一种苦豆子多糖的超声波提取方法技术

本发明专利技术公开了一种苦豆子多糖的超声波提取方法。其工艺流程包括：苦豆子原料粉碎，加石油醚浸泡脱脂，加乙醇浸泡去除小分子、低聚糖、挥发油等，加水或者缓冲液作溶剂超声波提取，提取液离心，其残渣按同样的超声提取条件重复提取，合并提取液并浓缩，向浓缩液中加入乙醇，静置析出沉淀，沉淀加水复溶，离心得上清液，上清液经真空冷冻干燥，即得苦豆子多糖。与传统热水提取苦豆子多糖技术相比，本发明专利技术所述提取工艺避免了温度过高对苦豆子多糖活性及结构的影响，提高多糖得率和纯度、缩短提取时间，降低提取成本，提高经济效益。

【技术实现步骤摘要】
【专利摘要】本专利技术公开了。其工艺流程包括：苦豆子原料粉碎，加石油醚浸泡脱脂，加乙醇浸泡去除小分子、低聚糖、挥发油等，加水或者缓冲液作溶剂超声波提取，提取液离心，其残渣按同样的超声提取条件重复提取，合并提取液并浓缩，向浓缩液中加入乙醇，静置析出沉淀，沉淀加水复溶，离心得上清液，上清液经真空冷冻干燥，即得苦豆子多糖。与传统热水提取苦豆子多糖技术相比，本专利技术所述提取工艺避免了温度过高对苦豆子多糖活性及结构的影响，提高多糖得率和纯度、缩短提取时间，降低提取成本，提高经济效益。【专利说明】
本专利技术涉及中医药领域，关于中药多糖的提取方法，尤其涉及一种超声波提取多糖的方法。
技术介绍
苦豆子(Sophora alopecuroides L)是豆科槐属多年生草本植物，其根、根莖、全草及种子均可入药。苦豆子不仅是可利用的牧草和优良的固沙植物，还是重要的药用植物，其用途广泛，资源丰富，开发利用价值极高。经《本草纲目》记载及大量文献表明，苦豆子具有抗菌、消炎、平喘止咳、抗癌、增强免疫力等生物活性功能。在临床上苦豆子目前主要用于治疗急性菌痢、内痔、慢性子宫颈炎、滴虫性阴道炎等疾病。苦豆子的化学成分主要是蛋白质、糖类、有机酸、黄酮类、色素和生物碱。目前，国内外对苦豆子的研究主要集中在生物碱方面，对苦豆子多糖成分的研究相对较少。在传统加热或煮沸法提取可溶性多糖的过程中，提取次数、溶剂体积、浸提温度、PH值都对提取效果有影响，且易因电离、水解、氧化和高温造成多糖活性物质的损失，而且提取的周期较长，多糖得率不高。因此，本领域技术人员致力于开发一种苦豆子多糖的提取方法，以简化操作，降低对多糖活性物质的损失，缩短提取周期，提高多糖的得率和纯度。
技术实现思路
有鉴于现有多糖提取技术对多糖活性物质的影响、提取时间长、操作复杂的缺陷，本专利技术所要解决的技术问题是提供一种苦豆子多糖的提取方法，降低提取温度、缩短提取时间、减少对苦豆子多糖结构及理化性质的影响。本专利技术通过以下技术方案解决解决上述技术问题:，包括以下步骤:(I)原料的预处理:选取干燥的苦豆子种子，放入高速粉碎机中粉碎过60~80目筛子，得苦豆子粉，所述苦豆子粉用石油醚浸泡并不断搅拌，抽滤，放入通风厨中使石油醚挥发殆尽后得到脱脂粉，在所述脱脂粉中加入浓度为85%~100% (v/v)乙醇浸泡，抽滤，放入通风厨中使乙醇挥发殆尽后得到苦豆子预处理粉。石油醚浸泡的目的是脱脂，乙醇浸泡的目的是除去小分子、低聚糖、挥发油等物质。(2)超声波提取:向所述苦豆子预处理粉中加水或缓冲液，超声波提取，得到粗提取液，经旋转蒸发浓缩，得到浓缩液。(3)沉淀及冷冻干燥:向所述浓缩液中加入85%~100% (v/v)乙醇，静置过夜析出沉淀，所述沉淀经丙酮洗涤后加水复溶，经真空冷冻干燥，即得苦豆子多糖。 本专利技术提供的苦豆子多糖的超声波提取方法，步骤(2)中还包括将所述粗提取液离心，残渣经超声波处理重复提取I~2次，离心，得到所述粗提取液，合并初次与重复提取获得的所述粗提取液，再进行旋转蒸发浓缩。多次重复提取有利于提高苦豆子多糖的得率。本专利技术提供的苦豆子多糖的超声波提取方法，步骤(3)还包括将所述的水复溶后的溶液在转速7000~15000r/min的条件下离心20~40min，取上清液，以除去多糖中不溶的蛋白质。优选地，步骤(1)中所述石油醚与所述苦豆子粉的质量体积比为3~6:1，所述石油醚每天更换2~4次，所述浸泡时间为2天。优选地，步骤(1)中所述乙醇与所述苦豆子粉的质量体积比为4~6:1，所述乙醇每天更换3~4次，所述浸泡时间为浸泡2天。优选地，步骤(2)中所述苦豆子预处理粉与所述水或者缓冲液的质量体积比为1:30~70，所述缓冲液为中性磷酸盐缓冲液、柠檬酸盐缓冲液或乙酸盐缓冲液中的一种或多种。