【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及分析，特别涉及一种用于lsd毒品的分析方法。
技术介绍
1、麦角酸二乙胺是一种合成药物，属于苯乙胺类兴奋剂的一种，它是麦角果中的主要成分之一，麦角酸二乙胺对中枢神经系统产生兴奋作用，使人产生幻觉、感官增强和情绪改变的效果，它通过口服和注射的方式进入人体，滥用麦角酸二乙胺会导致严重的健康问题，包括中毒、心脏病和精神疾病，对人体有着极大的伤害，但现今技术中，还没有研究给出能够快速检测出麦角酸二乙胺的方法，目前，针对毒品一类的检测多依赖于生物分析技术酶联免疫吸附测定法，这种方法需要复杂的设备和多步骤操作，耗时较长，此外，对样品的处理和预处理要求高，增加了操作的复杂性和时间消耗。因此，本专利技术提出一种用于lsd毒品的分析方法，用于解决检测麦角酸二乙胺毒品，耗时时间长，操作繁琐，不便捷的问题。
技术实现思路
1、本专利技术的目的在于提供一种用于lsd毒品的分析方法，通过使用雌兔并结合杂交瘤技术，进行麦角酸二乙胺抗体的获取，能够获取特异性强，靶向作用高的麦角酸二乙胺抗体，并对麦角酸二乙胺体外检测试剂盒进行优化，能够快速精准的检测出所检测样品中是否含有麦角酸二乙胺。
2、为了达成以上目的，本专利技术采取的技术方案为：
3、一种用于lsd毒品的分析方法，包括以下具体步骤：
4、步骤一，制备麦角酸二乙胺抗体；
5、步骤二，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金；
6、步骤三，制备麦角酸二乙胺体外检测试剂盒；
7、步骤四，麦角
8、进一步的，在步骤一中，麦角酸二乙胺抗体的制备前，先制备麦角酸二乙胺抗原，麦角酸二乙胺使用n,n'-二氨基二甲基乙酸酐，对麦角酸二乙胺进行羧酸化反应，使用碳二亚胺法和溴乙酰化肽法，将麦角酸二乙胺羧酸化的衍生物耦合连接到大分子蛋白质上，制备成麦角酸二乙胺抗原，其中，所用大分子蛋白质为键合佐剂。
9、作为本专利技术的进一步方案，在获得麦角酸二乙胺抗原后，使用雌兔进行免疫法制备麦角酸二乙胺抗体，其中，麦角酸二乙胺抗原从雌兔腹部进行注射，注射量为40-60ug/只，注射后，培养时间为6-10d，在培养注射过麦角酸二乙胺抗原的小兔至4d后，每隔2d的时间进行静脉注射麦角酸二乙胺抗原40-60ug/只，随后使用瘤细胞杂交融合的方法，进行麦角酸二乙胺抗体的获取。
10、进一步的，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，所用试剂为单宁酸钠和氯化金进行胶体金的初步制备，所制备的胶体金大小控制在50-60nm之间，其中，使用单宁酸钠和氯化金的浓度均为0.5-2％之间。
11、作为本专利技术的进一步方案，在制备胶体金的反应体系中，所加入的单宁酸钠控制在为1-3ml之间，并加入0.2-0.3％的过氧化氢，用于清除单宁酸反应产物中的残基。
12、进一步的，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，制备的胶体金与麦角酸二乙胺抗体的体积比为10:1，其中麦角酸二乙胺抗体的浓度为0.5-1mg/ml，反应体系中的ph值使用碳酸钾控制ph值在6-9之间，分子量为2000的p诱导剂作为保护剂，进行麦角酸二乙胺抗原胶体金连接物的制备。
13、进一步的，在步骤三中，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒，所组成部分为玻璃纤维素膜、金标垫、吸水纸和硝酸纤维素膜，其中，处理玻璃纤维素膜的缓冲液为磷酸缓冲液，吐温20作为玻璃纤维素膜的表面活性剂，金标为兔抗麦角酸二乙胺单抗体与胶体金的连接体，在硝酸纤维素膜包被的t线和c线中，t线包被的为麦角酸二乙胺抗原，c线包被的为兔lgg，c线和t线间隔3-5mm。
14、作为本专利技术的进一步方案，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒的检测结果具体表示为，所检测样品，经过体外试剂盒检测后，在硝酸纤维膜包被的c线显色，t线不显色表示为阳性，所检测样品中含有麦角酸二乙胺体，硝酸纤维膜包被的c线显色，t线显色，表示为阴性，所检测样品中不含有麦角酸二乙胺体。
15、进一步的，在步骤四中，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒的优化指标为，试剂盒中玻璃纤维处理溶液ph值的优化、玻璃纤维表面活性剂浓度的优化和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度，其中，玻璃纤维处理溶液ph值的取值范围为7-9，玻璃纤维表面活性剂的浓度范围为0.5-5％，麦角酸二乙胺抗原的浓度范围为1-3mg/ml，将玻璃纤维处理溶液ph值和玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度作为影响麦角酸二乙胺体外检测试剂盒质量的三方面自变量，将经过扫描仪扫描金标产生的信号强度作为因变量，先进行影响麦角酸二乙胺体外检测试剂盒质量的单一方面进行单因素分析，随后，将单一方面分析的结果进行汇总，使用正交与响应面分析相结合的方式进行多因素综合分析，玻璃纤维处理溶液ph值，玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度最适条件的优化，其中，将每个方面单因素分析中的偏差系数经多因素分析，转化为优化系数，所用优化公式为：
