一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法技术

本发明专利技术涉及药物提取技术领域，公开了一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法。本发明专利技术所述方法向甘草废渣中加入一号溶剂回流提取，过滤后，滤液中加入双氧水氧化，浓缩后，向所得富集物中加入硅胶吸附，干燥后获得芒柄花苷吸附硅胶，然后加入二号溶剂并搅拌，过滤，所得滤液浓缩干燥获得芒柄花苷粗品；粗品加三号溶剂加热回流至完全溶解，冷却析晶，获得纯品。本发明专利技术以四氢呋喃和其他适宜溶剂组成分离纯化芒柄花苷的溶剂体系，并在其中增加双氧水氧化环节，通过简单有效的溶剂提取工艺实现了较高纯度和收率的芒柄花苷制备过程，整个方法对设备及试剂要求低，所用试剂常见易得，设备简单，工艺容易实现标准化、自动化，可以实现产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法
本专利技术涉及药物提取
，具体涉及一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法。
技术介绍
甘草的有效成分为三萜类、黄酮类和多糖类。其中，芒柄花苷是甘草黄酮类的一种单体化合物，其结构式为：芒柄花苷作为甘草黄酮的一种，研究表明具有多种功效：(1)CN104107184A公开了芒柄花苷可明显对抗氯化钾诱导的大鼠动脉收缩环，具有血管扩张作用，可用于制备血管舒张药物。(2)CN106336438A公开了其衍生物琥珀酰芒柄花苷可用于心血管疾病药物方面，特别是制备抗心肌缺血药物。(3)张薇等研究发现芒柄花苷会抑制病原菌肠球菌和肠菌的生长，促进有益双歧杆菌和乳酸杆菌的生长。从甘草废渣中制备芒柄花苷的报道较少：(1)冷晶等以甘草饮片为原料，用95％乙醇回流提取，将浓缩液依次用石油醚、醋酸乙酯、正丁醇萃取。其中正丁醇部分进行硅胶柱色谱，用二氯甲烷-甲醇不同比例(100∶1→0∶1)进行梯度洗脱，经薄层色谱分析后，经多次中压硅胶柱色谱、ODS柱色谱以及高效液相制备色谱等手段进一步分离纯化得到芒柄花苷；(2)袁延强等使用70％乙醇回流提取，所得浸膏热水溶解，依次使用石油醚、乙酸乙酯萃取。其中乙酸乙酯萃取得浸膏先使用聚酰胺树脂处理，然后采用高速逆流色谱进一步分离，制备得到芒柄花苷。(3)张杰等以甘草为原料，使用70％甲醇回流提取，浓缩液温水溶解后依次使用石油醚-乙酸乙酯(1:1)、正丁醇萃取，其中正丁醇萃取物经硅胶柱层析，特定馏分经SephadexLH-20、制备液相和重结晶方法得到芒柄花苷。综上所述几种制备芒柄花苷的方法，为分离纯化芒柄花苷提供了很好的借鉴。但现存技术存在耗时长，对设备要求高，生产成本高，步骤繁琐，未对原材料进行充分有效利用，无法工业化生产等缺点。
技术实现思路
有鉴于此，本专利技术的目的在于提供一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，使得本专利技术能够以简便易行的工序从甘草废渣中获得高收率和高纯度的芒柄花苷。本专利技术的另外一个目的在于提供一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，使得芒柄花苷粗品仅需一次重结晶即能够达到大于92％的高纯度的成品。为了实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，包括：步骤1、向甘草废渣中加入一号溶剂回流提取，过滤后，滤液中加入双氧水氧化杂质，浓缩后得芒柄花苷富集物；步骤2、向所述富集物中加入硅胶吸附，干燥后获得芒柄花苷吸附硅胶，然后加入二号溶剂并搅拌，过滤，所得滤液浓缩干燥获得芒柄花苷粗品；步骤3、所述芒柄花苷粗品加三号溶剂加热回流至完全溶解，冷却析晶，获得芒柄花苷纯品；其中，一号溶剂为四氢呋喃或四氢呋喃和烷烃的混合溶剂；二号溶剂选自乙腈、氯代烃类溶剂中的一种或两种以上；三号溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇中的任意一种和水的混合溶剂。针对现有从甘草废渣中提取分离芒柄花苷工艺普遍较为繁琐复杂以及纯度和收率不高的问题，本专利技术以四氢呋喃为主要提取溶剂进行富集，同时使用双氧水氧化杂质，杂质被氧化后其结构性质发生改变，从而易于和产物分离，可达到氧化杂质并保留目标物芒柄花苷的目的；最后以恰当的溶剂组合进行粗结晶和重结晶，实现了通过简便工艺即可获得高收率和高纯度的芒柄花苷的目的。其中，作为优选，所述烷烃为戊烷、己烷、庚烷、壬烷中的一种或两种以上，在本专利技术的具体实施方式中可选择戊烷或庚烷；作为优选，所述四氢呋喃和烷烃的体积比为1:(1-5)，更优选为1：(2-4)；在本专利技术具体实施方式中，所述四氢呋喃和烷烃的体积比为1:2、1:3或1:4。作为优选，所述甘草废渣和一号溶剂的质量体积比为1g:(1-30)mL(即每1g甘草废渣加入一号溶剂1-30mL，所述比例可以等比例变换为任何形式)，更优选为1g：(10-20)mL；在本专利技术具体实施方式中，所述甘草废渣和一号溶剂的质量体积比为1:10、1:15或1:20。作为优选，步骤1所述回流提取时间为0.5-2.5h。作为优选，所述双氧水在步骤1所述滤液中的质量百分比浓度为0.1-0.5％，更优选为0.2-0.4％；在本专利技术具体实施方式中，所述双氧水在步骤1所述滤液中的浓度为0.1％、0.2％、0.3％、0.4％或0.5％。在本专利技术具体实施方式中，所述氧化杂质为在30-60℃中氧化3-6h；更具体地，所述氧化杂质为在30-45℃中氧化3-6h。作为优选，所述富集物和硅胶的质量比为1:(3-10)，更优选为1：(5-8)；在本专利技术具体实施方式中，所述富集物和硅胶的质量比为1:5、1:6或1:8。作为优选，所述氯代烃类溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷、氯仿、四氯化碳、1,2-二氯乙烷，氯丁烷和氯苯；在本专利技术具体实施方案中，二号溶剂可选择乙腈与所述氯代烃类溶剂中的任意一种组合使用，两者的体积比为乙腈：氯代烃类＝(1-10)：(1-10)，更优选地为(3-5):1；在本专利技术具体实施方式中，乙腈：氯代烃类＝3:1、4:1或5:1；更具体地，二号溶剂为乙腈和二氯甲烷混合、乙腈和三氯甲烷混合或乙腈和氯仿混合；作为优选，所述二号溶剂体积用量为芒柄花苷吸附硅胶的5-20倍，更优选为5-15倍；在本专利技术具体实施方式中，所述二号溶剂体积用量为芒柄花苷吸附硅胶的5倍、10倍或15倍。作为优选，所述三号溶剂体积用量为芒柄花苷粗品的1-10倍；在本专利技术具体实施方式中，所述三号溶剂体积用量为芒柄花苷粗品的5倍。作为优选，所述三号溶剂中甲醇、乙醇或异丙醇与水的体积百分比为1:99-99:1，更优选为20:80-30:70。作为优选，所述冷却析晶的时间为1-20h，更优选为10-20h；在本专利技术具体实施方式中，所述冷却析晶的时间为10h、15h或20h。在本专利技术对不同提取溶剂的对比试验中，结果表明只有在本专利技术的一号溶剂和双氧水氧化下才能同时实现较高的芒柄花苷富集物收率和纯度。与此同时，本专利技术通过对比试验意外发现，二号溶剂影响到使用三号溶剂重结晶的次数和纯度，在相关的试验中证明在本专利技术限定的二号溶剂和三号溶剂组合情形下，仅需一次重结晶就可以达到高于92％的纯度，而其他常规溶剂组合无法达到这种优异的效果。由以上技术方案可知，本专利技术以四氢呋喃和其他适宜溶剂组成分离纯化芒柄花苷的溶剂体系，并在其中增加双氧水氧化环节，通过简单有效的溶剂提取工艺实现了较高纯度和收率的芒柄花苷制备过程，整个方法对设备及试剂要求低，所用试剂常见易得，设备简单，工艺容易实现标准化、自动化，可以实现产业化生产。附图说明图1所示为芒柄花苷检测对照品图谱；图2所示为芒柄花苷检测样品图谱。具体实施方式本专利技术公开了一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，本领域技术人员可以借鉴本文内容，适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是，所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的，它们都被视为包括在本专利技术。本专利技术所述方法已经通过较佳实施例进行了描述，相关人员明显能在不脱离本
技术实现思路
、精神和范围内对本文所述的方法进行改动或适当变更与组合，来实现和应用本专利技术技术。在本专利技术中，所述甘草废渣为甘草酸粉制备单铵盐生产过程中的下脚料。在具体实施例的对比试验中，不同处理组除去应有的区别外，其他工艺条件保持一致。以下就本专利技术所提供的一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法做进一步说明。实施例1：本本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，其特征在于，包括：步骤1、向甘草废渣中加入一号溶剂回流提取，过滤后，滤液中加入双氧水氧化杂质，浓缩后得芒柄花苷富集物；步骤2、向所述富集物中加入硅胶吸附，干燥后获得芒柄花苷吸附硅胶，然后加入二号溶剂并搅拌，过滤，所得滤液浓缩干燥获得芒柄花苷粗品；步骤3、所述芒柄花苷粗品加三号溶剂加热回流至完全溶解，冷却析晶，获得芒柄花苷纯品；其中，一号溶剂为四氢呋喃或四氢呋喃和烷烃的混合溶剂；二号溶剂选自乙腈、氯代烃类溶剂中的一种或两种以上；三号溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇中的任意一种和水的混合溶剂。

