一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，由以下重量百分比成分组成：BFA：0.5～3％；固体脂质：45～65％；液体脂质：15～35％；表面活性剂：15～35％。本发明专利技术所得脂质体纳米粒的平均粒径约为70～880nm，BFA包封率为60～95％，载药量0.5～2％，将载有BFA的固体脂质体纳米药物经口服或注射进入小鼠体内后，药物生物利用度约为对照的150～360％。在药理活性的剂量下经尾部静脉注射未发现死亡或神经毒害症状。

【技术实现步骤摘要】
一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒及其制备方法
本专利技术涉及药物制剂领域，具体涉及一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒及其制备方法。
技术介绍
布雷菲德菌素A(BrefeldinA，BFA)是真菌发酵产生的具有多重生物活性的大环内酯类抗生素。研究发现，BFA通过与高尔基体结合，阻碍蛋白质向高尔基体转运，从而表现出抗真菌、抗病毒、抗线虫和抗肿瘤等生物活性。作为化学治疗试剂，BFA对60种肿瘤细胞系的平均GI50为40nM(美国国家肿瘤研究院数据)，在肿瘤治疗中具有较大的发展潜力[薛峰,王亚军,郑裕国.新型抗肿瘤抗生素布雷菲德菌素A的研制进展.科技通报.2010,26(4):536-541]。BFA在水中的溶解度低，口服生物利用率差，在生物体内的血浆半衰期短以及在动物研究中可能产生神经毒性。这些性质制约了其在抗肿瘤治疗药剂上的应用。目前现有技术中，主要通过将BFA进行结构修饰来降低其毒副作用和增大其在水中的溶解度。如，中国专利CN106928213A公开了BFA的4,7-位双呋咱NO供体取代衍生物的制备方法，提供一种以该衍生物作为活性成分的治疗肿瘤及其它疾病或病症的药物组合物；CN104788668A公开一类聚乙二醇-布雷菲德菌素A酯类衍生物，并提供了新化合物在制备防治肝癌、肺癌、乳腺癌、肾癌、结肠癌和前列腺癌药物中的应用。其他衍生合成方法，如糖基化(CN103739644A)、硒酯衍生物(CN105294641A)和酯类衍生物(CN105153136A)等也已公开。以上中国专利公开的BFA衍生物虽然能提高药物的水溶性、降低毒性，但结构修饰的合成反应步骤繁多，条件苛刻，成本高，容易造成环境污染，且可能引入杂质致使质量难以控制。固体脂质体纳米载体(solidlipidnanoparticle,SLN)，是固体油脂在冷却或相分离过程中固化和结晶形成的固体微粒。作为一种新型的载体，纳米固体脂质载体可作为脂溶性药物的载体，实现毒性降低、被动靶向和提高生物利用度的目的。SLN具备生理相容性好、载药能力强、物理化学存储稳定、成本低、利于大规模生产等优点。此外，SLN可刺激肠上皮细胞产生乳糜微滴从而使SLN绕过肝脏首过效应而经肠道淋巴系统进入血液循环，进一步增加口服性药物的生物利用度。
技术实现思路
为解决现有技术中的BFA生物利用度低以及毒副反应高的技术问题，本专利技术提供了一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒及其制备方法。为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，由以下重量百分比成分组成：BFA：0.5～3％；固体脂质：45～65％；液体脂质：15～35％；表面活性剂：15～35％。优选地，所述固体脂质为大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酸、磷脂酰肌醇、硬脂酸棕榈酸甘油酯、三棕榈酰甘油酯、三肉豆蔻酰甘油酯、三硬脂酰甘油酯或三月桂酰甘油酯中的一种或几种。优选地，所述液体脂质为油酸、豆油、维生素E、角鲨烷或肉豆蔻酸异丙酯中的一种或几种。优选地，所述表面活性剂为吐温20、吐温80、司盘20、司盘80、泊洛沙姆188、聚乙烯醇或聚乳酸-羟基乙酸中的一种或两种以上的组合。本专利技术提供了一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒的制备方法，包括如下步骤：S1、按质量百分比称取：BFA：0.5～3％；固体脂质：45～65％；液体脂质：15～35％；表面活性剂：15～35％；S2、将称取的的BFA、固体脂质、液体脂质置于干净容器中，加热至70～90℃使之融化后，迅速倒入预热至70～90℃的质量浓度为2.5％的表面活性剂水溶液，，利用高速匀浆机以5000～20000转每分钟的转速剪切2～10分钟后，以50～500W的功率超声处理5～15min制成乳化液；S3、将所得的乳化液以体积比为1:10～1:250的比例逐滴加入至冷水中，边加边持续搅拌，采用磁力搅拌，转速为150～450rpm，分散完毕后即得载有BFA的固体脂质体纳米粒水悬液，冷冻干燥后即得固体脂质体纳米粒；所述载有BFA的固体脂质体纳米粒可用于制备为片剂、胶囊剂、口服液体剂、口服散剂或注射剂等剂型。