细胞收纳芯片和使用该细胞收纳芯片的筛选方法技术

本发明专利技术提供一种细胞收纳芯片，其能够以高精度且高效率识别并分取目标检体，另外，处理简单，能够在不对细胞造成损伤的情况下容易地进行回收。细胞收纳芯片(60)具有：基体(60a)；设置于该基体的上表面(60b)且可一对一地收纳多个细胞M的多个孔(61)、(61)、……，和形成于构成该多个孔的各内表面(61a)和基体(60a)的上表面(60b)的被覆层(62)。被覆层(62)的表面具有对细胞的低粘附性以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于孔(61)的细胞(M)产生的被产生物质或者收纳于孔(61)的细胞(M)释放的被释放物质的结合性。

Cell Reception Chip and Screening Method Using the Cell Reception Chip

The invention provides a cell receiving chip, which can identify and extract the target body with high accuracy and efficiency. In addition, the processing is simple and can be easily recovered without causing damage to cells. The cell acceptance chip (60) has a matrix (60a), an upper surface (60b) of the matrix, and a plurality of holes (61), (61),... And a coating (62) formed on the inner surface (61a) of each hole and the upper surface (60b) of the matrix (60a). The surface of the coating (62) has a low adhesion to cells and a binding property to specific binding materials. The specific binding materials have a binding property to the released substances produced by the cells (M) that are contained in the pore (61) or released by the cells (M) that are contained in the pore (61).

