食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法技术

本发明专利技术公开了食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，所述的检测方法包括如下步骤：(1)制备混合标准储备液和混合标准工作液；(2)制备待测样品溶液；(3)高效液相色谱分析条件；(4)建立标准工作曲线；(5)结果分析。本方法建立了食品中8种直接染料和6种人工合成色素同时测定的高效液相色谱法。本发明专利技术适用于食品中直接染料和人工合成色素的高通量日常检测。

Simultaneous Separation and Detection of Direct Dyes and Synthetic Pigments in Food

The invention discloses a method for simultaneous separation and detection of direct dyes and synthetic pigments in food. The method comprises the following steps: (1) preparation of mixed standard reserve liquid and mixed standard working liquid; (2) preparation of sample solution to be tested; (3) analysis conditions of high performance liquid chromatography; (4) establishment of standard working curve; (5) analysis of results. A method for the simultaneous determination of 8 direct dyes and 6 synthetic pigments in food by high performance liquid chromatography was established. The invention is suitable for high throughput routine detection of direct dyes and synthetic pigments in food.

【技术实现步骤摘要】
食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法
本专利技术涉及食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法。
技术介绍
着色剂能赋予食品鲜艳的外表，起到美化视觉效果、增进食欲作用。人工合成色素和染料是其中的一大类，但此类着色剂长期或过量使用会对人体健康产生潜在的危害，有的着色剂被人体吸收后，有明显的致癌、致突变作用，长期食用此类产品甚至可以诱发癌症，而且超标、超范围使用现象屡见不鲜，屡禁不止，给人们的身体健康带来巨大隐患。直接染料类着色剂是工业合成染料中一大类活性较强的染料，具有上色方法简便，价格便宜，色谱齐全等特点，由于该类染料水溶性均很好，容易被不法分子用于食品如饮料、糖果产品中。而这些着色剂原本作为工业用途的化工产品，属于食品中的禁用物质。直接染料类着色剂包括了直接红28（刚果红），直接红23，直接黄12，直接蓝6，直接蓝1，直接黑38等。其中直接红28和直接黑38是欧盟Reach法规第十批高关注度物质中管控的致癌类着色剂，其他如直接蓝1，直接蓝6等据文献报道，也具有强烈的致癌性。随着人们生活水平的不断提高，对食品安全的要求也随之增加，因此有必要对其中染料以及色素的使用有着更加严格的监管。目前尚无食品中直接染料类着色剂的检测方法，也未有同时检测直接黄23、直接红28、直接红81、直接蓝6、直接蓝1、直接黑38、直接黄12、直接黄26等8种直接染料以及柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、诱惑红、亮蓝等6种合成色素的方法。为此，加快食品中直接染料类着色剂的检测技术开发，对于加强食品品质的监督和管理，维护消费者的健康和权益，满足日益增长的食品安全监管需要，意义尤为重大。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，用于填补了目前尚无食品中直接染料和人工合成色素含量高通量检测方法领域空白，使得该方法能够针食品中直接染料和人工合成色素含量进行高通量准确分析，同时前处理快速简便，易于操作。为实现上述目的，本专利技术采用如下技术方案：该方法是一种能够实现食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，其主要特点是，所述的直接染料为直接黄23、直接红28、直接红81、直接蓝6、直接蓝1、直接黑38、直接黄12、直接黄26，所述的人工合成色素为柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、诱惑红、亮蓝。所述的检测方法包括：本专利技术的食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，其包括如下步骤：（1）制备混合标准储备液和混合标准工作液，所述混合标准储备液为浓度从70mg/L到4108mg/L混标储备液，混合标准工作液为从0.035mg/L到41.1mg/L之间的系列混合标准工作溶液；（2）制备待测样品溶液：称取糖果、红酒、饮料样品1.0g(精确至0.0001g)于10mL容量瓶中，加入一定量50%甲醇溶解，用氨水调节PH为9-10，超声，冷却后定容至刻度线，摇匀，过0.20μmPTFE滤膜，供高效液相色谱上机分析。（3）所用仪器为高效液相色谱仪，检测器为光电二极管阵列检测器。色谱柱为反相C18柱，柱温为35±1℃，检测波长：柠檬黄，直接黄12，直接黄26选择400nm作为检测波长；日落黄，胭脂红，苋菜红，诱惑红，直接黄23，直接红28，直接红81选择508nm作为检测波长；亮蓝，直接蓝6，直接蓝1，直接黑38选择613nm作为检测波长。流动相：A：乙腈，B：0.02mol/L乙酸铵水溶液；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：0~20min，3%A~30%A；20~30min，30%A~38%A；30~35min，38%A~60%A；35~35.1min，60%A~3%A；35.1~40min，3%A。