本发明专利技术提供了一种羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法。该方法以羟乙基淀粉为基本骨架，丁二酸酐为偶联剂，将羟乙基淀粉和多西紫杉醇以酯键形式偶联起来，得到一种具有良好生物相容性的羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物。与多西紫杉醇原料药相比，该偶联物显著提高了多西紫杉醇在水中的溶解度(约1000～3000倍)。同时偶联物中的羟乙基淀粉还明显改善了多西紫杉醇的药代动力学性质，具有体内长循环特征。在小鼠荷瘤乳腺癌EMT-6模型实验中，相比多西紫杉醇原料药，该偶联物明显增强了对皮下移植肿瘤的抑制作用。
【技术实现步骤摘要】
ー种新型抗癌药物羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物制备方法
:本专利技术涉及生物相容和生物降解类新型药物载体，具体涉及ー种以羟乙基淀粉为基本骨架，以丁二酸为连接臂，制备羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的方法和应用。专利技术背景:多西紫杉醇(Docetaxel，DTX)是继紫杉醇后又ー种新型的抗癌药物。该药物的作用机制是提高加强微管蛋白聚合作用和抑制微管解聚作用，阻滞细胞于G和M期，从而抑制癌细胞的有丝分裂和增通(F.V.Fossella et al., Phase II study of docetaxel foradvanced or metastatic platinum-refractory non-small—cell lung cancer.Journalof Clinical Oncology, 1995,13,645-651)。与紫杉醇相比，在体外抗瘤活性实验中，已证实多西紫杉醇的活性是紫杉醇的1.3~12倍(S.Noguchi, Predictive factors forresponse to aocetaxel in numan breast cancers?しancer bcience,200d,97,813-820)。目前已获得FDA批准用于临床上治疗乳腺癌、卵巣癌、非小细胞肺癌和前列腺癌等。由于多西紫杉醇在水中的溶解性较差( 小于I U g/ml)，极大的影响了药效的发挥，目前上市的剂型多利用非离子型表面活性剂吐温-80增溶，经13%的こ醇稀释后注射使用。但是吐温-80具有溶血性且粘度较大，在临床应用中，以发现该制剂具有外周神经毒性和肌肉骨骼毒性，以及中性粒细胞减少等一系列过敏反应(J.Baker, et al., Docetaxel-relatedside effects and their management.European Journal of Oncology Nursing,2009,13,49-59)。另外，由于小分子抗癌药物在体内分布广泛，尤其是在正常器官和组织中有较多的分布，不仅给患者带来了痛苦，更影响了药物利用度。因此解决多西紫杉醇的水溶性问题，控制该药物释放速率和靶向性，对于提高多西紫杉醇抗癌药效具有重要意义。天然多糖类聚合物具有良好的生物相容性和生物降解性，作为药物载体，可有效避免和降低载体本身带来的毒副作用。然而，普通天然多糖同样具有水溶性较差的问题，例如壳聚糖只能在酸性条件下溶解，而纤维素在水溶液和一般溶液下都不能溶解。作为药物载体，天然多糖不仅在负载水溶性药物，而且在负载脂溶性药物方面均存在一定的局限性。为此，通常采用聚乙二醇(PEG)对天然多糖类药物载体进行表面亲水修饰。需要指出的是，这种PEG亲水修饰作用往往也带来细胞摄取的減少和胞内释放的降低，即所谓“PEG两难困境，，(PEG-dilemma)现象(H.Hatakeyama et al., A multifunctional envelopetype nano device(MEND)for gene delivery to tumours based on the EPR eftect:astrategy for overcoming the PEG dilemma.Advanced Drug Delivery Reviews,2011,63,152-160)。另外，PEG本身不能被降解，且连续使用容易产生副作用(R.Webster et al.，PEb ana PEb conjugates toxicity:towards an understanding of the toxicity of PEband its relevance to PEGylated biological.PEGylated Protein Drugs:Basic Scienceand Clinical Applications, Series !Milestones in Drug Therapy, Birkhauser, , Basel2009，127-146)。轻乙基淀粉(Hydroxyethyl starch,以下简记为HES)是ー种天然多糖(高分支支链淀粉)经酸水解、并与环氧乙烷反应(羟乙基化)的产物。与一般天然多糖不同，HES不仅具有良好的水溶性，还具有良好的生物降解性。！ES本身就是ー种血浆扩容剂，进入体内后能够迅速扩张血浆容量，并能够在血管内停留足够长的时间维持血压，是目前治疗低血容量和休克的首选药物。另外，HES还具有良好的局部和系统耐受性(J.Waitzinger et al.，Hydroxyethyl starch (HES)[130/0.4], a new HES specification.Drugs in R &D,2003,4，149-158)。人体内每天使用的最大剂量可达1.2g/kg，且没有副作用。在进入血液之后，HES被血浆a -淀粉酶逐渐水解，平均分子量不断的下降，最后被肾小球滤过通过尿液排出体外(し.Jungheinrich et al., Pharmacokinetics of hydroxyethyl starch.