本专利技术具有以下有益效果：所得脂质体纳米粒的平均粒径约为70～880nm，BFA包封率为60～95％，载药量0.5～2％，将载有BFA的固体脂质体纳米药物经口服或注射进入小鼠体内后，药物生物利用度约为对照的150～360％。在药理活性的剂量下经尾部静脉注射未发现死亡或神经毒害症状。附图说明图1为粒径分布图。图2为口服BFA-SLN或BFA水悬液后，小鼠血液的药时曲线；图3为静脉注射BFA-SLN或BFA水悬液后，小鼠血液的药时曲线。具体实施方式为了使本专利技术的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本专利技术进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本专利技术，并不用于限定本专利技术。实施例将5ml吐温80水溶液(1％，v/v)在70℃温度下水浴预热至70℃，备用；取2.1mgBFA，50mg三硬脂酰甘油酯、30mg泊洛沙姆188，33.6μL(30mg)油酸以及0.6mL丙酮于小烧杯中，将小烧杯置于70℃的恒温水浴锅中水浴至药品溶解后，将吐温80水溶液倒入有药品的小烧杯中，立刻使用可变高速匀浆机于10000rpm下剪切5分钟，之后将小烧杯放入超声波细胞粉碎机中，在50％最大功率下(300W)超声10分钟。通过恒流泵将上述乳液匀速分散到100ml冷水中，滴加完毕后，自发形成固体脂质体纳米粒子，继续搅拌60分钟挥发残留丙酮。运用激光粒度分析仪NONA-ZS(马尔文公司)测定上述所得的SLN的粒径，所得的粒径分布图如图1所示，从图1可以看出，粒径分布均一，平均粒径为247.9±17.4nm。通过高效液相色谱仪检测BFA的包封率为87.4％，载药量为1.22％。10只小鼠分为BFA-SLN组和BFA水悬液对照组，每组5只。小鼠实验前禁食12h，自由饮水，分别按照26mg/kg剂量(以SLN的载药量计)灌胃或尾端静脉注射。静脉给药2,5,15,30,45,60和75min后，以及灌胃给药后2,5,15,30,45,60和75h后，眼眶静脉丛取血0.1mL。血液样品置于含有50μL肝素的EP管中，充分混匀后4000rpm离心20min。取上清液进行BFA含量测定。结果显示，口服SLN可将生物利用度提高至对照的248％(图2)，而静脉注射可提高至176％(图3)。以上述剂量将BFA-SLN和BFA水悬液对照分别静脉注射10只大鼠，每8h一次，连续注射8天后观测大鼠死亡率以及神经毒性症状。结果发现，对照组中3只大鼠出现共济失调和呼吸困难，而BFA-SLN组未出现中毒症状，这可能与其被动靶向的性质有关。以上所述仅是本专利技术的优选实施方式，应当指出，对于本
的普通技术人员来说，在不脱离本专利技术原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，其特征在于：由以下重量百分比成分组成：BFA：0.5～3％；固体脂质：45～65％；液体脂质：15～35％；表面活性剂：15～35％。

【技术特征摘要】
1.一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，其特征在于：由以下重量百分比成分组成：BFA：0.5～3％；固体脂质：45～65％；液体脂质：15～35％；表面活性剂：15～35％。2.根据权利要求1所述的一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，其特征在于：所述固体脂质为大豆磷脂、卵磷脂、磷脂酸、磷脂酰肌醇、硬脂酸棕榈酸甘油酯、三棕榈酰甘油酯、三肉豆蔻酰甘油酯、三硬脂酰甘油酯或三月桂酰甘油酯中的一种或几种。3.根据权利要求1所述的一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，其特征在于：所述液体脂质为油酸、豆油、维生素E、角鲨烷或肉豆蔻酸异丙酯中的一种或几种。4.根据权利要求1所述的一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒，其特征在于：所述表面活性剂为吐温20、吐温80、司盘20、司盘80、泊洛沙姆188、聚乙烯醇或聚乳酸-羟基乙酸中的一种或两种以上的组合。5.一种包覆布雷菲德菌素A的固体脂质体纳米粒的制备方法，其特征在于：包括如下步骤：S1、按质量百分比称取...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪国鹏，韩娟，张际峰，童贯和，武以海，
申请(专利权)人：淮南师范学院，
类型：发明
国别省市：安徽,34