一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法技术

本发明专利技术公开了一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，属于生物医疗制品领域，解决现有技术中透明质酸制造凝胶的工艺不能到达理想效果的技术问题，本发明专利技术提供的多相混合衔接交联透明质酸制备方法，在低温碱性条件让透明质酸原料和交联剂进行浸润缓慢交联反应，而后在高温碱性条件下活化持续交联反应，然后再进过中和酸碱反应，酸性条件下持续交联反应，这样一步步衔接性交联反应，能使透明质酸分子间及分子内链接更充分，交联反应更彻底，交联剂残留更低，交联凝胶分子间三维空间更大，凝胶弹性更结实，皮下修复效果更好、保存时间更长。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法。
技术介绍
透明质酸制造凝胶的过程中，一种现有技术是：透明质酸交联在热碱性条件进行，以致交联剂残留比较多，交联反应不均一，交联反应不完全，以致透明质酸凝胶易发黄、变脆，俗称老化反应，，凝胶颗粒易脆弹性比较差。另一种现有技术是：低温二次交联透明质酸技术，能让透明质酸和交联剂混合更均匀，但是对凝胶中交联剂残留去除不是很彻底，不能到达理想效果，导致局部皮肤红肿，皮下注射交联不彻底凝胶颗粒的话，达不到修复皮下的效果。
技术实现思路
本专利技术解决的技术问题是提供一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，提高透明质酸的加工品质。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案：一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，包括以下步骤：1)将碱性溶液和交联剂混合成混合溶液，交联剂为1，4-丁二醇二缩水甘油醚，透明质酸原料加入混合溶液中，搅拌溶解后，进行低温交联反应形成透明质酸凝胶，低温交联反应的温度为2℃～15℃，反应时间为12h～36h；2)对透明质酸凝胶进行热碱活化交联反应，温度控制在20℃-65℃，反应时间为1.5h-6.5h；3)透明质酸凝胶加入浓度为0.1％-4.0％的酸性溶液进行酸碱中和反应，在酸性条件下持续交联反应，持续交联反应的温度为15℃～37℃，时间为12h～48h，然后再剪切得到的凝胶体；4)凝胶体采用PBS透析液进行透析处理得到凝胶块；5)采用不锈钢挤压装置，在0.05MPa～0.5MPa的正压力条件下，使凝胶块通过孔径为50um-3000um的滤网，将凝胶块挤碎成粘弹性的微粒凝胶；6)透明质酸原料溶解于浓度为0.1％～3.5％碱性溶液制备成透明质酸碱性调节液，然后透明质酸碱性调节液中加入微粒凝胶，微粒凝胶与透明质酸碱性调节液的质量比为1∶2～1∶20，并通过机械力装置进行混合，混合时间为15min～60min；7)在温度20℃～65℃的条件下进行碱性活化交联反应，且凝胶颗粒在电离强度和渗透压差作用下，经过24h～96h形成衔接交联透明质酸凝胶颗粒。进一步的，1)步骤中，透明质酸原料的分子量为500～3000kDa，碱性溶液的Ph＞10，碱性溶液的浓度为0.1％-3.5％，交联剂与透明质酸原料重量比例1∶9-1∶30。进一步的，4)步骤中，采用缓冲液透析1次-6次，缓冲液的PH6.5-7.5，渗透压控制在270mOsm/L-330mOsm/L，加入PBS透析液的用量是透明质酸凝胶的10倍-150倍，透析时间为4.5h-48h。进一步的，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液。进一步的，所述机械力装置为离心器、乳化器或高速剪切器。