16、
17、其中，r为扫描仪扫描金标产生的信号强度，β1为玻璃纤维处理溶液ph值多因素分析的相关系数，β2为玻璃纤维表面活性剂浓度多因素分析的相关系数，β3为硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原浓度多因素分析的相关系数，a为玻璃纤维处理溶液ph值，b为玻璃纤维表面活性剂浓度，c为硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原浓度，α为综合单因素分析所得到的优化系数，i、n为自然数。
18、作为本专利技术的进一步方案，在步骤四中，综合单因素分析中的偏差系数，分别由玻璃纤维处理溶液ph值，玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度三个方面在进行单因素分析时，将每方面检测所得的信号强度值与最大值进行对比，随后将对比值进行偏正分析，综合分析对比偏正值得到优化系数，所用公式为：
19、
20、其中，α为综合单因素分析所得到的优化系数，zm为相应检测指标中信号强度的最大值，zp为相应检测指标中信号强度的平均值，zi为相应检测指标中的对应值，γ为偏正分析中的常数。
21、进一步的，在步骤四中，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒的优化中，玻璃纤维处理溶液ph值的最适值为7.5，玻璃纤维表面活性剂的浓度为0.5％，硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度为1.4mg/ml。
22、与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：通过使用雌兔并结合杂交瘤技术，进行麦角酸二乙胺抗体的获取，能够获取特异性强，靶向作用高的麦角酸二乙胺抗体，并对麦角酸二乙胺体外检测试剂盒进行优化，能够具有高效的灵敏度，快速精准的检测出所检测样品中是否含有麦角酸二乙胺。
23、该方法中未涉及部分均与现有技术相同或能够采用现有技术加以实现。
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1.一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒中，玻璃纤维处理溶液PH值的最适值为7.5，玻璃纤维表面活性剂的浓度为0.5％，硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗体的浓度为1.4mg/ml，包括以下具体步骤：
2.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤一中，麦角酸二乙胺抗体的制备前，先制备麦角酸二乙胺抗原，麦角酸二乙胺使用N,N'-二氨基二甲基乙酸酐，对麦角酸二乙胺进行羧酸化反应，使用碳二亚胺法和溴乙酰化肽法，将麦角酸二乙胺羧酸化的衍生物耦合连接到大分子蛋白质上，制备成麦角酸二乙胺抗原，其中，所用大分子蛋白质为键合佐剂。
3.根据权利要求2所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在获得麦角酸二乙胺抗原后，使用雌兔进行免疫法制备麦角酸二乙胺抗体，其中，麦角酸二乙胺抗原从雌兔腹部进行注射，注射量为40-60ug/只，注射后，培养时间为6-10d，在培养注射过麦角酸二乙胺抗原的小兔至4d后，每隔2d的时间进行静脉注射麦角酸二乙胺抗原40-60ug/只，随后使用瘤细胞杂交融合的方法，进行麦角酸二乙胺抗体的获取
4.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，所用试剂为单宁酸钠和氯化金进行胶体金的初步制备，所制备的胶体金大小控制在50-60nm之间，其中，使用单宁酸钠和氯化金的浓度均为0.5-2％之间。
5.根据权利要求4所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在制备胶体金的反应体系中，所加入的单宁酸钠控制在为1-3ml之间，并加入0.2-0.3％的过氧化氢，用于清除单宁酸反应产物中的残基。
6.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，制备的胶体金与麦角酸二乙胺抗原的体积比为10:1，其中麦角酸二乙胺抗原的浓度为0.5-1mg/ml，反应体系中的PH值使用碳酸钾控制PH值在6-9之间，分子量为2000的P诱导剂作为保护剂，进行麦角酸二乙胺抗原胶体金连接物的制备。
7.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤三中，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒，所组成部分为玻璃纤维素膜、金标垫、吸水纸和硝酸纤维素膜，其中，处理玻璃纤维素膜的缓冲液为磷酸缓冲液，吐温20作为玻璃纤维素膜的表面活性剂，金标为兔抗麦角酸二乙胺单抗原与胶体金的连接体，在硝酸纤维素膜包被的T线和C线中，T线包被的为麦角酸二乙胺抗体，C线包被的为兔lgG，C线和T线间隔3-5mm。
