华法林‑阿司匹林缀合物，其合成，抗血栓活性和应用制造技术

本发明专利技术公开了一种华法林‑阿司匹林缀合物,公开了它的制备方法,公开了它的抗动脉血栓活性，公开了它的抗静脉血栓活性，公开了它降低体内维生素K含量的活性，公开了它降低体内凝血因子Ⅱ含量的活性，公开了它抑制血小板聚集的活性，公开了它没有华法林样出血风险的优势。因而本发明专利技术公开了它在制备抗动脉血栓药物中的应用、在制备抗静脉血栓药物中的应用、在制备抑制血小板聚集药物中的应用、在制备维生素K拮抗剂中的应用和在制备凝血因子II拮抗剂中的应用。

Hua Falin aspirin conjugates, its synthesis, antithrombotic activity and Application

The invention discloses a warfarin aspirin conjugates, discloses the preparation method and discloses its antithrombotic activity, discloses its anti thrombosis activity, discloses it reduced levels of vitamin K activity, discloses it reduce in vivo coagulation factor II in the activity, it inhibits platelet aggregation activity is disclosed, discloses it does not like warfarin bleeding risk advantage. The invention discloses the preparation of anti artery thrombosis in drug application, in the preparation of anti drug application, venous thrombosis in preparing medicine inhibiting platelet aggregation, the application in the preparation of vitamin K antagonists and the application in the preparation of coagulation factor II antagonist application.

