皱果桉组培快繁育苗方法技术

本发明专利技术涉及了一种皱果桉组织培养快速繁殖的育苗方法。本发明专利技术选择皱果桉优良成年大树为外植体材料，在无菌条件下用HgCl2灭菌消毒当年新生枝条含叶腋的茎段或顶芽，对皱果桉进行离体培养，建立无菌快繁体系。通过改进培养基成分和调控植物外源激素以及瓶苗的驯化和移植等技术手段，形成了一套完整的皱果桉组培快繁技术。其步骤为：选优、外植体材料选择、建立无菌培养体、增殖培养、生根培养、瓶苗驯化和移植、配制育苗基质、移植后的管理、幼苗培育等。本发明专利技术具有培养周期短、有效芽苗多、生根率高、移植成活率高的特点，使皱果桉能实行工厂化快速育苗，为一种理想的城市绿化、美化树种提供优质苗木。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及了一种皱果桉组织培养快速繁殖的育苗方法。本专利技术选择皱果桉优良成年大树为外植体材料，在无菌条件下用HgCl2灭菌消毒当年新生枝条含叶腋的茎段或顶芽，对皱果桉进行离体培养，建立无菌快繁体系。通过改进培养基成分和调控植物外源激素以及瓶苗的驯化和移植等技术手段，形成了一套完整的皱果桉组培快繁技术。其步骤为：选优、外植体材料选择、建立无菌培养体、增殖培养、生根培养、瓶苗驯化和移植、配制育苗基质、移植后的管理、幼苗培育等。本专利技术具有培养周期短、有效芽苗多、生根率高、移植成活率高的特点，使皱果桉能实行工厂化快速育苗，为一种理想的城市绿化、美化树种提供优质苗木。【专利说明】
本专利技术属于生物组织培养育苗
，具体涉及一种皱果桉的组培快繁育苗方法。
技术介绍
皱果桉Corymbia.ptychocarpa是热带树种，原产于澳大利亚西北部和昆士兰州等地方，也叫红冠桉，中等乔木，高8-12m，原产地花期时间长，从9月到次年3月，大型的头状花序，花朵直径可达7厘米，花色为耀眼的绯红色，形态优美独特，色彩艳丽，盛花期非常美丽壮观，是一种优良的观花树种。皱果桉繁殖方式一般为播种，由于我国引种和驯化成功时间不久，没有种子繁殖基地，目前主要是从澳大利亚进口种子，皱果桉的种壳木质化程度较高，取出种子非常困难，因此价格非常高。目前种子繁育的苗性状变异大，不能保持原有品种的优良性状，有扦插、嫁接等无性繁殖手段，繁殖速度慢，严重制约了皱果桉的推广。皱果桉组织培养技术的成功，克服了原有繁殖方法的不足，可在短时间内提供批量优质苗木。本专利技术创新点:1、采用的是10年生成年大树上的新生枝条为外植体建立无菌培养体，培养难度大于用种子和小苗为外植体材料建立的无菌培养体，不同高丽琼等是用种子在无菌条件下播种获得的苗，不同杨艳等取3年生苗为外植体建立的无菌繁殖材料；2、用本专利技术MS2培养配方培养出的继代苗繁殖速度快，增殖倍数为3-4倍，有效芽苗多。3、用本专利技术MS3培养配方诱导的生根瓶苗高生长好，平均苗高为28.48mm ;根量大，根上长满细小根毛，平均生根条数为5.92条；根长度在10-15mm之间，平均根长为13.62mm，瓶苗的根量大长度短，移植时不易伤根伤苗，苗木移植成活率高，平均成活率为95.85%以上。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对现有种原和育苗技术存在的不足，提供一种有效的皱果桉组织培养快繁育苗方法，达到育苗周期短、苗木生长旺盛、操作方法简便可行、生产成本较低，为大量推广使用该树种提供可靠的优良种苗目的。本专利技术的目的通过以下技术方案来予以实现: 提供一种，包括以下步骤: (1)选优； (2)外植体材料选择； (3)建立无菌繁殖体； (4)增殖培养； (5)生根培养； (6)瓶苗驯化； (7)配制育苗基质； (8)移植;(9)移植后的管理； (10)幼苗培育。步骤(1)所述选优是在野外10年生林地，选择花色艳红，花序大，花量多，杆型通直，树冠好看，生长健壮，具有观赏价值的成年优树为繁育对象。步骤(2)所述外植体材料选择是采摘无病虫害、无机械损伤的嫩枝条。修剪、消毒灭菌后，一瓶一段接种于MSl培养基上。步骤(3)所述建立无菌培养体是将外植体接种在MSl培养基中，人为控制温度、每日光照时间、光照强度等条件下培养，从叶腋萌发出绿芽，分割、转接并能够使绿芽连续生长繁殖，完成无菌培养体的建立。步骤(4)所述增殖培养就是扩繁。