一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法技术

本发明专利技术属于生物学分析领域，提供一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉中含有9.6‑12g的Tris碱、3.755‑7.51g的牛磺酸、0.186‑0.744g的Na2EDTA·2H2O。在室温下，每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L 1×浓度的电泳缓冲液，电泳缓冲液pH值在8.7‑9.2之间。采用本发明专利技术提供的预制试粉能够快速制备固定浓度、固定pH值的核酸电泳缓冲液。本发明专利技术制备的缓冲液具有较长的电泳寿命和较好的正负极稳定性；且制备的电泳缓冲液，有利于保护DNA和RNA在电泳过程中不被降解，维持稳定的双螺旋二级结构，增强核酸电泳后荧光检测的准确性和灵敏性。

Taurine based rapid preparation of prefabricated test powder for nucleic acid electrophoretic buffer and its usage

The present invention belongs to the field of biological analysis, and provides a preparation test powder of nucleic acid electrophoretic buffer based on taurine and its application method. The composition and weight of the test powder are as follows: based on the preparation of the electrophoretic buffer of 1 L double (1 x) concentration, each test powder contains 9.6_12 g Tris base and 3.755_7.51 G taurine. 0.186 Na2EDTA 0.744g 2H2O. At room temperature, each sample was fully mixed with 1L deionized water to form an electrophoretic buffer with a pH of 8.7_9.2. The prefabricated test powder provided by the invention can quickly prepare nucleic acid electrophoretic buffer with fixed concentration and fixed pH value. The buffer prepared by the invention has long electrophoretic life and good stability of positive and negative electrodes, and the electrophoretic buffer prepared by the invention is beneficial to protecting DNA and RNA from being degraded in the electrophoretic process, maintaining a stable double helix secondary structure, and enhancing the accuracy and sensitivity of fluorescence detection after nucleic acid electrophoresis.

