【技术实现步骤摘要】
一种用于假肉监测的检测方法
本专利技术涉及食品检测领域，尤其涉及了一种用于假肉监测的检测方法。
技术介绍
中国畜禽肉品的消费市场庞大，六十年来我国年人均肉类消费量增长了近13倍。随着需求的不断增大，交易市场不规范、市场管理水平低下等为不法分子的不法行为提供了可乘之机，肉类尤其是牛肉、羊肉、驴肉等高价肉品掺假利润丰厚，掺假肉主要集中在注水、注胶肉；牛、羊肉中掺杂鸭肉或猪肉；牛、羊肉与狗肉等肉类食品中掺杂植物源型蛋白；再有，肉制品中掺杂狐狸肉、貉子肉等经济动物肉等形式。传统对肉品质的鉴别方法主要是依赖于感官判断和形态学检验。但感官判断和形态学检验的局限性较大，尤其不适用于肉类来源鉴别和加工产品的鉴别。目前对肉类成分的鉴别方法主要包括：基于蛋白的检测方法，如免疫学方法和液相色谱方法；以及基于核酸的方法，主要包括利用PCR技术对肉源性成分鉴别的方法。由于食品前处理过程易使得蛋白变性或降解，同时对肉类食品的原材料来自何种组织或器官无法了解，而许多蛋白在不同组织不同器官中的表达情况都存在不同，因此基于蛋白的肉类检测方法存在一定的局限性。基于核酸检测的荧光定量PCR技术由于其灵...
【技术保护点】
1.一种用于假肉监测的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，样品DNA提取50mg肉组织用液氮研磨成粉，加入1mL细胞裂解液；样品在55℃恒温过夜；溶解产物转移至离心管，加入1mL的Tris饱和酚和1mL的8‑羟基喹啉，混匀轻摇10min后进行第一次离心后取第一水相，用第一水相1/2体积的Tris饱和酚萃取后进行第二次离心后取第二水相，加入第二水相1/2体积的氯仿，混匀30s后进行第三次离心取第三水相；将第三水相转移至另一离心管，用均为第三水相1/20体积、浓度为3mol/L的醋酸钠和无水乙醇沉淀后进行第四次离心，弃上清，得到的沉淀物用70％的乙醇清洗，干燥后溶于10...
【技术特征摘要】
1.一种用于假肉监测的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：步骤一，样品DNA提取50mg肉组织用液氮研磨成粉，加入1mL细胞裂解液；样品在55℃恒温过夜；溶解产物转移至离心管，加入1mL的Tris饱和酚和1mL的8-羟基喹啉，混匀轻摇10min后进行第一次离心后取第一水相，用第一水相1/2体积的Tris饱和酚萃取后进行第二次离心后取第二水相，加入第二水相1/2体积的氯仿，混匀30s后进行第三次离心取第三水相；将第三水相转移至另一离心管，用均为第三水相1/20体积、浓度为3mol/L的醋酸钠和无水乙醇沉淀后进行第四次离心，弃上清，得到的沉淀物用70％的乙醇清洗，干燥后溶于100μLTE缓冲液中得到DNA提取物，该提取物即为DNA模板，用超微量核酸蛋白分析仪测定模板DNA的质量和浓度；细胞裂解液为Tris-HCl、乙二胺四乙酸、NaCl、蛋白酶K、十二烷基硫酸钠、核糖核酸酶组成的混合液，其中Tris-HCI的浓度为50mmol/L、pH为8.0，乙二胺四乙酸的浓度为10mmol/L、pH为8.0，NaCl的浓度为100mmol/L，蛋白酶K的浓度150μg/mL，十二烷基硫酸钠的质量分数为2％，核糖核酸酶的体积为10μL；TE缓冲液的组成为10mL、浓度为1mol/L、pH为8.0的Tris-HCl和2mL、浓度为500mmol/L、pH为8.0的乙二胺四乙酸混合，之后加水定容至1000mL，121℃高压灭菌20min；步骤二，根据牛、山羊、猪、鸡线粒体基因，应用CLUSTALW1.83软件和BLAST软件进行序列比较，用PrimerPremier5.0设计一条公用上游引物，再根据种属间的差...
【专利技术属性】
技术研发人员：周斌，王树明，
申请(专利权)人：杭州泰熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江,33
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