛋白肽粉的方法，该方法包括以下步骤：(1)将牦牛骨进行预处理；(2)将牦牛骨进行脱脂处理；(3)将牦牛骨进行脱矿物处理；(4)提取胶原蛋白；(5)纯化胶原蛋白；(6)将胶原蛋白进行酶解；和(7)将胶原蛋白多肽进行纯化。4.根权利要求3所述的方法，其中将牦牛骨进行预处理包括将新鲜的牦牛骨去除骨膜，剔除残留的残肉、脂肪、筋膜、骨髓和其它非骨骼组织，用生理盐水冲洗以洗去残留的杂质，然后锯切成5mm-15mm的小块。...

【专利技术属性】
技术研发人员：王书敏，
申请(专利权)人：王书敏，
类型：发明
国别省市：内蒙古,15