【技术实现步骤摘要】
一种游离赖氨酸发酵方法
[0001]本专利技术属于发酵化工
,具体为一种游离赖氨酸发酵方法。
技术介绍
[0002]L
‑
赖氨酸(Lysine)的化学名称为2,6
‑
二氨基己酸。赖氨酸为碱性必需氨基酸。赖氨酸在医药及保健营养等方面有重要的作用。本专利技术的赖氨酸发酵菌株为谷氨酸棒杆菌发酵,赖氨酸是天冬氨酸族氨基酸,其发酵为典型的代谢调控发酵,由TCA循环产生的天冬氨酸经过反应合成二氨基庚二酸(DAP),进而合成赖氨酸。目前现有的发酵工艺培养基配方为复合型天然物料调配所得,培养基成份复杂,未知物质较多,营养物质浓度不明确,杂质多,特别是经高温压灭菌后会产生不明化合物、营养物质损耗及物料颜色加深。原有发酵工艺利用硫酸铵或氯化铵作为快速氮源及发酵过程PH的调节剂,此物料在高温高压灭菌过程中也易损耗,同时,此类无机盐使产物在发酵过程中形成硫酸盐或盐酸盐,令提取游离赖氨酸工艺变复杂。因此,工厂生产过程常常会因为物料批号的改变造成发酵水平不稳定,杂质多易引起发酵培养基灭菌不彻底造成污染倒罐,直接 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种游离赖氨酸发酵方法,发酵步骤为:
①
配制一级种子培养基、二级种子培养基、发酵培养基,这三种培养基完全溶解后分别进行灭菌处理;
②
将赖氨酸菌种接种于一级种子培养基中,进行种子扩大培养,得到对数生长期的一级种子液;
③
将步骤
②
的一级种子液按0.1
‑
0.2%的体积比例接入二级种子培养基中,28
‑
32℃,150
‑
300rpm,通风比0.3
‑
0.5V/V
·
m,pH7.15
‑
7.2,培养14
‑
20h,得到对数生长期的二级种子液;
④
将步骤
③
的二级种子液按5
‑
20%的体积比例接入发酵培养基中好氧发酵,30
‑
35℃、300
‑
600rpm、溶氧≥20%、pH 7.0
‑
7.8、通风比0.5
‑
1.0V/V
·
m,好氧发酵时间为24
‑
36h,发酵过程利用补料调控pH;发酵过程中流加葡萄糖溶液,葡萄糖溶液质量百分浓度控制在0.5
‑
1.5%;所述步骤
①
中一级种子培养基的灭菌方法是蒸汽灭菌法,条件为121.0
‑
123.0℃,维持20
‑
30分钟,压力0.105
‑
0.12Mpa;所述二级种子培养基与发酵培养基溶解后采用无机膜过滤进行除菌。2.根据权利要求1所述的游离赖氨酸发酵方法,其特征在于:所述步骤
④
调控pH是指发酵罐压0.05Mpa,发酵温度控制30
‑
35℃,发酵初时pH在7.4
‑
7.5范围,发酵过程中通过补充100
‑
200g/L的氮源水溶液保持pH在7.4
‑
7.8的范围。3.根据权利要求1所述的游离赖氨酸发酵方法,其特征在于:所述步骤
①
无机膜条件为0.22um的0.5
‑
30M2无机膜,在0.4
‑
1.0Mpa压力条件且室温下过滤。4.根据权利要求3所述的游离赖氨酸发酵方法,其特征在于:步骤
②
中的赖氨酸菌种为谷氨酸棒杆菌(Corynebacterium glutamicum)。5.根据权利要求4所...
【专利技术属性】
技术研发人员:黄永嫦,鲁立,欧雅莉,谢学敏,黄健华,宾桂青,
申请(专利权)人:广东肇庆星湖生物科技股份有限公司,
类型:发明
国别省市:
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