一种磷酸转移酶基因PhoC(I)及其制备方法与应用技术

技术编号:9791419 阅读:149 留言:0更新日期:2014-03-21 02:05
本发明专利技术公开了一种磷酸转移酶基因PhoC(I)及其制备方法与应用。磷酸转移酶基因PhoC(I),其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。以具有磷酸转移酶活性的菌为筛选库,设计引物,然后采用限制性内切酶EcoRI随机切基因组以筛选获得具有磷酸转移酶活性的磷酸转移酶基因PhoC(I)。本发明专利技术的磷酸转移酶基因PhoC(I)较PCR扩增到的磷酸转移酶基因序列(PhoC?II)多了一段基因序列。利用该基因PhoC(I)制备的重组菌的酶活比采用PCR扩增所得基因PhoC(II)的重组菌酶活大大提升。所得重组菌以整细胞高效催化肌苷、鸟苷合成呈味核苷酸二钠(I+G)。不仅底物转化率高、专一性强,后续提取工艺也简单方便,可以用于产业化生产。

【技术实现步骤摘要】
一种磷酸转移酶基因PhoC(I)及其制备方法与应用
本专利技术涉及基因工程
,具体地说,涉及磷酸转移酶基因的筛选、克隆表达及应用。
技术介绍

【技术保护点】
磷酸转移酶基因PhoC(I),其核苷酸序列如SEQ?ID?NO.1所示。

【技术特征摘要】
1.磷酸转移酶基因PhoC(I),其核苷酸序列如SEQID N0.1所示。2.权利要求1所述的磷酸转移酶基因PhoC(I)的制备方法,其特征在于包括如下步骤:以具有磷酸转移酶活性的菌为筛选库,设计引物:PhoC-upper:5’-CTGCGAATTCTTTGCGCTGGTTCCCGCCGGCAATGA-3’phoC-lower:5’ -GGGM££IICTAATTTCGCTGTTTCGCAAACTCGTC-3’ ; 然后采用限制性内切酶EcoRI随机切基因组以筛选获得具有磷酸转移酶活性的磷酸转移酶基因PhoC(I)。3.如权利要求2所述的制备方法,其特征在于,所述具有磷酸转移酶活性的菌为产气肠杆菌、蟑螂埃希氏菌或摩氏摩根菌。4.含有权利要求1所述磷酸转移酶基因PhoC(I)的磷酸转移酶重组菌,其特征在于由如下步骤制备而成:将磷酸转移酶基...

【专利技术属性】
技术研发人员:蔡友华严杰能郑彩珠李红徐珍珍
申请(专利权)人:广东肇庆星湖生物科技股份有限公司
类型:发明
国别省市:

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