一种氯代聚酮化合物的制备方法与作为海洋防污剂的应用，制备时先对真菌Penicilliumsp.(TA33-1)进行菌种培养，再对该真菌进行发酵培养，将所得菌丝体用氯仿-甲醇混合液(1∶1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏依次进行正相硅胶柱层析、Sephadex LH-20凝胶柱层析、HPLC高效液相色谱，即得式I化合物。本发明专利技术提供一种海洋生物防污剂，其特征在于以本发明专利技术的式I化合物或其药学上可接受的盐，用于防治藤壶附着引起的海洋生物污损。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种氯代聚酮（chlorinated polyketides)化合物的制备方法与应 用，特别是涉及一种对海洋污损生物藤壶Balanus amphitrite幼虫具有极强的抑制活性的 氯代聚酮及其制备方法与应用。
技术介绍
海洋生物污损是有机分子、微生物、动物、植物、以及它们的副产物在海洋潜没设 施表面的危害性积聚。这种危害性积聚经常发生在没有保护的海洋潜没设施的表面，包 括海运和旅游的船舶，海军军舰，热交换器，海洋传感器以及水产养殖基地等。生物污损 引起了巨大的经济损失，仅以美国海军军舰为例，每年在这方面的经济损失在18到26亿 美元之间，而美国海军军舰数量仅占全球船舶数量的〇. 5%，因此海洋生物污损是极其严 重的自然危害。藤壶因其很强的黏附能力是目前所知的污损生物中非常普遍的代表性生 物。自2008年全球取消了有毒防污剂有机锡的使用后，寻找安全高效的海洋防污剂成为 国际上急需解决的课题。海洋天然产物被认为是新型海洋防污剂的重要来源。实际上，在 过去的几十年里已经从海绵，珊瑚和海藻等海洋生物中发现了很多有强抗污损活性的化合 物。然而，从上述大型生物中发现的活性化合物由于受到量的限制而大大影响了其潜在的 应用。海洋微生物由于在实验室中可以大规模发酵，不易破坏自然环境，而成为活性海洋 化合物的最重要来源。然而，近年来尚未见到从海洋来源的真菌中获得有重要抗污损活性 的氯代聚酮化合物作为防污剂的使用。（J.A. Callow，M.E. Callow，Nat. Commun. 2011，2， 244-253 ;C. M. Kirschner，A. B. Brennan，Annu. Rev. Mater. Res. 2012,42,1-19 ;M. Schultz， J. Bendick，E. Holm，W. Hertel，Biofouling 2011，27,87-98 ;N. Fusetani，Nat. Prod. Rep. 2004, 21，94-104 ;N. Fuse tan i，Nat. Prod. Rep. 2011，28,400-410 ;P. _Y. Qian，Y. Xu， N. Fusetani，Biofouling 2010, 26, 223_234〇 )
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一种来源于珊瑚真菌的氯代聚酮化合物的制备方法与作 为海洋防污剂的应用，它能满足现有技术的上述需求。菌种保藏信息：保藏单位名称：中国 微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心；保藏单位地址：北京市朝阳区北辰西路1号 院3号中国科学院微生物研究所；保藏日期：2014年4月3日；保藏编号：CGMCC8994 ;分类 命名：Penicillium sp. 〇 本专利技术提供式I化合物或其药学上可接受的盐：或其药学上可接受的盐。 9 式I化合物选自下列化合物： 本专利技术提供式I化合物的制备方法，其特征在于先在菌种培养基中对真菌 Penicillium sp. (TA33-1)进行菌种培养，再在发酵培养基中对该真菌进行发酵培养，将 所得菌丝体用氯仿-甲醇混合液（1 : 1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗 浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析、S印hadex LH-20凝胶柱层析后，再经 HPLC高效液相制备色谱，将所得洗脱液浓缩，即为式I化合物。 上述制备方法中菌种培养基优选含有葡萄糖0. 1 %-5.0% (重量百分比，下 同）、酵母膏 0.01 % -1 %、蛋白胨 0.01 % -1 %、琼脂 〇? 1% -3.0%、氯化钠 0.05% -5%， 其余为水，培养温度优选为0-30°C，培养时间优选为3-15天；发酵培养基优选含有大 米1.0% -80. 