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一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒制造技术

技术编号:9614746 阅读:108 留言:0更新日期:2014-01-30 00:52
本发明专利技术涉及一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,属于生物技术领域。其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所述。该重组质粒局部注射乳腺癌可明显抑制肿瘤癌旁基质中肿瘤相关蛋白的活性。FuGW-CSD重组质粒局部注射乳腺癌可明显抑制其上皮间质转化,抑制其转移。

Lentivirus recombinant plasmid for inhibiting epithelial mesenchymal transition of breast tumors

The invention relates to a lentivirus recombinant plasmid for inhibiting the epithelial mesenchymal transition of breast tumors, which belongs to the field of biotechnology. Its nucleotide sequence, such as SEQ, ID, NO:1, is described. The local injection of recombinant plasmid could significantly inhibit the activity of tumor associated protein in tumor adjacent matrix. Local injection of recombinant plasmid FuGW-CSD could inhibit the epithelial mesenchymal transition and inhibit metastasis.

【技术实现步骤摘要】
一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒
本专利技术属于生物
,具体为一种重组质粒,通过表达目的肽段,与肿瘤转移相关蛋白发生相互作用,达到对乳腺肿瘤上皮间质转化的抑制目的。
技术介绍
上皮间质转化(Epithelial-mesenchymaltransition, EMT),即上皮细胞通过特定程序转化为具有间质表型的细胞,是上皮细胞来源的恶性肿瘤细胞获得迁移和侵袭能力的核心环节。基质金属蛋白酶(MMP)和转化生长因子TGF-β是目前已知的参与EMT的关键蛋白质。MMP是具有降解细胞外基质成分的能力,是目前已知的唯一能降解胶原纤维的酶类,其活性对细胞粘附系统的失活有一定作用。其在肿瘤生长,血管形成及肿瘤转移中发挥作用JGF-β主要通过各整合素信号传导途径促进EMT的发生,促进Smad3分子依赖的细胞转录过程,也可以通过非Smad分子依赖的P38MAP激酶途径及GTP酶介导的信号转导途径促进EMT发生发展,在肿瘤的侵袭和转移过程中,TGF-β促使细胞周期阻滞,加速凋亡,还能诱导维持EMT状态。Cav-1通过脚手架区(CSD区)与TGF-β I受体激酶活性区结合,抑制TGF调节Smad-2的磷酸化及其下游活动,起到激酶抑制剂的作用;CAV基因水平消除MMP2和9的表达与分泌,而且CAV过表达显著降低MMP的分泌。
技术实现思路
本专利技术提供一种用于治疗抑制乳腺肿瘤转移的重组质粒。本专利技术采取的技术方案是:一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述。本专利技术所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD表达序列串联重复3次,该小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD编码核苷酸序列如SEQ ID NO:3所述、氨基酸序列如SEQ ID NO:5所述,在FuGW慢病毒质粒中泛素化启动子下,通过BamH I和Bgl II酶切位点相连。本专利技术所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD编码核苷酸序列如SEQ ID NO:2所述。本专利技术所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD编码氨基酸序列如SEQ ID N0:4所述。本专利技术所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒的构建方法如下: (一)小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD的表达序列片段的设计=WNCBI上获得CAV-1 CSD区的表达序列,将该段序列串联重复三次,在两端引入BamH I和Bgl II同尾酶酶切位点,根据这段序列设计用于搭接PCR的引物:本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所述。

【技术特征摘要】
1.一种用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其特征在于:其核苷酸序列如SEQ ID NO:1所述。2.根据权利要求1所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其特征在于:小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD表达序列串联重复3次,该小窝蛋白脚手架区CAV-1CSD编码核苷酸序列如SEQ ID NO:3所述、氨基酸序列如SEQ ID NO:5所述,在FuGW慢病毒质粒中泛素化启动子下,通过BamH I和Bgl II酶切位点相连。3.根据权利要求1所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其特征在于:小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD编码核苷酸序列如SEQ ID NO:2所述。4.根据权利要求1所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒,其特征在于:小窝蛋白脚手架区CAV-1 CSD编码氨基酸序列如SEQ ID N0:4所述。5.如权利要求1所述的用于抑制乳腺肿瘤上皮间质转化的慢病毒重组质粒的构建方法如下: (一)小窝蛋白脚手架区CAV-1CSD的表达序列片段的设计:从NCBI上获得CAV-1 CSD区的表达序列,将该段序列串联重复三次,在两端引入BamH I和Bgl II同尾酶酶切位点,根据这段序列设计用于搭接PCR的引物: Primerl-Sj:CAAATATTGGTTTT...

【专利技术属性】
技术研发人员:孙巍遇红梅房明丽王丽颖
申请(专利权)人:吉林大学
类型:发明
国别省市:

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