（4）标准曲线的绘制：将系列混合标准工作溶液注入高效液相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，以保留时间定性，根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线。（5）结果分析：取（2）中滤液注入高效液相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，测得滤液中各目标物的峰面积，以保留时间定性，根据（4）中制作的标准曲线定量，计算出待测样品中各直接染料和人工合成色素含量。与现有技术相比较，本专利技术具有以下突出优点：1.本专利技术填补了目前尚无食品中多达14种直接染料和人工合成色素含量高通量检测方法领域空白，考虑到直接染料类目标物多达8种，人工合成色素目标物多达6种，最大吸收波长不同，选择C18柱为固定相，以及选择不同组的吸收波长，通过创造性的研究得出适合本专利技术分离的色谱条件，使得各目标物能够完全分离，同时获得最佳峰型和灵敏度。2.本专利技术采用50%的甲醇对食品中目标物进行提取，避免了单一溶剂的适用性问题，同时选用分离度更优异的C18柱，使得14种目标物获得很好的分离度，使得各目标物的定量准确性和抗干扰能力得到明显改善。3.本专利技术可对多达14种直接染料目标物和人工合成色素目标物进行高通量分析，同时前处理操作简单高效，可以大大缩短检测周期，提高检测效率。4.本专利技术所使用的分析仪器为高效液相色谱仪配备光电二极管阵列检测器，相对于液质联用仪等造价高昂的仪器，更加易于方法普及和推广应用。同时又能克服分光光度计灵敏度较差，无法对多种直接染料分别定量分析的缺点。附图说明图1为本专利技术的食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法的混合标准溶液高效液相色谱分离图。图中：目标峰:1.柠檬黄;2.苋菜红;3.胭脂红;4.日落黄;5.诱惑红;6.直接蓝6;7.直接蓝1;8.亮蓝;9.直接红81;10.直接红23;11.直接红28;12.直接黄26;13.直接黄12;14.直接黑38。具体实施方式以下结合具体实施例肯说明书附图对本专利技术作进一步详细说明。本实施案例在以本专利技术技术为前提下进行实施，现给出详细实施方式和具体的操作过程，来说明本专利技术具有创造性，但本专利技术的保护范围不限于以下的实施例。实施例11试剂和材料除特别说明外，所有试剂均为分析纯，水为GB/T6682规定的二级水。1.1乙腈：色谱纯。1.2乙酸铵：优级纯。1.3直接染料标准品：直接黑38（98%）购自百灵威科技有限公司；直接蓝1（100%）购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司；直接蓝6（100%）购自德国Dr.Ehrenstorfer公司；直接红23（99%）购自上海一研生物科技有限公司；直接红28（98%）购自德国CNW科技公司；直接红81（98%）购自山东西亚化学工业有限公司；直接黄12（100%）购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司；直接黄26（100%）购自梯希爱（上海）化成工业发展有限公司；柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、诱惑红、亮蓝购自中国计量科学研究院。1.4混标储备液的配制：准确称取适量的各化合物标准品（精确到0.01mg），用50%甲醇溶解并定容至100mL，配制成浓度为70mg/L到4108mg/L的混合标准品储备液。冰箱中0℃~4℃温度下保存，可使用3个月。1.514种目标物混合标准工作溶液的配制：将混合标准储备液采用逐级稀释的方法，用50%甲醇稀释成0.035mg/L到41.1mg/L之间的系列标准工作溶液。冰箱中0℃~4℃温度下保存，可使用1个月。2仪器和设备2.1高效液相色谱仪：本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，其特征在于, 所述的直接染料为直接黄23、直接红28、直接红81、直接蓝6、直接蓝1、直接黑38、直接黄12、直接黄26，所述的人工合成色素为柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、诱惑红、亮蓝；所述的检测方法包括：（1）制备混合标准储备液和混合标准工作液，所述混合标准储备液为浓度从70mg/L到4108mg/L混标储备液，混合标准工作液为从0.035mg/L到41.1mg/L之间的系列混合标准工作溶液；（2）制备待测样品溶液：称取食品样品于10mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解，用氨水调节PH为碱性，超声，冷却后定容至刻度线，摇匀，过膜，供高效液相色谱上机分析;（3）所用仪器为高效液相色谱仪，检测器为光电二极管阵列检测器;色谱柱为反相C18柱，柱温为35±1 ℃，检测波长：柠檬黄，直接黄12，直接黄26选择400nm作为检测波长；日落黄，胭脂红，苋菜红，诱惑红，直接黄23，直接红28，直接红81选择508nm作为检测波长；亮蓝，直接蓝6，直接蓝1，直接黑38选择613nm作为检测波长;流动相：A：乙腈， B：0.02mol/L 乙酸铵水溶液；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：0~20min，3%A~30%A；20~30min，30%A~38%A；30~35min，38%A~60%A；35~35.1min，60%A~3%A；35.1~40min，3%A;（4）标准曲线的绘制：将12种直接染料的系列混合标准工作溶液注入高效液相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，以保留时间定性，根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线;（5）结果分析：取步骤（2）中滤液注入高效液相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，测得滤液中各目标物的峰面积，以保留时间定性，根据步骤（4）中制作的标准曲线定量，计算出待测样品中各直接染料的含量。...

