控制害虫的方法技术

一种控制斜纹夜蛾害虫的方法，其特征在于，包括将斜纹夜蛾害虫与Cry1A蛋白接触。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术涉及一种控制斜纹夜蛾害虫的方法，包括：将斜纹夜蛾害虫与Cry1A蛋白接触。本专利技术通过植物体内产生能够杀死斜纹夜蛾的Cry1A蛋白来控制斜纹夜蛾害虫；与现有技术使用的农业防治方法、化学防治方法和物理防治方法相比，本专利技术对植物进行全生育期、全植株的保护以防治斜纹夜蛾害虫的侵害，且无污染、无残留，效果稳定、彻底，简单、方便、经济。【专利说明】
本专利技术涉及一种，特别是涉及一种用在植物中表达的CrylA蛋白来控制斜纹夜蛾为害植物的方法。
技术介绍
斜纹夜蛾(Spodoptera Iitura)属鳞翅目夜蛾科，为杂食性和暴食性害虫，为害寄主相当广泛，除玉米和大豆外，还可危害包括瓜、茄、豆、葱、韭菜、菠菜以及十字花科蔬菜、粮食、经济作物等近100科、300多种植物；斜纹夜蛾属世界性分布，国内各地都有发生，主要发生在长江流域和黄河流域。斜纹夜蛾主要以幼虫为害全株、低龄时群集叶背啃食；3龄后分散为害叶片、嫩茎、老龄幼虫可蛀食果实。 玉米和大豆是中国重要的粮食作物，每年因斜纹夜蛾造成的粮食损失巨大，更甚者影响到当地人口的生存状况。为了防治斜纹夜蛾，人们通常采用的主要防治方法有:农业防治、化学防治和物理防治。农业防治是把整个农田生态系统多因素的综合协调管理，调控作物、害虫、环境因素、创造一个有利于作物生长而不利于斜纹夜蛾发生的农田生态环境。如清除杂草，收获后翻耕晒土或灌水，以破坏或恶化其化蛹场所，有助于减少虫源；或者结合管理随手摘除卵块和群集危害的初孵幼虫，以减少虫源。因农业防治大多为预防性措施，应用有一定的局限性，不能作为应急措施，在斜纹夜蛾爆发时就显得无能为力。化学防治即农药防治，是利用化学杀虫剂来杀灭害虫，是斜纹夜蛾综合治理的重要组成部分，它具有快速、方便、简便和高经济效益的特点，特别是斜纹夜蛾大发生的情况下，是必不可少的应急措施，它可以在斜纹夜蛾造成危害前将其消灭。目前化学防治方法主要是药剂喷施。但化学防治也有其局限性，如使用不当往往会导致农作物发生药害、害虫产生抗药性，以及杀伤天敌、污染环境，使农田生态系统遭到破坏和农药残留对人、畜的安全构成威胁等不良后果。物理防治主要根据害虫对环境条件中各种物理因素的反应，利用各种物理因素如光、电、色、温湿度等及机械设备进行诱杀、辐射不育等方法来防治害虫。目前应用比较广泛的方法主要有点灯诱蛾、糖醋诱杀和柳枝蘸洒500倍敌百虫诱杀蛾子；上述方法虽然有不同程度的防治效果，但是在操作上具有一定的难度。为了解决农业防治、化学防治和物理防治在实际应用中的局限性，科学家们经过研究发现将编码杀虫蛋白的抗虫基因转入植物中，可获得一些抗虫转基因植物以防治植物虫害。CrylA杀虫蛋白是众多杀虫蛋白中的一种，是由苏云金芽孢杆菌库斯塔基亚种(Bacillus thuringiensis subsp.kurstaki, B.t.k.)产生的不溶性伴抱结晶蛋白。Cry IA蛋白被昆虫摄入进入中肠，毒蛋白原毒素被溶解在昆虫中肠的碱性pH环境下。蛋白N-和C-末端被碱性蛋白酶消化，将原毒素转变成活性片段；活性片段和昆虫中肠上皮细胞膜上表面上受体结合，插入肠膜，导致细胞膜出现穿孔病灶，破坏细胞膜内外的渗透压变化及pH平衡等，扰乱昆虫的消化过程，最终导致其死亡。已证明转CrylA基因的植株可以抵抗玉米螟、棉铃虫、草地贪夜蛾(秋粘虫)等鳞翅目(Lepidoptera)害虫的侵害,然而,罕有关于通过产生表达CrylA蛋白的转基因植株来控制斜纹夜蛾对植物危害的报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种，首次提供了通过产生表达CrylA蛋白的转基因植株来控制斜纹夜蛾对植物危害的方法，且有效克服现有技术农业防治、化学防治和物理防治等技术缺陷。为实现上述目的，本专利技术提供了一种控制斜纹夜蛾害虫的方法，包括将斜纹夜蛾害虫与CrylA蛋白接触。优选地,所述CrylA蛋白为CrylAb蛋白、CrylAb/Ac蛋白或CrylA.105蛋白。