【技术实现步骤摘要】
—种提局普鲁兰多糖产量的方法
:本专利技术涉及一种微生物发酵生产普鲁兰多糖的方法,具体涉及一种发酵过程中分段添加生长因子来提高普鲁兰多糖产量的方法。属于生物发酵工程
。
技术介绍
:普鲁兰多糖是一种水溶性的不定形葡聚糖并作为水溶性多糖的模式多糖,它已作为乳化剂、悬浮剂、增稠剂、稳定剂、胶凝剂、成膜剂和润滑剂等广泛应用于食品、制药、石油、化工等多个领域。普鲁兰多糖将是今后新型发酵工程的一个重要发展方向,越来越受到国内企业的重视。生长因子是指微生物生长过程中必须的,必须由外界直接提供的营养成分,常见的生长因子有维生素、氨基酸、嘌呤嘧啶等。生长因子可以提供微生物重要化学物质、辅助因子(辅酶和辅基)的组分和参与代谢。普鲁兰多糖属于次级代谢产物,在菌体处于对数期后期,稳定期前期开始产生。目前文献当中关于普鲁兰多糖产量提高主要是通过菌种诱变、培养基成分优化,往往效果不太明显,发酵周期长,且底物的转化率不高,导致普鲁兰多糖成本居高不下。申请号为201210594876.4的中国专利技术专利《大量生产普鲁兰多糖的诱变菌株及其培养方法》,公开了一株产普鲁兰多糖的出芽短梗霉CGMCC N0.7055,并公开了利用该菌株生产普鲁兰 多糖的方法,以及发酵培养基组成。出芽短梗霉(Aureobasidium pullulans)BCSffGHPLlOl在发酵培养基发酵生产普鲁兰多糖产量为96g/L,较原始菌株68 ±5.2g/L的产量,提高了 41.2%,发酵条件为281:,200±20印111下培养3(1。但仍存在发酵周期较长,且底物转化率较低,底物利用率不高的问 ...
【技术保护点】
一种提高普鲁兰多糖产量的方法,包括以下步骤:(1)种子培养将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中,培养基装液量100ml,培养温度为32℃,摇床转速为180rpm,培养时间为28?32h;(2)发酵培养500mL挡板瓶瓶装液量100mL,接种量为4%(V/V),温度28℃,摇床转速为400rpm,培养57?63h;(3)普鲁兰多糖的分离发酵液滤除菌体后,加入三倍乙醇,搅拌,4℃静置过夜,离心后,再使用无水乙醇冲洗2遍,干燥得白色普鲁兰多糖粗品;其特征在于,菌体生长处于对数期初期时,加入0.03?0.05‰的维生素B1,当菌体生长处于稳定期前期时,加入0.02?0.04‰的尿嘧啶核苷酸;所述出芽短梗霉BCSWGHPL101(Aureobasidium?pullulans)保藏编号为CGMCC?NO.7055。
【技术特征摘要】
1.一种提高普鲁兰多糖产量的方法,包括以下步骤: (1)种子培养 将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中,培养基装液量100ml,培养温度为32°C,摇床转速为180rpm,培养时间为28_32h ; (2)发酵培养 500mL挡板瓶瓶装液量IOOmL,接种量为4% (V/V),温度28°C,摇床转速为400rpm,培养 57-63h ; (3)普鲁兰多糖的分离 发酵液滤除菌体后,加入三倍乙醇,搅拌,4°C静置过夜,离心后,再使用无水乙醇冲洗2遍,干燥得白色普鲁兰多糖粗品; 其特征在于,菌体生长处于对数期初期时,加入0.03-0.05%。的维生素B1,当菌体生长处于稳定期前期时,加入0.02-0.04%。的尿嘧啶核苷酸; 所述出芽短梗霉 BCSWGHPL101 (Aureobasidium pullulans)保藏编号为 CGMCCN0.7055。2.根据权利要求1所述 提高普鲁兰多糖产量的方法,其特征在于,所述维生素B1及尿喃唳核苷酸经过0.45um无菌滤膜过滤。3.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法,其特征在于,所述种子培养,培养基组成为:蔗糖Sg,酵母浸粉0.2g,氯化钠0.15g,磷酸氢二钾0.1g,硫酸铵0.1g,硫酸镁0.04g,硫酸亚铁0.05g,蒸懼水定容至100mL。4.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法,其特征在于,所述发酵培养,培养基组成为:蔗糖10g,蛋白胨0.4g,氯化钠0.3g,磷酸氢二钾0.7g,硫酸镁0.04g,硫酸亚铁0.05g,蒸馏水定容至IOOmL,初始ρΗ5.5-6.5。5.根据权利要求1所述提高普鲁兰多糖产量的方法,包括如下步骤: (1)种子培养 将出芽短梗霉菌株进行活化后挑一环转接到500ml挡板瓶中,培养基装液量100ml,培养温度为32°C,摇床转速为180rpm,培养时间为28h ; (2)发酵培养 500mL挡板瓶装液量IOOmL,接种量为4% (V/V),温度28 V,摇床转速为4...
【专利技术属性】
技术研发人员:乔长晟,王建梓,宋亚琼,郝华旋,
申请(专利权)人:天津北洋百川生物技术有限公司,
类型:发明
国别省市:
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