0% (重量百分比，下同）、氯化钠0.05% -5%，其余为水，培养温度优选为 0-30°C，培养时间优选为10-60天；所述的正相硅胶柱层析采用的固定相优选200-300目硅 胶，流动相优选体积比为5% -60%的乙酸乙酯-石油醚混合溶剂；所述S印hadex LH-20凝 胶柱层析采用的流动相优选体积比为氯仿：甲醇=1 : 1的混合溶剂；所述HPLC高效液相 制备色谱中采用的色谱柱为本领域常规〇DS C18柱，优选为Kromasil 10\250臟，5^111，流 速优选为1. 0-5. OmL/min，流动相优选体积比为50% -80%的甲醇-水混合溶剂。 本专利技术从珊瑚真菌中获得的氯代聚酮化合物对海洋污损生物藤壶Balanus amphitrite幼虫具有极强的抑制活性，可用于开发海洋防污剂，应用前景广阔。 本专利技术的另一实施方案提供式I化合物或其药学上可接受的盐在制备海洋防污 剂中的应用。 本专利技术中术语"药学上可接受的盐"是指非毒性的无机或有机酸和/或碱的加成 盐。可参见"Salt selection for basic drugs"，Int.J.Pharm. (1986)，33,201_217〇【具体实施方式】 为了便于对本专利技术的进一步理解，下面提供的实施例对其做了更详细的说明。但 是这些实施例仅供更好的理解专利技术而并非用来限定本专利技术的范围或实施原则，本专利技术的实 施方式不限于以下内容。 实施例1 (1)珊瑚来源真菌Penicillium sp. (TA33-1)的菌种培养 菌种培养所用的培养基含有葡萄糖1. 0% (重量百分比，下同）、酵母膏0. 2%、蛋 白胨0. 2 %、琼脂1. 0 %、氯化钠3. 0 %，其余为水，使用时制成试管斜面，真菌菌株在30 °C下 培养3天。(2)珊瑚来源真菌 Penicillium sp. (TA33_1)的发酵 发酵培养所用的培养基含有大米40. 0 % (重量百分比，下同）、氯化钠3. 0 %，其余 为水；真菌菌株于28°C培养30天。 (3)式I化合物的提取分离 取80瓶步骤（2)得到的菌丝体，用氯仿-甲醇混合液（1 : 1)浸提3次减压浓缩 后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析（固定相为 200-300目硅胶；流动相为70%乙酸乙酯/石油醚混合溶剂，体积比）、5印1^(1^1^-20凝 胶柱层析（氯仿：甲醇=1 : 1的混合溶剂，体积比）后，再经HPLC高效液相制备色谱分 离（色谱柱为Kromasil 10X250mm，5 ym，流速为2. OmL/min，流动相为90%的甲醇-水混 合溶剂，体积比），将所得洗脱液浓缩，得黄色固体，即为式I化合物。 式I化合物的结构确证数据：黄色固体；ESI-MS m/z 390. 95+;核 磁共振氢谱1HNMR(600MHz，CDC13) S"7. 94(1H，s，H-l)，7. 07(1H，d，J = 15. 6Hz，H-10)，6. 65(1H，s，H-4)，6. 09(1H，d，J = 15. 6Hz，H-9)，5. 71(1H，d，J = 9. 6Hz，H-12)，2. 49(1H， m，H-13)，2. 17(3H，s，H-20)，1. 85(3H，s，H-17)，1. 57(3H，s，H-18)，1. 44(1H，m，H-14)， 1.34(1H，m，H-14)，1.02(3H，本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种式I结构的氯代聚酮化合物，其特征在于包括以下步骤：先在菌种培养基中对真菌Penicillium sp.(TA33‑1)进行菌种培养，再在发酵培养基中对该真菌进行发酵培养，将所得菌丝体用氯仿‑甲醇混合液(1∶1)浸提3次减压浓缩后，用乙酸乙酯萃取3次得粗浸膏；乙酸乙酯相粗浸膏分别进行正相硅胶柱层析、Sephadex LH‑20凝胶柱层析后，再经HPLC高效液相制备色谱，将所得洗脱液浓缩，得到式I化合物；其中式I化合物的结构为：或其药学上可接受的盐；其中所述菌种培养基中含有葡萄糖、酵母膏、蛋白胨、琼脂、粗海盐、水；所述的发酵培养基中含有大米、粗海盐、水；所述的色谱分离为正相硅胶柱色谱分离、凝胶柱层析分离和高效液相色谱分离。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：邵长伦，王长云，魏美燕，贾彦来，
申请(专利权)人：中国海洋大学，
类型：发明
国别省市：山东;37
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