【技术特征摘要】
1.食品中直接染料和人工合成色素同时分离检测方法，其特征在于,所述的直接染料为直接黄23、直接红28、直接红81、直接蓝6、直接蓝1、直接黑38、直接黄12、直接黄26，所述的人工合成色素为柠檬黄、日落黄、胭脂红、苋菜红、诱惑红、亮蓝；所述的检测方法包括：（1）制备混合标准储备液和混合标准工作液，所述混合标准储备液为浓度从70mg/L到4108mg/L混标储备液，混合标准工作液为从0.035mg/L到41.1mg/L之间的系列混合标准工作溶液；（2）制备待测样品溶液：称取食品样品于10mL容量瓶中，加入50%甲醇溶解，用氨水调节PH为碱性，超声，冷却后定容至刻度线，摇匀，过膜，供高效液相色谱上机分析;（3）所用仪器为高效液相色谱仪，检测器为光电二极管阵列检测器;色谱柱为反相C18柱，柱温为35±1℃，检测波长：柠檬黄，直接黄12，直接黄26选择400nm作为检测波长；日落黄，胭脂红，苋菜红，诱惑红，直接黄23，直接红28，直接红81选择508nm作为检测波长；亮蓝，直接蓝6，直接蓝1，直接黑38选择613nm作为检测波长;流动相：A：乙腈，B：0.02mol/L乙酸铵水溶液；流速：1.0mL/min；柱温：35℃；进样量：20μL；梯度洗脱程序：0~20min，3%A~30%A；20~30min，30%A~38%A；30~35min，38%A~60%A；35~35.1min，60%A~3%A；35.1~40min，3%A;（4）标准曲线的绘制：将12种直接染料的系列混合标准工作溶液注入高效液相色谱仪中，在步骤（3）的色谱条件下进行梯度洗脱和检测，以保留时间定性，根据各浓度所测峰面积的大小与其浓度的对应关系绘制标准曲线;（5）结果分...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘城，游飞明，戴明，胡朝阳，白洋，谢勇，
申请(专利权)人：福建省产品质量检验研究院，
类型：发明
国别省市：福建,35