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】细胞收纳芯片和使用该细胞收纳芯片的筛选方法
本专利技术涉及筛选目标检体时收纳多个细胞的细胞收纳芯片以及使用该细胞收纳芯片的筛选方法，特别涉及用于对孔和细胞照射光，并基于结合在细胞收纳芯片上的物质发出的荧光来检测成为目标检体的细胞，从而选择性地抽吸并回收该细胞的细胞收纳芯片以及使用该细胞收纳芯片的筛选方法。
技术介绍
目前为止，筛选装置作为用于识别、分取细胞等微小检体的装置，已在医疗领域的研究和检测等中广泛地使用。而且，近年来，在研究和检测机构中，希望在实现不伴有检体破坏的识别、分取的同时，通过更准确地进行这些处理来提高研究和检测的效率。特别是在规定领域中，强烈要求从多个细胞中以一个细胞为单位识别和分取特定的细胞，因此，在这样的以一个细胞为单位进行识别和分取的处理中，也需要准确性的提高，并高效率化。在以非破坏方式进行的细胞的识别和分取处理中，为了能够明确地区别目标检体和非目标检体，希望将包含多个微细粒子的培养基保持在细胞收纳芯片上。因此，以往例如公开了如下方法：使用具有使抗免疫球蛋白(Ig)抗体与芯片上表面的一部分结合而成的被覆层的微孔阵列芯片，将抗体分泌细胞分注于该微孔阵列芯片的各孔，使由孔中所收纳的细胞的至少一部分分泌的抗体与上述被覆层的抗Ig抗体结合，通过用荧光标记抗原检测该分泌抗体来确定目标检体(专利文献1)。另外，为了从外部环境选择性地结合所期望的目标检体或者为了将非目标检体从表面统一除去，公开了功能性涂层，其通过向板状的支承体供给被固定在该支承体上的低非特异性结合性的基质、和在非特异性结合性基质内通过物理性相互缠结而共价键结合的活性成分而构成(专利文献2)。现有技术文献专利文献专利文献1：日本专利第4148367号说明书专利文献2：日本特表2004-531390号公报
技术实现思路
专利技术要解决的课题但是，对于专利文献1的技术而言，在芯片上表面的局部使抗Ig抗体结合后直至确定目标检体期间必须保持芯片上表面为湿润状态，所以，不能长久保持抗Ig抗体。另外，在细胞的抗体分泌中有时该细胞附着于孔的内表面，因此变得难以回收该细胞，即使能够回收，也很有可能对作为目标检体的细胞造成损伤。另外，专利文献2的构成是使目标检体选择性地结合于设置在板状支承体的上表面的功能性涂层，但不是在各孔内保持一个细胞的构成，不能说以细胞为单位识别和分取特定的细胞的精度、效率高。本专利技术的目的在于提供细胞收纳芯片以及使用上述细胞收纳芯片的筛选方法，其能够以高精度且高效率识别和分取目标检体，并且，处理简单，可在不对细胞产生损伤的情况下容易地回收。用于解决课题的手段为了实现上述目的，本专利技术的细胞收纳芯片是用于收纳多个细胞的细胞收纳芯片，其特征在于，具有由透光性材料构成的基体，和在所述基体的至少一个主表面可收纳细胞的多个孔，包含所述多个孔的所述细胞收纳芯片的表面具有低细胞粘附性以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。优选所述孔具有相当于收纳1个细胞的大小。优选所述细胞收纳芯片的表面还具有亲水性。在所述基体上可以具有被覆层，所述被覆层具有低细胞粘附性、以及对于特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。另外，在所述基体上可以具有被覆层，所述被覆层的表面具有亲水性、低细胞粘附性、以及对于特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。优选具有所述低细胞粘附性的所述被覆层为具有低细胞粘附性材料的被覆层。优选所述低细胞粘附性材料为低蛋白质吸附性材料。优选地，对于所述特异性结合材料具有结合性的所述被覆层为具有结合材料的被覆层，所述结合材料具有与所述特异性结合材料的结合性。优选具有所述亲水性的所述被覆层为具有亲水性材料的被覆层。优选所述细胞收纳芯片的表面的接触角为60°以下。优选所述结合材料为具有选自活性酯基、氨基、羧基、硫醇基、醛基、肼基、羟氨基和溴代乙酰基中的至少1个官能团的含官能团的材料。优选所述结合材料为选自抗生蛋白链菌素、抗生物素蛋白、生物素或它们的衍生物中的至少1种。优选所述低蛋白质吸附性材料为高分子化合物。优选所述细胞收纳芯片用于筛选装置，该筛选装置用于基于从细胞收纳芯片上的物质发出的光信息来检测规定的细胞，并选择性地获取检测到的细胞。为了达成上述目的，本专利技术的筛选方法，是基于从细胞收纳芯片上的物质发出的光信息来检测规定的细胞，并选择性地获取检测到的细胞的筛选方法，所述筛选方法的特征在于，具有如下工序：准备细胞收纳芯片的准备工序，其中，该细胞收纳芯片具有设置于由透光性材料构成的基体的多个孔，并且具有如下表面，该表面具有低细胞粘附性和对于特异性结合材料的结合性，该特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性；第1结合工序，其中，在所述细胞收纳芯片的表面结合所述特异性结合材料；细胞收纳工序，其中，将包含多个细胞的液体导入所述细胞收纳芯片，以细胞为单位将所述多个细胞收纳于所述多个孔；第2结合工序，其中，将所述特异性结合材料与来自收纳于所述孔的细胞的被产生物质和/或被释放物质结合；第3结合工序，其中，将具有光信息的光信息存储物质与所述被产生物质或所述被释放物质或者所述特异性结合材料结合；计测工序，其中，计测所述光信息存储物质的光信息；识别、回收工序，其中，基于所述计测工序的计测结果，从所述多个细胞中识别、回收作为目标检体的细胞。专利技术的效果根据本专利技术，包含多个孔的细胞收纳芯片的表面具有低细胞附着性，同时对特异性结合材料具有结合性，所述特异性结合材料具有与孔中所收纳的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。现有的芯片由于是预先使与被产生物质和/或被释放物质具有结合性的物质结合在芯片上的构成，因此，难以长期保存该芯片，并且精度有可能由于干燥等而降低。另一方面，根据本专利技术，通过细胞收纳芯片的表面具有与上述特异性结合材料结合的结合性，从而不必预先使与被产生物质和/或被释放物质具有结合性的特异性结合材料结合在细胞收纳芯片上，并且能够防止干燥等引起的精度降低。另外，由于细胞收纳芯片表面的与上述特异性结合材料结合的结合性，上述特异性结合材料与包含孔的细胞收纳芯片的表面结合，另外，由孔内的细胞所产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质与该特异性结合材料结合，因此，能够将该孔自身作为目标检体识别时的标记部位，并能够在不对细胞产生损伤的情况下识别目标检体。另外，通过细胞收纳芯片的表面具有低细胞附着性，能够防止孔内的细胞粘接于细胞收纳芯片表面，从而不需要使用阻断剂等进行涂布处理，并且能够以高效率回收作为目标检体的细胞，进而在细胞回收时能够在不对该细胞产生损伤的情况下进行回收。另外，根据本专利技术，准备细胞收纳芯片，该细胞收纳芯片具有如下表面，该表面具有低细胞粘附性和对特异性结合材料的结合性，该特异性结合材料具有与收纳于孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性；在细胞收纳芯片的表面结合特异性结合材料；将包含多个细胞的液体导入细胞收纳芯片，以细胞为单位本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种细胞收纳芯片，是用于收纳多个细胞的细胞收纳芯片，其特征在于，具有由透光性材料构成的基体，和在所述基体的至少一个主表面可收纳细胞的多个孔，包含所述多个孔的所述细胞收纳芯片的表面具有低细胞粘附性以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.03.31 JP 2016-0709691.一种细胞收纳芯片，是用于收纳多个细胞的细胞收纳芯片，其特征在于，具有由透光性材料构成的基体，和在所述基体的至少一个主表面可收纳细胞的多个孔，包含所述多个孔的所述细胞收纳芯片的表面具有低细胞粘附性以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。2.根据权利要求1所述的细胞收纳芯片，其特征在于，所述孔具有相当于收纳1个细胞的大小。3.根据权利要求1或2所述的细胞收纳芯片，其特征在于，所述细胞收纳芯片的表面还具有亲水性。4.根据权利要求1～3任一项所述的细胞收纳芯片，其特征在于，在所述基体上具有被覆层，所述被覆层具有低细胞粘附性、以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。5.根据权利要求3所述的细胞收纳芯片，其特征在于，在所述基体上具有被覆层，所述被覆层的表面具有亲水性、低细胞粘附性、以及对特异性结合材料的结合性，所述特异性结合材料具有与收纳于所述孔的细胞产生的被产生物质和/或该细胞释放的被释放物质的结合性。6.根据权利要求4或5所述的细胞收纳芯片，其特征在于，具有所述低细胞粘附性的所述被覆层为具有低细胞粘附性材料的被覆层。7.根据权利要求6所述的细胞收纳芯片，其特征在于，所述低细胞粘附性材料为低蛋白质吸附性材料。8.根据权利要求4或5所述的细胞收纳芯片，其特征在于，对所述特异性结合材料具有结合性的所述被覆层是具有结合材料的被覆层，所述结合材料具有与所述特异性结合材料的结合性。9.根据权利要求5所述的细胞收纳芯片，其特征在于，具有所述亲水性的所述被覆层为具有亲水性材料的被...

【专利技术属性】
技术研发人员：松永真理子，月井健，木村健一，高桥亨，徐杰，
申请(专利权)人：古河电气工业株式会社，
类型：发明
国别省市：日本,JP