优选地，步骤⑵中所述的超声提取的温度为35~60°C，超声波功率为200~350W，提取时间为10~40min。更优选地，步骤(2)中所述的超声提取的温度为40~60°C，超声波功率为280~320W，提取时间为25~30min。优选地,步骤(3)中所述乙醇与所述浓缩液的质量体积比为3~5:1。`此外，本专利技术还提供利用上述方法提取制备的苦豆子多糖。超声提取方法中料水比对溶液中多糖扩散有作用；超声功率影响细胞破裂多糖溶出，也影响多糖分子链的裂解；提取温度影响多糖分子的扩散传质运动及其溶出含量，对多糖活性及结构产生作用；超声时间影响细胞壁和细胞内多糖的释放。本专利技术提供的超声波提取苦豆子多糖的方法，利用超声波的空化效应、机械剪切搅拌作用，有效地提高了苦豆子多糖得率和纯度，缩短了提取时间，降低了提取温度，避免了高温对多糖结构及理化性质的影响，操作简便可行，成本节约，具有较高的经济效益。以下将结合附图对本专利技术的技术方案作进一步说明，以充分地了解本专利技术的目的、特征和效果。【专利附图】【附图说明】图1是本专利技术的苦豆子多糖的超声波提取工艺流程图。图2是利用本专利技术的超声波提取方法制备的苦豆子多糖的红外吸收光谱图。图3是利用本专利技术的超声波提取方法制备的苦豆子多糖的紫外吸收光谱图。【具体实施方式】如图1所示，本专利技术涉及的苦豆子多糖的超声波提取方法包括原料筛选，粉碎，加石油醚浸泡脱脂，加乙醇浸泡去除小分子、低聚糖、挥发油等物质，加水或者缓冲液作溶剂超声波提取，提取液离心，其残渣按同样的超声提取条件重复提取，合并提取液并浓缩，向浓缩液中加入乙醇，静置析出沉淀，抽滤并离心，沉淀加水复溶，离心去除蛋白质，将离心获得的上清液真空冷冻干燥的步骤。通过上述方法可以得到较纯的、得率较高的苦豆子多糖。实施例1称取200g干燥的苦豆子种子，粉碎，加入600ml石油醚，不断搅拌，浸泡2天，每天早晚各更换I次石油醚，以达到更好的除去脂肪的效果。随后进行抽滤，并在通风橱中使残留的石油醚挥发殆尽，排除石油醚对后续实验的影响；再向其中加入600ml95%乙醇，浸泡2天，每天更换2次95%乙醇。乙醇浸泡可以除去小分子、低聚糖、挥发油等物质。随后进行抽滤，并在通风橱中使剩余的乙醇挥发，得到预处理苦豆子粉。预处理中石油醚、乙醇的浸泡除去了脂肪及小分子、低聚糖、挥发油等物质，初步排除了后续提取的苦豆子多糖的一些杂质，提高了多糖的纯度。称取40g苦豆子预处理粉，在预处理苦豆子粉中按照质量体积比即料水比(w/v)为1:50加入溶剂去离子水，即加入2000ml的去离子水作为溶剂，在超声功率280W，提取温度50°C的条件下提取30min,将提取液在转速4000r/min下离心20min,其残洛按照同样的超声条件重复提取、离心，合并提取液。对残渣的重复提取有利于提高苦豆子多糖的得率。将提取液在旋转蒸发仪上减压浓缩至体积为1000ml，向浓缩液中加入4000ml95%乙醇静置过夜，析出多糖沉淀。将析出的沉淀抽滤，使得固液分离，将得到的多糖固体加入250ml去离子水复溶，形成溶液，将溶液在转速8000r/min下离心20min，由于多糖固体中含有的蛋白质不会溶解，故离心可达到去除蛋白质的目的；离心后，取上清液进行真空冷冻干燥，即得苦豆子多糖3.40g。实施例2预处理苦豆子粉的制备如实施例1所述。取预处理苦豆子粉20g，加入1000ml的去离子水作为溶剂，在超声功率32本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种苦豆子多糖的超声波提取方法，其特征在于，包括以下步骤：?(1)原料的预处理：选取干燥的苦豆子种子，高速粉碎得到苦豆子粉，所述苦豆子粉用石油醚浸泡并搅拌，除去所述石油醚后得到脱脂粉，在所述脱脂粉中加入浓度为85%～100%（v/v）乙醇浸泡，除去所述乙醇后得到苦豆子预处理粉。?(2)超声波提取：向所述苦豆子预处理粉中加水或缓冲液，超声波提取，得到粗提取液，经旋转蒸发浓缩，得到浓缩液。?(3)沉淀及冷冻干燥：向所述浓缩液中加入85%～100%（v/v）乙醇，静置过夜析出沉淀，所述沉淀经丙酮洗涤后加水复溶，经真空冷冻干燥，即得苦豆子多糖。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：吴艳，曹楠楠，艾连中，
申请(专利权)人：上海交通大学，
类型：发明
国别省市：