【技术特征摘要】
1.一种从甘草废渣中分离纯化芒柄花苷的方法，其特征在于，包括：步骤1、向甘草废渣中加入一号溶剂回流提取，过滤后，滤液中加入双氧水氧化杂质，浓缩后得芒柄花苷富集物；步骤2、向所述富集物中加入硅胶吸附，干燥后获得芒柄花苷吸附硅胶，然后加入二号溶剂并搅拌，过滤，所得滤液浓缩干燥获得芒柄花苷粗品；步骤3、所述芒柄花苷粗品加三号溶剂加热回流至完全溶解，冷却析晶，获得芒柄花苷纯品；其中，一号溶剂为四氢呋喃或四氢呋喃和烷烃的混合溶剂；二号溶剂选自乙腈、氯代烃类溶剂中的一种或两种以上；三号溶剂为甲醇、乙醇和异丙醇中的任意一种和水的混合溶剂。2.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述烷烃为戊烷、己烷、庚烷、壬烷中的一种或两种以上。3.根据权利要求1所述方法，其特征在于，所述氯代烃类溶剂包括二氯甲烷、三氯甲烷、...

【专利技术属性】
技术研发人员：骆俊才，
申请(专利权)人：青海省青海湖药业有限公司，
类型：发明
国别省市：青海,63