しlinica丄Pharmacokinetics, 2005，44，681-699)。目前关于HES作为药物载体的研究甚少，尤其是作为负载脂溶性药物的载体尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供ー种新型抗癌药物羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法。实现本专利技术的技术方案是:本专利技术提供的羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法，包括以下步骤:步骤ー:令多西紫杉醇与丁二酸酐反应生成多西紫杉醇_2’ 丁二酸酯；步骤二:令对甲苯磺酸与4-二甲氨基吡啶反应生成二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐；步骤三:以羟乙基淀粉为基本骨架，在二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐和1-乙基-3-(3- 二甲基氨丙基)-碳化二亚胺的催化下，令羟乙基淀粉和紫杉醇-2’ 丁二酸酯发生酷化反应生成羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物。上述步骤一所述的令多西紫杉醇与丁二酸酐反应生成紫杉醇_2’ 丁二酸酯的具体方法是:将多西紫杉醇，丁二酸酐和4`-二甲氨基吡啶加入到反应容器中，封ロ后抽真空2h，多西紫杉醇、丁二酸酐和4-二甲氨基吡啶的用量摩尔比为2.5: 3: I;然后将吡啶混合在二氯甲烷中注入反应容器，室温反应3h后加入甲醇终止反应得反应混合液，其中多西紫杉醇与吡啶的用量摩尔体积比为1: 2(单位为mol: L)，吡唆、二氯甲烷和甲醇的里量体积比为2.5: 5: I ;将得到的反应混合液用浓度为2mol/L的HCl水溶液和饱和食盐水依次萃取一次，得到有机相I和水相I ;有机相I再用配制好的HCl水溶液和饱和食盐水分别重复萃取2次，将各次所得水相合并得到水相II ;水相II再用二氯甲烷萃取I次，得到有机相II，将有机相I和有机相II合并后，用无水硫酸钠干燥，蒸去有机溶剤，以甲醇/ 二氯甲烷(I: 10，v/v)为流动相，通过硅胶柱层析分离，得到白色固体状多西紫杉醇_2’ 丁二酸酷。所述的HCl水溶液的配制方法是:取浓盐酸15ml，用一次水稀释至100ml，得到2mol/L的HCl水溶液；所述的饱和食盐本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种羟乙基淀粉?多西紫杉醇偶联物的制备方法，包括以下步骤：步骤一：令多西紫杉醇与丁二酸酐反应生成多西紫杉醇?2’丁二酸酯；步骤二：令对甲苯磺酸与4?二甲氨基吡啶反应生成二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐；步骤三：以羟乙基淀粉为基本骨架，在二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐和1?乙基?3?(3?二甲基氨丙基)?碳化二亚胺的催化下，令羟乙基淀粉和紫杉醇?2’丁二酸酯发生酯化反应生成羟乙基淀粉?多西紫杉醇偶联物。
【技术特征摘要】
1.一种羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法，包括以下步骤: 步骤ー:令多西紫杉醇与丁二酸酐反应生成多西紫杉醇-2’ 丁二酸酯； 步骤二:令对甲苯磺酸与4- 二甲氨基吡啶反应生成二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐； 步骤三:以羟乙基淀粉为基本骨架，在二甲氨基吡啶对甲苯磺酸盐和1-乙基-3- (3-二甲基氨丙基)-碳化二亚胺的催化下，令羟乙基淀粉和紫杉醇_2’丁二酸酯发生酯化反应生成羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物。2.根据权利要求1所述的羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法，其特征在干，步骤一所述的令多西紫杉醇与丁二酸酐反应生成紫杉醇-2’ 丁二酸酯的具体方法是:将多西紫杉醇，丁二酸酐和4-二甲氨基吡啶加入到反应容器中，封ロ后抽真空2h，多西紫杉醇、丁二酸酐和4-二甲氨基吡啶的用量摩尔比为2.5: 3: I ;然后将吡啶混合在二氯甲烷中注入反应容器，室温反应3h后加入甲醇终止反应得反应混合液，其中多西紫杉醇与吡啶的用量摩尔体积比为1: 2(单位为mol: L)，吡啶、二氯甲烷和甲醇的用暈体积比为2.5: 5:1 ;将得到的反应混合液用浓度为2mol/L的HCl水溶液和饱和食盐水依次萃取一次，得到有机相I和水相I ;有机相I再用配制好的HCl水溶液和饱和食盐水分别重复萃取2次，将各次所得水相合并得到水相II ;水相II再用二氯甲烷萃取I次，得到有机相II，将有机相I和有机相II合并后，用无水硫酸钠干燥，蒸去有机溶剤，以甲醇/ 二氯甲烷(I: 10，v/v)为流动相，通过硅胶柱层析分离，得到白色固体状多西紫杉醇-2’ 丁二酸酷。3.根据权利要求2所述的羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法，其特征在于，所述的HCl水溶液的配制方法是:取浓盐酸15ml，用一次水稀释至100ml，得到2mol/L的HCl水溶液。4.根据权利要求2所述的羟乙基淀粉-多西紫杉醇偶联物的制备方法，其特征在于，所述的饱和食盐水的配制方法是:取氯化钠36g溶解在100ml —次...
【专利技术属性】
技术研发人员：杨祥良，杨亚江，徐辉碧，柳轻瑶，万江陵，
申请(专利权)人：华中科技大学，
类型：发明
国别省市：
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