8.根据权利要求7所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在麦角酸二乙胺体外检测试剂盒的检测结果具体表示为，所检测样品，经过体外试剂盒检测后，在硝酸纤维膜包被的C线显色，T线不显色表示为阳性，所检测样品中含有麦角酸二乙胺体，硝酸纤维膜包被的C线显色，T线显色，表示为阴性，所检测样品中不含有麦角酸二乙胺体。
9.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤四中，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒的优化指标为，试剂盒中玻璃纤维处理溶液PH值的优化、玻璃纤维表面活性剂浓度的优化和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗原的浓度，其中，玻璃纤维处理溶液PH值的取值范围为7-9，玻璃纤维表面活性剂的浓度范围为0.5-5％，麦角酸二乙胺抗体的浓度范围为1-3mg/ml，将玻璃纤维处理溶液PH值和玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗体的浓度作为影响麦角酸二乙胺体外检测试剂盒质量的三方面自变量，将经过扫描仪扫描金标产生的信号强度作为因变量，先进行影响麦角酸二乙胺体外检测试剂盒质量的单一方面进行单因素分析，随后，将单一方面分析的结果进行汇总，使用正交与响应面分析相结合的方式进行多因素综合分析，玻璃纤维处理溶液PH值，玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗体的浓度最适条件的优化，其中，将每个方面单因素分析中的偏差系数经多因素分析，转化为优化系数，所用优化公式为：
10.根据权利要求9所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤四中，综合单因素分析中的偏差系数，分别由玻璃纤维处理溶液PH值，玻璃纤维表面活性剂的浓度和硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗体的浓度三个方面在进行单因素分析时，将每方面检测所得的信号强度值与最大值进行对比，随后将对比值进行偏正分析，综合分析对比偏正值得到优化系数，所用公式为：
...【技术特征摘要】
1.一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，麦角酸二乙胺体外检测试剂盒中，玻璃纤维处理溶液ph值的最适值为7.5，玻璃纤维表面活性剂的浓度为0.5％，硝酸纤维素膜中麦角酸二乙胺抗体的浓度为1.4mg/ml，包括以下具体步骤：
2.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤一中，麦角酸二乙胺抗体的制备前，先制备麦角酸二乙胺抗原，麦角酸二乙胺使用n,n'-二氨基二甲基乙酸酐，对麦角酸二乙胺进行羧酸化反应，使用碳二亚胺法和溴乙酰化肽法，将麦角酸二乙胺羧酸化的衍生物耦合连接到大分子蛋白质上，制备成麦角酸二乙胺抗原，其中，所用大分子蛋白质为键合佐剂。
3.根据权利要求2所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在获得麦角酸二乙胺抗原后，使用雌兔进行免疫法制备麦角酸二乙胺抗体，其中，麦角酸二乙胺抗原从雌兔腹部进行注射，注射量为40-60ug/只，注射后，培养时间为6-10d，在培养注射过麦角酸二乙胺抗原的小兔至4d后，每隔2d的时间进行静脉注射麦角酸二乙胺抗原40-60ug/只，随后使用瘤细胞杂交融合的方法，进行麦角酸二乙胺抗体的获取。
4.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，所用试剂为单宁酸钠和氯化金进行胶体金的初步制备，所制备的胶体金大小控制在50-60nm之间，其中，使用单宁酸钠和氯化金的浓度均为0.5-2％之间。
5.根据权利要求4所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在制备胶体金的反应体系中，所加入的单宁酸钠控制在为1-3ml之间，并加入0.2-0.3％的过氧化氢，用于清除单宁酸反应产物中的残基。
6.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步骤二中，制备麦角酸二乙胺抗原胶体金的过程中，制备的胶体金与麦角酸二乙胺抗原的体积比为10:1，其中麦角酸二乙胺抗原的浓度为0.5-1mg/ml，反应体系中的ph值使用碳酸钾控制ph值在6-9之间，分子量为2000的p诱导剂作为保护剂，进行麦角酸二乙胺抗原胶体金连接物的制备。
7.根据权利要求1所述的一种用于lsd毒品的分析方法，其特征在于，在步...
【专利技术属性】
技术研发人员：周斌，何鲁江，吴斌，穆爱洁，李宝庆，
申请(专利权)人：杭州泰熙生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：
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