进一步地,所述CrylAb蛋白存在于产生所述CrylAb蛋白的植物细胞中，所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述植物细胞与所述CrylAb蛋白接触。更进一步地,所述CrylAb蛋白存在于产生所述CrylAb蛋白的转基因植物中，所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述转基因植物的组织与所述CrylAb蛋白接触，接触后所述斜纹夜蛾害虫生长受到抑制并最终导致死亡，以实现对斜纹夜蛾危害植物的控制。进一步地，所述CrylAb/Ac蛋白存在于产生所述CrylAb/Ac蛋白的植物细胞中，所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述植物细胞与所述CrylAb/Ac蛋白接触。更进一步地,所述CrylAb/Ac蛋白存在于产生所述CrylAb/Ac蛋白的转基因植物中，所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述转基因植物的组织与所述CrylAb/Ac蛋白接触，接触后所述斜纹夜蛾害虫生长受到抑制并最终导致死亡，以实现对斜纹夜蛾危害植物的控制。进一步地,所述CrylA.105蛋白存在于产生所述CrylA.105蛋白的植物细胞中,所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述植物细胞与所述CrylA.105蛋白接触。更进一步地，所述CrylA.105蛋白存在于产生所述CrylA.105蛋白的转基因植物中，所述斜纹夜蛾害虫通过摄食所述转基因植物的组织与所述CrylA.105蛋白接触，接触后所述斜纹夜蛾害虫生长受到抑制并最终导致死亡，以实现对斜纹夜蛾危害植物的控制。所述转基因植物可以处于任意生育期。所述转基因植物的组织可以为叶片、茎杆、果实、雄穗、雌穗、花药或花丝。 所述对斜纹夜蛾危害植物的控制不因种植地点的改变而改变。所述对斜纹夜蛾危害植物的控制不因种植时间的改变而改变。所述植物可以来自玉米、大豆、棉花、甘薯、芋、莲、田菁、烟草、甜菜、白菜或茄子。所述接触步骤之前的步骤为种植含有编码所述CrylA蛋白的多核苷酸的植物。优选地，所述CrylA蛋白的氨基酸序列具有SEQ ID NO: 1、SEQ ID NO:2, SEQ IDN0:3或SEQ ID N0:28所示的氨基酸序列。所述CrylA蛋白的核苷酸序列具有SEQ ID NO:4,SEQ ID NO: 5、SEQ ID NO:6 或 SEQ ID NO: 29 所示的核苷酸序列。在上述技术方案的基础上，所述植物还可以产生至少一种不同于所述CrylA蛋白的第二种核苷酸。进一步地,所述第二种核苷酸可以编码Cry类杀虫蛋白质、Vip类杀虫蛋白质、蛋白酶抑制剂、凝集素、 α-淀粉酶或过氧化物酶。优选地,所述第二种核苷酸可以编码Vip3A蛋白或Cry2Ab蛋白。更进一步地，所述第二种核苷酸包括SEQ ID N0:7或SEQ ID N0:8所示的核苷酸序列。可选择地，所述第二种核苷酸为抑制目标昆虫害虫中重要基因的dsRNA。为实现上述目的，本专利技术还提供了一种CrylA蛋白质控制斜纹夜蛾害虫的用途。在本专利技术中，CrylA蛋白在一种转基因植物中的表达可以伴随着一个或多个Cry类杀虫蛋白质和/或Vip类杀虫蛋白质的表达。这种超过一种的杀虫毒素在同一株转基因植物中共同表达可以通过遗传工程使植物包含并表达所需的基因来实现。另外，一种植物(第I亲本)可以通过遗传工程操作表达CrylA蛋白质，第二种植物(第2亲本)可以通过遗传工程操作本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种控制斜纹夜蛾害虫的方法，其特征在于，包括将斜纹夜蛾害虫与Cry1A蛋白接触。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：庞洁，丁德荣，田聪，杨旭，张云珠，
申请(专利权)人：北京大北农科技集团股份有限公司，北京大北农科技集团股份有限公司生物技术中心，
类型：发明
国别省市：