【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】采用依次荧光淬灭和重新染色的生物样品的多表型分型本申请要求2016年8月12日提交的临时申请62/374,456,2016年8月11日提交的临时申请62/373,867,2016年3月3日提交的临时申请62/303,243和2016年1月7日提交的临时申请62/275,949的权益。专利
福尔马林固定的石蜡包埋组织、循环血细胞或任何安装的生物样品可用荧光标记物进行染色以进行特定的鉴定和分类。然而,在本专利技术之前,染色限于1-5种荧光标记物。例如,循环肿瘤细胞(CTC)是从原发性/转移性实体瘤中脱落并在循环系统中发现的癌细胞。多年来,整个外周血液已被用于从癌症患者中分离CTC以作为晚期疾病的预后指标。目前,唯一临床验证的预后测定法是基于抗体介导的捕获来分离CTC,并基于三种细胞荧光标记物来鉴定CTC。这种FDA认证的检测方法(CTCTest)使用缀合有针对上皮细胞粘附分子(EpCAM)的抗体的铁磁流体纳米颗粒,从血液中捕获CTC。然后使用荧光标记物DAPI(将核染色并将物体识别为细胞)、细胞角蛋白(CK)(将细胞鉴定为上皮细胞)和CD45(排除白细胞)来识别捕 ...
【技术保护点】
1.一种对生物样品的生物标记物重新染色的方法,所述方法包括:a.使用还原剂来淬灭荧光;b.去衍生化和胺剥离;以及c.使用一个或多个其他荧光标记物来对所述样品重新染色。
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2016.01.07 US 62/275,949;2016.03.03 US 62/303,243;1.一种对生物样品的生物标记物重新染色的方法,所述方法包括:a.使用还原剂来淬灭荧光;b.去衍生化和胺剥离;以及c.使用一个或多个其他荧光标记物来对所述样品重新染色。2.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物样品此前已被一种或多种荧光标记物染色。3.根据权利要求1所述的方法,其中所述生物样品此前未被荧光标记物染色并且已储存至少一周。4.根据权利要求2或3所述的方法,其进一步包括:a.将所述样品固定在表面上;以及b.可视化所述生物标记物。5.根据权利要求2或3所述的方法,其中所述还原剂是硼氢化物衍生物,其选自硼氢化钠、硼氢化锂、氰基硼氢化物、四正丁基硼氢化铵和苄基三乙基硼氢化铵。6.根据权利要求2或3所述的方法,其中所述硼氢化物是硼氢化钠。7.根据权利要求4所述的方法,其中所述生物标记物选自基本由细胞、病毒组分、细菌组分和疾病组分组成的组。8.根据权利要求7所述的方法,其中所述细胞选自组织、血液中的癌症相关细胞、CTC、EMT、CAML、CEC、血细胞、淋巴细胞、毛细胞、皮肤细胞和骨髓细胞。9.根据权利要求8所述的方法,其中所述癌症细胞是人癌症细胞。10.根据权利要求2或3所述的方法,其中所述生物样品选自血液、尿液、骨髓、淋巴组织、脑脊液、羊水、胆...
【专利技术属性】
技术研发人员:D·亚当斯,CM·唐,
申请(专利权)人:克里维提夫微技术公司,
类型:发明
国别省市:美国,US
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