是将无菌繁殖体接种于MS2的增殖培养基中，放置在人为控制的温度、每日光照时间、光照强度等条件下培养，芽丛增殖，在无菌条件下再将其分割转接，经过反复继代培养扩大繁殖，达到一定数量后可诱导生根。步骤(5)所述生根培养是将芽从基部切下，接种于MS3培养基中，放置在人为控制的温度、每日光照时间、光照强度等条件下诱导瓶苗生根，使瓶苗叶片展开，茎芽生长健壮，形成完整植株准备移植。步骤(6)所述瓶苗驯化是将根系生长良好的瓶苗移入温室驯化，做好瓶苗从人为控制培养条件并给予营养元素到适应自然环境条件并自我吸取养份的驯化过程。步骤(7)所述的配制育苗基质是育苗营养基质的准备。黄心土与椰糠按1:1的比例充分混合。步骤(8)所述移植是将生根的组培瓶苗移栽到育苗杯中。步骤(9)所述移植后的管理是瓶苗在移植后一个月的水、肥及防病防虫管理。步骤(10)所述幼苗培育是移植后生长稳定了要进行全光照常规管理。幼苗培育至20~35厘米高时，根系生长已很发达了，育苗杯内根系团结在一起，就可出圃定植。【权利要求】1.一种，其特征包括以下步骤: 选优； 外植体材料选择； 建立无菌繁殖体； 增殖培养； 生根培养； 瓶苗驯化； 配制育苗基质； 移植； 移植后的管理； 幼苗培育。2.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(1)所述选优是在野外10年生林地，选择花色艳红，花序大，花量多，干型通直，树冠好看，生长健壮，具有观赏价值的成年优树为繁育对象。3.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(2)所述外植体材料选择是采摘无病虫害、无机械损伤的嫩枝条，修剪成带有1-2个腋芽的茎段，用流水冲洗干净，在实验室用0.1%的氯化汞消毒灭菌3-10分钟，再用无菌水洗4次，作为培养材料的外植体，一瓶一段接种于MSl培养基上。4.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(3)所述建立无菌培养体是将外植体接种在MSl培养基中，在室温为20-30°C，每日光照8-12小时，光照强度800-2000LX的条件下培养15-30天左右，从叶腋萌发出绿芽，剪取绿芽接种于增殖培养基MS2上，诱导出腋芽和不定芽并能够连续生长繁殖，完成无菌培养体的建立。5.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(4)所述增殖培养就是扩繁，是将无菌繁殖体接种于MS2的增殖培养基中，放置在室温20-30°C左右，每日光照8-12小时，光照强度在800 -3000LX的条件下培养15-40天后，芽丛增殖倍数3_4倍，在无菌条件下再将其分割转接，经过反复继代培养扩大繁殖，达到一定数量后可诱导生根。6.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(5)所述生根培养是丛生芽高约15mm以上时，将芽从基部切下，接种于MS3生根培养基中，放置在室温20-30°C左右，每日光照8-12小时，光照强度在1000-10000LX的条件下10天左右，苗开始出根，当出根率达到70%以上时，再放置到75%遮荫条件下温室中促根并炼苗20-30天左右，生根瓶苗叶片展开，茎芽生长健壮，形成完整植株准备移植。7.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(6)所述瓶苗驯化是将根系生长良好的瓶苗移入温室驯化后准备移植，本专利技术将开始出根的瓶苗直接移入温室驯化，瓶苗在温室里驯化、炼苗的过程中继续生根，可提前10天左右时间将驯化好的瓶苗进行移植。8.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(7)所述的配制育苗基质是育苗营养基质的准备，黄心土与椰糠按1:1的比例混合，将混合基质填装到荫棚内的育苗杯中，用0.1%浓度的高锰酸钾水溶液淋透基质，24小时后再用水淋透基质。9.根据权利要求1所述，其特征在于步骤(8)所述移植是将生根的组培瓶苗移栽到育苗杯中，完成瓶苗从人工控制培养条件给养到幼苗自养的过程；将瓶中的幼苗小心取出，洗净本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄少伟，莫晓勇，杨小红，刘天颐，刘纯鑫，
申请(专利权)人：华南农业大学，
类型：发明
国别省市：