进一步的，步骤7)中形成衔接交联透明质酸凝胶颗粒的判断条件为：衔接交联透明质酸凝胶颗粒中间气泡排空，没有固液流体、多相不会自然分层，具有稳定的等渗渗透压。本专利技术的有益效果：本专利技术的多相混合衔接交联透明质酸制备方法，在低温碱性条件让透明质酸原料和交联剂进行浸润缓慢交联反应，而后在高温碱性条件下活化持续交联反应，然后再进过中和酸碱反应，酸性条件下持续交联反应，这样一步步衔接性交联反应，能使透明质酸分子间及分子内链接更充分，交联反应更彻底，交联剂残留更低，交联凝胶分子间三维空间更大，凝胶弹性更结实，皮下修复效果更好、保存时间更长。本专利技术的这些特点和优点将会在下面的具体实施方式中详细的揭露。【具体实施方式】本专利技术提供的一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，包括以下步骤：1)将碱性溶液和交联剂混合成混合溶液，交联剂为1，4-丁二醇二缩水甘油醚，透明质酸原料加入混合溶液中，搅拌溶解后，进行低温交联反应，形成透明质酸凝胶，低温交联反应温度为2℃～15℃，反应时间为12h～36h；其中，透明质酸原料的分子量为500～3000kDa，碱性溶液的Ph＞10，碱性溶液的浓度为0.1％-3.5％，交联剂与透明质酸原料重量比例1∶9-1∶30。2)对透明质酸凝胶进行热碱活化交联反应，温度控制在20℃-65℃，反应时间为1.5h-6.5h。3)透明质酸凝胶加入浓度为0.1％-4.0％的酸性溶液中进行酸碱中和反应，在酸性条件下持续交联反应，持续交联反应的温度为15℃～37℃，时间为12h～48h，然后再剪切得到的凝胶体，凝胶体的尺寸为1cm3左右。4)凝胶体采用PBS透析液进行透析处理得到凝胶块；该步骤中，采用缓冲液透析1次-6次，缓冲液的PH6.5-7.5，渗透压控制在270mOsm/L-330mOsm/L，加入PBS透析液的用量是透明质酸凝胶的10倍-150倍，透析时间为4.5h-48h。缓冲液优选采用磷酸盐缓冲液。5)采用不锈钢挤压装置，在0.05MPa～0.5MPa的正压力条件下，使凝胶块通过孔径为50um-3000um的滤网，将凝胶块挤碎成粘弹性的微粒凝胶；6)透明质酸原料溶解于浓度为0.1％～3.5％碱性溶液搅拌均匀后制备成透明质酸碱性调节液，然后透明质酸碱性调节液中加入微粒凝胶，微粒凝胶与透明质酸碱性调节液的质量比为1∶2～1∶20，并通过机械力装置进行混合，时间为15～60min；采用的机械力装置为离心器、乳化器或高速剪切器。7)在温度20℃～65℃的下，进一步进行碱性活化交联反应，凝胶颗粒在电离强度和渗透压差作用下，经过24h～96h形成衔接交联透明质酸凝胶颗粒。形成衔接交联透明质酸凝胶颗粒的判断条件为：衔接交联透明质酸凝胶颗粒中间气泡排空，没有固液流体、多相不会自然分层，具有稳定的等渗渗透压。本专利技术在低温碱性条件让透明质酸原料和交联剂进行浸润缓慢交联反应，而后在高温碱性条件下活化持续交联反应，然后再进过中和酸碱反应，酸性条件下持续交联反应，这样一步步衔接性交联反应，能使透明质酸分子间及分子内链接更充分，交联反应更彻底，交联剂残留更低，交联凝胶分子间三维空间更大，凝胶颗粒弹性更结实，皮下修复效果更好、保存时间更长。交联透明质酸凝胶制成微粒凝胶后，又通过在碱性透明质酸液调节下由机械装置混合，在高温碱性条件下，再进一步活化交联反应，局部衔接交联透明质酸颗粒，且在电离强度和渗透压差等不同方式作用下，使透明质酸分子间及分子内链接更充分，交联凝胶分子间三维空间更大，凝胶颗粒弹性更结实，以达到形成透明质酸大分子间H键等多种衔接方式的固、液、流体多相平衡的多次衔接交联透明质酸凝胶体系，这样生产出来的产品，保证原透明质酸本身内聚力特性，又能保持良好的皮下修复及嫩肤效果。