检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用技术

本发明专利技术涉及一种检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用。该扩增内标基因的序列为SEQIDNO.1所示的碱基序列。这预示了在DNA水平检测已深加工食品中所含的过敏原物质是可能的。采用本发明专利技术的扩增内标进行花生过敏原的PCR检测具有较高的灵敏度和特异性，可用于实际商品检测，并能有效排除可能存在的假阴性结果，具有一定的应用价值。

【技术实现步骤摘要】
检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用
本专利技术涉及一种检测花生过敏原用扩增内标、其构建方法及其应用。
技术介绍
由于食品成分及其加工的复杂性，在DNA提取中残留的某些杂质成分对PCR扩增可能产生抑制作用，除抑制剂以外，其他原因主要有PCR仪故障、PCR检测体系不恰当、DNA聚合酶失活以及人为操作失误等，可能导致PCR检测出现假阴性结果，这会使得花生过敏患者误食含有花生成分的食品，造成食品安全问题，危害公众健康，因而需要绝对避免。在PCR反应体系中加入扩增内标(internal amplification control, IAC)是指示假阴性结果的有效手段之一，近年来已经成为PCR检测标准化的趋势。扩增内标(InternalAmplification Control, IAC)是添加到 PCR 反应体系中用以指示假阴性现象的一段人工构建的DNA序列。其作用原理是:将扩增内标添加到PCR反应体系中，使之与目标基因序列共同进行扩增，如果在反应体系中存在一些抑制因素，则扩增内标和目的序列的扩增反应都将受到抑制，从而达到指示PCR反应假阴性的目的。从扩增内标与目的序列在扩增本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种检测花生过敏原用扩增内标，其特征在于该扩增内标基因的序列为SEQ?ID?NO.1所示的碱基序列。

【技术特征摘要】
1.一种检测花生过敏原用扩增内标，其特征在于该扩增内标基因的序列为SEQ IDN0.1所不的喊基序列。2.—种构建根据权利要求1所述的检测花生过敏原用扩增内标的方法，其特征在于该方法的具体步骤为: a.通过BLAST比对，选择与花生过敏原Arah I基因同源性较低的单增李斯特菌FSLR2-561基因(NC_017546 )作为内参基因，根据内参基因的序列设计引物，选择扩增产物比目的片段大150bp~250bp的引物FSL-F/R;所述的花生过敏原Ara h I的基因为:Ara h 1-F: CTGGAAACCTTGAACTCGT,Ara h 1-R:GTTGATGGCTACTGGATGA ； 所述的内参基因FSL R2-561的引物序列为:FSL-F: TAGCCAACCGATGTTTCTGTATC,FSL-R: CATCATTTAGCGTGACTTTCTTTCA ； b.选取步骤a所得的内参基因的...

【专利技术属性】
技术研发人员：蔡琴，陈沁，张文举，关潇，邓志瑞，
申请(专利权)人：上海大学，
类型：发明
国别省市：