【技术实现步骤摘要】
一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉及其使用方法
本专利技术属于生物学分析领域，提供一种生物化学或分子生物学分析中，用于核酸电泳缓冲液快速制备的预制试粉、制备方法及其使用方法。
技术介绍
电泳检测在核酸的生化和分子生物学分析中，具有重要地位，是核酸质量和浓度检测的常规方法之一，是分析DNA和RNA片段大小、质量浓度和纯度的重要依据。传统的核酸电泳主要使用醋酸盐缓冲体系TAE(Tris-Aceticacid-EDTA)或硼酸盐缓冲体系TBE(Tris-Boricacid-EDTA)，需实验室自主配制溶液。不仅配制过程耗时耗力，而且在组分溶解后，需要调节溶液pH值，才可使用，增加了缓冲液配制的时长和出错概率，同时TAE和TBE的电泳寿命短，在4-5小时的核酸电泳后，电泳槽正负极pH值产生显著变化，不利于DNA和RNA的结构稳定，需换用新的缓冲液进行电泳。急需专利技术一种电泳寿命长，且制备方法简便快速的核酸电泳缓冲液。
技术实现思路
针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉、制备方法及其使用方法。该试粉的主要成分包括Tris碱(三羟甲基氨基甲烷)、牛磺酸、Na2EDTA(乙二胺四乙酸二钠)，其优点是通过与一定体积的去离子水混合互溶，能够快速制备固定浓度、固定pH值的核酸电泳缓冲液。为了达到上述目的，本专利技术的技术方案如下：一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其组成成分及重量如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉中含有9.6-12g的Tris碱、3.755-7.51g的牛磺酸、0.186-0.744g的Na2EDTA·2H2O；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80-100mmol/L、牛磺酸30-60mmol/L、Na2EDTA0.5-2mmol/L，电泳缓冲液的pH值在8.7-9.2之间。试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。所述的Na2EDTA·2H2O可以被其它含不同结晶水的Na2EDTA所代替，但Na2EDTA的质量浓度保持不变。所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，预制试粉的各组成成分及重量优选为：每份预制试粉中含有10.8g的Tris碱、3.755g的牛磺酸、0.372g的Na2EDTA·2H2O；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱90mmol/L、牛磺酸30mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，电泳缓冲液的pH值在8.8-9.0之间。一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉的使用方法如下：在室温下，每一份的试粉与1L去离子水充分混合互溶，即得到1L1×浓度的电泳缓冲液。此过程无需称量试粉，无需调节缓冲液pH值，操作简单快捷。一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉的制备方法如下：所述的预制试粉可进行放大或缩小规模的制备，以1L1×浓度电泳缓冲液试粉中各组分质量份数为基准，根据目标缓冲液体积和浓度的乘积，计算得到基准中各组分质量的放大或缩小倍数，称量各组分且均匀混合后，以散粉或压片形式，储存或封装在塑料容器或袋中。举例如下：如配备1L10×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至10倍，如配备5L0.5×浓度电泳缓冲液试粉，则将基准中各组分质量放大至2.5倍。所述的预制试粉还可以整体制备，按照各组分的质量比例，称量且均匀混合各组分，储存于塑料容器或袋中。在配制电泳缓冲液时，根据待配缓冲液的浓度和体积的乘积，先计算所需预制试粉质量，再称量预制试粉，最后与待配缓冲液体积的去离子水充分混合，制得电泳缓冲液。与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：(1)本专利技术提供的预制试粉不同于传统的TAE和TBE体系，试粉使用了牛磺酸缓冲体系TTE(Tris-Taurine-EDTA)。经实验证明，TTE电泳缓冲液具有比TAE和TBE更好的正负极稳定性，更小的pH值和电导率波动性，以及更高的核酸电泳稳定性。(2)本专利技术的预制试粉使用方法简便快速，省去了常规电泳缓冲液制备的称量多项药品、调节溶液pH值的步骤，仅需取一至几份封装在塑料容器或袋中的预制试粉，与一定体积的去离子水混合，即可制得固定浓度和pH值(8.8-9.0)的TTE电泳缓冲液，使得缓冲液的制备过程可在5-10分钟内完成，减轻电泳缓冲液配制的人力，提高缓冲液制备的效率和准确性。(3)采用本专利技术试粉所制备的缓冲液，具有较长的电泳寿命和较好的正负极稳定性，在连续电泳10小时以上的电泳槽中，正负极的pH值变化不超过1％。本专利技术试粉所制备的电泳缓冲液，有利于保护DNA和RNA在电泳过程中不受降解，维持稳定的双螺旋二级结构，增强核酸电泳后荧光检测的准确性和灵敏性。具体实施方式以下结合具体实施例对本专利技术做进一步说明。实施例1基于配制1L1×浓度的核酸电泳缓冲液，制备预制试粉，每份试粉含有10.8g的Tris碱、3.755g的牛磺酸、0.372g的Na2EDTA·2H2O。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的电泳缓冲液(Tris碱90mmol/L、牛磺酸30mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，pH值8.96)，电泳10小时后，正极pH值8.79，负极pH值8.83，核酸样品稳定，紫外成像良好。实施例2基于配制1L1×浓度的电泳缓冲液，制备预制试粉，每份预制试粉含有10.8g的Tris碱、5.6325g的牛磺酸、0.372g的Na2EDTA·2H2O。取一份试粉与1L去离子水充分混合后，得到1×浓度的电泳缓冲液(Tris碱90mmol/L、牛磺酸45mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，pH值8.82)，电泳10小时后，正极pH值8.66，负极pH值8.72，核酸样品稳定，紫外成像良好。实施例3基于配制20L0.5×浓度的电泳缓冲液，制备预制试粉，每份预制试粉含有108g的Tris碱、37.55g的牛磺酸、3.72g的Na2EDTA·2H2O。取一份试粉与20L去离子水充分混合后，得到0.5×浓度的电泳缓冲液(Tris碱90mmol/L、牛磺酸30mmol/L、Na2EDTA1mmol/L，pH值8.94)，电泳10小时后，正极pH值8.78，负极pH值8.88，核酸样品稳定，紫外成像良好。上所述实施例仅表达了本专利技术的实施方式，但并不能因此而理解为对本专利技术专利的范围的限制，应当指出，对于本领域的技术人员来说，在不脱离本专利技术构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些均属于本专利技术的保护范围。本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量配比如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉中含有9.6‑12g的Tris碱、3.755‑7.51g的牛磺酸、0.186‑0.744g的Na2EDTA·2H2O；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80‑100mmol/L、牛磺酸30‑60mmol/L、Na2EDTA 0.5‑2mmol/L，电泳缓冲液的pH值在8.7‑9.2之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。

【技术特征摘要】
1.一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的预制试粉中各组成成分及重量配比如下：基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，每份预制试粉中含有9.6-12g的Tris碱、3.755-7.51g的牛磺酸、0.186-0.744g的Na2EDTA·2H2O；由此配制的电泳缓冲液中各组成成分的浓度为：Tris碱80-100mmol/L、牛磺酸30-60mmol/L、Na2EDTA0.5-2mmol/L，电泳缓冲液的pH值在8.7-9.2之间；试粉中所有物料均完全混合，以散粉或压片形式储存。2.根据权利要求1所述的一种基于牛磺酸的快速制备核酸电泳缓冲液的预制试粉，其特征在于，所述的基于配制1L一倍(1×)浓度的电泳缓冲液，预制试粉的各组成成分及重量...

【专利技术属性】
技术研发人员：徐卫平，刘玉婷，王文霞，许建强，杨骁婧，佟慧妍，穆罕默德·拉塞尔，
申请(专利权)人：大连理工大学，
类型：发明
国别省市：辽宁,21