通过动物皮下降解试验，本专利技术技术皮下降解时间更长，修复效果更好，皮刺效果更佳。下面结合基体实施例对本专利技术的技术方案进行详细说明，但下述实施例仅仅为本专利技术的优选实施例，并非全部。基于实施方式中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得其它实施例，都属于本专利技术的保护范围。实施例一：一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，包括以下步骤：1)将碱性溶液和交联剂混合成混合溶液，交联剂为1，4-丁二醇二缩水甘油醚，透明质酸原料加入混合溶液中，搅拌溶解后，进行低温交联反应，形成透明质酸凝胶，低温交联反应温度为2℃，反应时间为36h；其中，透明质酸原料的分子量为500kDa，碱性溶液的Ph＞10，碱性溶液的浓度为3.5％，交联剂与透明质酸原料重量比例1∶30。2)对透明质酸凝胶进行热碱本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将碱性溶液和交联剂混合成混合溶液，交联剂为1，4‑丁二醇二缩水甘油醚，透明质酸原料加入混合溶液中，搅拌溶解后，进行低温交联反应形成透明质酸凝胶，低温交联反应的温度为2℃～15℃，反应时间为12h～36h；2)对透明质酸凝胶进行热碱活化交联反应，温度控制在20℃‑65℃，反应时间为1.5h‑6.5h；3)透明质酸凝胶加入浓度为0.1％‑4.0％的酸性溶液进行酸碱中和反应，在酸性条件下持续交联反应，持续交联反应的温度为15℃～37℃，时间为12h～48h，然后再剪切得到的凝胶体；4)凝胶体采用PBS透析液进行透析处理得到凝胶块；5)采用不锈钢挤压装置，在0.05MPa～0.5MPa的正压力条件下，使凝胶块通过孔径为50um‑3000um的滤网，将凝胶块挤碎成粘弹性的微粒凝胶；6)透明质酸原料溶解于浓度为0.1％～3.5％碱性溶液制备成透明质酸碱性调节液，然后透明质酸碱性调节液中加入微粒凝胶，微粒凝胶与透明质酸碱性调节液的质量比为1∶2～1∶20，并通过机械力装置进行混合，混合时间为15min～60min；7)在温度20℃～65℃的条件下进行碱性活化交联反应，且凝胶颗粒在电离强度和渗透压差作用下，经过24h～96h形成衔接交联透明质酸凝胶颗粒。...

【技术特征摘要】
1.一种多相混合衔接交联透明质酸制备方法，其特征在于包括以下步骤：1)将碱性溶液和交联剂混合成混合溶液，交联剂为1，4-丁二醇二缩水甘油醚，透明质酸原料加入混合溶液中，搅拌溶解后，进行低温交联反应形成透明质酸凝胶，低温交联反应的温度为2℃～15℃，反应时间为12h～36h；2)对透明质酸凝胶进行热碱活化交联反应，温度控制在20℃-65℃，反应时间为1.5h-6.5h；3)透明质酸凝胶加入浓度为0.1％-4.0％的酸性溶液进行酸碱中和反应，在酸性条件下持续交联反应，持续交联反应的温度为15℃～37℃，时间为12h～48h，然后再剪切得到的凝胶体；4)凝胶体采用PBS透析液进行透析处理得到凝胶块；5)采用不锈钢挤压装置，在0.05MPa～0.5MPa的正压力条件下，使凝胶块通过孔径为50um-3000um的滤网，将凝胶块挤碎成粘弹性的微粒凝胶；6)透明质酸原料溶解于浓度为0.1％～3.5％碱性溶液制备成透明质酸碱性调节液，然后透明质酸碱性调节液中加入微粒凝胶，微粒凝胶与透明质酸碱性调节液的质量比为1∶2～1∶20，并通过机械力装置进行混合，混合时间为15min～60min；7)在温度20℃～65℃的条件下进行碱性活化交...

【专利技术属性】
技术研发人员：金家铸，
申请(专利权)人：杭州科腾生物制品有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33