【技术实现步骤摘要】
华法林-阿司匹林缀合物，其合成，抗血栓活性和应用
本专利技术涉及一种新型华法林-阿司匹林,涉及它的制备方法,涉及它的抗动脉血栓活性，涉及它的抗静脉血栓活性，涉及它降低体内维生素K的含量的作用，涉及它降低体内凝血因子Ⅱ的含量的作用，涉及它抑制血小板聚集的作用，涉及它没有降低华法林样出血风险的优势。因而本专利技术涉及它在制备抗动脉血栓药物中的应用、在制备抗静脉血栓药物中的应用、在制备抑制血小板聚集药物中的应用、在制备维生素K拮抗剂中的应用和在制备凝血因子II拮抗剂中的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
动脉血栓和静脉血栓两种病症已成为当下发病率高和死亡率高的疾病。其中静脉血栓症，包括深静脉血栓和肺栓塞的患者数超过了心肌梗塞和中风发病的总人数，而且比乳腺癌和艾滋病所引起死亡的总人数高。由于动脉血栓和静脉血栓两种病症的发病率随年龄增长呈指数态增加，所以两种病症对我国这样的老龄化国家的人民健康的威胁尤其严重。如果把人口基数考虑进去，两种病症对我国国计民生的绝对负面影响尤其严重。于是，动脉血栓和静脉血栓两种病症的预防及治疗一直是医药领域的关注重点。虽然华法林1941年就用于临床，但是它的安全窗口窄。剂量低会导致肺栓塞，剂量高会导致致命性出血。过去的50多年对华法林进行了大量结构改造，却都没有能够得到抗静脉血栓活性强和出血副作用低的类似物。与传统的思维不同，专利技术人修饰华法林结构的目标是，将华法林转化为具有抗动脉血栓和抗静脉血栓双重活性的类似物。不过，也一直未能如愿。阿司匹林是具有100多年历史的解热镇痛药。由于能够抑制血小板环氧化酶而抑制血小板聚集，过去的30多年间被广泛应用于抗动脉血栓症。后来慢慢出现的阿司匹林耐药现象，吸引了很多实验室对阿司匹林进行结构修饰，却都没有能够得到抗动脉血栓活性更强的类似物。与传统的思维不同，专利技术人修饰阿司匹林结构的目标是，将阿司匹林转化为具有抗动脉血栓和抗静脉血栓双重活性的类似物。不过，也一直未能如愿。之后，又经过5年探索，专利技术人发现华法林与阿司匹林直接共价键合，生成华法林-阿司匹林缀合物在体外抗血小板聚集模型上显示优秀的抗血小板聚集活性。显然，华法林-阿司匹林缀合物既不是华法林的前药，也不是阿司匹林的前药。华法林-阿司匹林缀合物的抗动脉血栓活性比阿司匹林强167倍，抗静脉血栓活性比华法林强487倍，而且没有华法林样出血副作用。可见，本专利技术具有显著的技术进步。于是，专利技术人提出本专利技术。
技术实现思路
本专利技术的第一个内容是提供下面结构的华法林-阿司匹林缀合物。本专利技术的第二个内容是提供华法林-阿司匹林缀合物的合成方法，该方法包括在二环己基碳二亚胺(DCC),和4-二甲氨基吡啶(DMAP)的催化下按标准方法制备。本专利技术的第三个内容是评价华法林-阿司匹林缀合物抗动脉血栓的作用。本专利技术的第四个内容是评价华法林-阿司匹林缀合物抗静脉血栓的作用。本专利技术的第五个内容是评价华法林-阿司匹林缀合物抑制由血小板活化因子(PAF)、凝血酶(TH)及二磷酸腺苷(ADP)诱导的血小板聚集的作用。本专利技术的第六个内容是评价华法林-阿司匹林缀合物降低体内维生素K含量的作用。本专利技术的第七个内容是评价华法林-阿司匹林缀合物降低体内凝血因子Ⅱ含量的作用。本专利技术的第八个内容是记录连续给药5天后的生存率，出血时间和凝血酶原时间，评价华法林-阿司匹林缀合物降低华法林出血风险的作用。附图说明图1.华法林-阿司匹林的合成路线：催化剂为DCC和DMAP,溶剂为四氢呋喃。图2.华法林-阿司匹林的抗动脉血栓活性,n＝10。图3.华法林-阿司匹林的抗静脉血栓活性,n＝10。图4.华法林-阿司匹林对PAF、TH及ADP诱导的血小板聚集的抑制作用,n＝3。图5.华法林-阿司匹林对大鼠体内维生素K含量的影响,n＝5。图6.华法林-阿司匹林对大鼠体内FⅡ含量的影响,n＝5。图7.华法林-阿司匹林连续给药5天大鼠的生存率,n＝7。图8.华法林-阿司匹林连续给药5天抗静脉血栓的活性,n＝5。图9.华法林-阿司匹林连续给药5天对大鼠出血时间的影响,n＝5。图10.华法林-阿司匹林连续给药5天对大鼠凝血酶原时间的影响,n＝5。具体实施方式为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。实施例1制备华法林-阿司匹林冰浴下0.51g(2.7mmol)阿司匹林溶于10mL无水四氢呋喃中，加入0.02g(0.11mmol)DMAP，混合均匀，得到反应液1。将0.98g(2.7mmol)华法林用10mL无水四氢呋喃中溶解，加入反应液1中搅拌5min，得到反应液2。冰浴下将0.73g(3.4mmol)DCC用10mL无水四氢呋喃中溶解并滴加到反应液2中，搅拌2小时反应结束。搅拌中有二环己基脲(DCU)析出。反应结束后滤除去DCU。滤液减压浓缩除去四氢呋喃，残留物用二氯甲烷溶解，滤除DCU，滤液减压浓缩，层析法纯化，得0.91g(70％)华法林-阿司匹林，为无色固体。Mp：69-70℃。ESI-MS(m/e):493[M+Na]+；IR(cm-1):3295,3062,2930,1573,1533,1491,1451,1380,1327,1276,1188,1123,1065,1015,912,874,822,715,698；1H-NMR(300MHz,DMSO-d6):δ/ppm＝8.26(d,J＝6.9Hz,1H),7.90(td,J1＝1.2Hz,J2＝7.2Hz,1H),7.64(m,2H),7.49～7.35(m,4H),7.28～7.164(m,5H),4.73(t,J＝7.2Hz,1H),3.49(m,1H),3.24(m,1H),2.18(s,3H),2.12(s,3H)。实施例2评价华法林-阿司匹林的抗动脉血栓作用实验材料乌拉坦(国药集团化学试剂有限公司)、肝素钠(百灵威科技有限公司)、生理盐水(石家庄四药有限公司)。实验动物SD品系大鼠，雄性，200±20g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。旁路插管旁路插管由三段组成，将内径1.0mm，外径2.0mm的聚乙烯管加热拉成一端为斜口的细管，长10.0cm，分别为右颈静脉和左颈动脉插管，位于旁路插管的两端；中段由内径3.5mm的聚乙烯管构成，长8.0cm；表面毛糙的丝线长6.0cm，重4.0±0.1mg。三段聚乙烯管内壁均用1％硅醚溶液(1％硅油的乙醚溶液)硅烷化，完全晾干后，将丝线于颈动脉插管方向置于中段聚乙烯管中，利用封口膜将三段聚乙烯管组装并固定，插管前需在管中充满肝素。大鼠分组及给药剂量本专利技术的化合物华法林-阿司匹林剂量为0.1μmol/kg，阳性对照阿司匹林剂量为16.7和167μmol/kg，阴性对照为生理盐水。试剂配制麻醉剂为生理盐水配制的20％的乌拉坦溶液，抗凝剂为生理盐水配制的42mg/100mL的肝素钠溶液。实验操作以0.3mL/100g体重的剂量分别对大鼠进行灌胃给药，给药30min后腹腔注射20％的乌拉坦溶液进行麻醉(0.7mL/100g)。仰卧位将大鼠固定于板上，剪开颈部皮肤，分离右颈总动脉及左颈外静脉，分别将右颈总动脉和左颈外静脉的远心端用手术线进行结扎，于暴露的左颈外静脉剪一V字型小口本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种华法林‑阿司匹林缀合物，结构式如下：

【技术特征摘要】
1.一种华法林-阿司匹林缀合物，结构式如下：2.制备权利要求1华法林-阿司匹林缀合物的方法，该方法包括以下步骤：(1)冰浴下0.51g阿司匹林溶于10mL无水四氢呋喃中，加入0.02gDMAP，混合均匀得到反应液1；(2)将0.98g华法林用10mL无水四氢呋喃中溶解，加入反应液1中搅拌5min，得到反应液2；(3)冰浴下将0.73gDCC用10mL无水四氢呋喃中溶解并滴加到反应液2中，搅拌2小时反应结束，搅拌中有二环己基脲析出，反应结束后滤除去二环己基脲，滤...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，吴建辉，王玉记，张薪，
申请(专利权)人：首都医科大学，
类型：发明
国别省市：北京,11