【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于免疫学
,具体的是一种T4-HRP的制备方法。
技术介绍
甲状腺素即3,5,3’,5’-四碘甲状腺原氨酸,简称T4 (Thyroxine,T4),是由甲状腺 滤泡上皮细胞合成和分泌的甲状腺激素。甲状腺素的基本结构是由一个酪氨酸残基和一个 酚环构成。正常人平均每日的T4分泌量为(90±9)iig,约为甲状腺内贮存量的1%。T4进 入血液循环后约99.96%与结合蛋白结合,其中约60%与甲状腺素结合球蛋白(TBG)结合, 30%与甲状腺素结合前白蛋白(TBPA)结合,其余与白蛋白结合。T4具有生物活性,促进糖,脂肪,蛋白质代谢,产生能量和热,促进生长发育。甲状 腺机能亢进时,甲状腺合成和分泌T4增多,血清T4增高。亚急性甲状腺炎,慢性淋巴细胞 性甲状腺炎的早期,因甲状腺滤泡受破坏,T4溢出,使血中T4升高产生暂时性的轻度甲亢。 甲状腺机能减退时,无论是原发,继发或其它原因,T4均减低,甲状腺缺乏或先天性发育不 良,及甲状腺全切除后,血清T4降低。临床上血清T4的检测主要采用免疫法,而且固相包被T4抗体是T4检测试剂盒的 常用方式,这就需要对T4抗原进行标记以达到检测血清T4的目的。而目前市场上的T4标 记抗原多要先偶联一个载体蛋白才能有效进行标记,此种方法在空间上对针对T4的抗原 抗体反应必然会产生较大影响,从而导致检测结果出现偏差。
技术实现思路
本专利技术的目的是为了解决上述技术问题,提供一种制备方法简单、生产周期短,生 产成本低的用于T4免疫学检测的T4-HRP。技术方案包括下述步骤:,包括以下步骤:(I)将T4与HRP ...
【技术保护点】
一种甲状腺素标记辣根过氧化物酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将T4溶于二甲基亚砜溶液制备A溶液,HRP溶于碳酸盐缓冲液中制备B溶液,然后在A溶液中加入正三丁胺溶液,冰浴持续搅拌一定时间,得溶液C,溶液C再加入氯甲酸异丁酯溶液,室温搅拌一定时间后,得溶液D,将B溶液加入溶液D进行偶联反应,得到反应混合液E;(2)反应混合液E通过透析处理除去反应混合物中未参与偶联的小分子物质,缓冲液采用pH7.4的0.01M磷酸盐缓冲液,得偶联物。
【技术特征摘要】
1.一种甲状腺素标记辣根过氧化物酶的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)将T4溶于二甲基亚砜溶液制备A溶液,HRP溶于碳酸盐缓冲液中制备B溶液,然后 在A溶液中加入正三丁胺溶液,冰浴持续搅拌一定时间,得溶液C,溶液C再加入氯甲酸异丁 酯溶液,室温搅拌一定时间后,得溶液D,将B溶液加入溶液D进行偶联反应,得到反应混合 液E ;(2)反应混合液E通过透析处理除去反应混合物中未参与偶联的小分子物质,缓冲液 采用pH7.4的0.0lM磷酸盐缓冲液,得偶联物。2.根据权利要求1所述一种甲状腺素标记辣根过氧化物酶的制备方法,其特征在于, 步骤(I)中制备的A溶液和B溶液的浓度分别...
【专利技术属性】
技术研发人员:张振斌,辛志勇,汪艳培,李克锦,刘萍,栾大伟,
申请(专利权)人:博奥赛斯天津生物科技有限公司,
类型:发明
国别省市:
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。