抗ROR1抗体及其用途制造技术

本发明专利技术涉及通过特异性结合（ROR1）用于诱导细胞死亡的抗体、其结构域或编码（ROR1）的核苷酸分子。本发明专利技术也提供了本发明专利技术的抗体所涉及的方法和用途。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】【专利摘要】本专利技术涉及通过特异性结合（ROR1）用于诱导细胞死亡的抗体、其结构域或编码（ROR1）的核苷酸分子。本专利技术也提供了本专利技术的抗体所涉及的方法和用途。【专利说明】抗R0R1抗体及其用途
本专利技术涉及通过特异性结合RORl来抑制RORl并且能够诱导细胞死亡的抗体、其结构域或编码RORl的核苷酸分子。导致产生本专利技术的工作已经得到来自欧盟的第七框架计划(EuropeanCommunity’s Seventh Framework Programme) FP7/2007-2013/ 赠款协议号HEALTH-F5-2008-200755 之下的基金支持。
技术介绍
慢性淋巴细胞白血病(CLL)是白血细胞癌症，其特点是B淋巴细胞(B细胞)异常肿瘤性增殖。CLL的B细胞在其活化和成熟阶段不同于正常B细胞，并且特别是，CLL的B细胞衍生自具有不同免疫球蛋白重链可变(IgVH)基因突变的经历过抗原的(antigenexperienced,抗原刺激的)B细胞(Chiorazzi N et al.,N Engl J Med2005 ;352:804_15)。与具有未突变基因的患者相比，具有突变的IgVH基因的CLL患者具有较好的预后(DamleRN et al.，Bloodl999 ;94:1840-7 ；Hamblin TJ et al.，Bloodl999 ;94:1848-54)。全基因组表达谱研究已经部分揭示了在突变的和未突变的白血病B细胞中特异的但一般是重叠的基因表达谱，并提出了共同的表型(Klein U et al.，J Exp Med2001 ；194:1625-38 ；Rosenwald A et al., J Exp Med2001 ;194:1639-47)。基因表达谱研究已经表明，在CLL细胞中孤儿受体酪氨酸激酶(RTK) RORl增加了43.8倍(Klein U et al.，J Exp Med2001 ;194:1625-38λΚοΓ? 是与肌肉特异性激酶(MUSK)和Trk神经营养因子受体相关的孤儿受体RTK家族成员(Glass DJ, et al., Celll996 ；85:513-23 ；Masiakowski P et al., J Biol Cheml992 ；267:26181-90 ；Valenzuela DM etal., Neuronl995 ; 15:573-84)。Ror受体是参与信号转导、细胞-细胞相互作用、调节细胞增殖、分化、细胞代谢和生存的细胞表面受体(Masiakowski P et al.，Biol Cheml992 ；267:26181-90 ；Yoda A etal.,J Recept Signal Transduct Res2003 ;23:1-15)。在不同物种例如人类、小鼠、果蚬和秀丽隐杆线虫(C.elegans)之间,它们在进化上是高度保守的。人类RORl基因具有含有预测的937个氨基酸序列和105kDa蛋白尺寸的2814bp的编码区，包括Ig样(免疫球蛋白样)结构域、富半胱氨酸结构域、三环结构(Kringle)域、酪氨酸激酶结构域和富脯氨酸结构域(图DCYoda A et al.,J Recept Signal TransductRes2003 ;23:1_15)。RORl位于染色体区域1ρ31.3上(http://www.ensembl.0rg),这是在血液系统恶性肿瘤中并不常见的染色体畸变的区(图2)。人类RORl表达于心脏、肺和肾脏内，但很少表达于胎盘、胰腺和骨骼肌内(Reddy UR et al.,0ncogenel996 ;3:1555-9)。最初从神经母细胞瘤细胞系中克隆了 RO·Rl (Masiakowski P et al.，J Biol Cheml992 ;267:26181-90)，并且随后从胎儿大脑文库分离出了缺乏完整的胞外结构域但是包含跨膜结构域的较短形式。在胎儿和成人中枢神经系统中、在人类白血病、淋巴瘤细胞系中，以及在衍生自神经外胚层的各种人类癌症中已经报道了截短的Rorl(t-Rorl)基因(Reddy URet al.,0ncogenel996 ；13:1555-9)。同样已经描述了包含内含子7的短片段的来自外显子1_7的较短转录本具有393个氨基酸的预测长度和44kDa的分子量(Ensembl ID ；ENSG00000185483)?已经针对CLL(Baskar et al(2008)Clin Cancer Res, 14,ρ396-404 ；Choudhury etal (2010)Β.J.Haem,151,p327_335 ;和 Hudecek et al (2010)Blood,online publicationDO1:10.1182/blood-2010-05-283309)；MCL (Hudecek (2010))；B-ALL (Hudecek (2010)和Shabani et al (2008) Leuk&Lymph,49pl360_1367);其它白血病和淋巴瘤(Fakuda et al(2008)PNAS,105,p3047_3052 ;和Barna et al(2010)Hematol Oncol,online publicationD01:10-1002/hon.948)和固态癌(肾和结肠)(Katoh&Kotoh (2005)0ncol R印 14，pl381_4)描述了 R0R-1在癌症细胞中的表达。
技术实现思路
在本专利技术的第一个方面中，提供了能够在表达RORl的细胞中诱导细胞死亡的抗RORl抗体。这种抗RORl抗体可以直接地或通过不同效应器机制，如,抗体依赖性细胞毒性(ADCC)、补体依赖性细胞毒性(CDC)或抗体依赖性细胞吞噬作用(ADCP)诱导细胞死亡。抗体可以用于降低RORl的数量或活动。例如，抗体可以通过结合至RORl或编码RORl的核苷酸序列而直接发挥作用。抗体可以可替代地通过防止RORl和通常与之发生相互作用的分子相互作用，例如通过阻断受体(与RORl结合或与RORl相互作用的螯合分子)，阻止RORl或其结合子插入膜，如细胞膜来发挥作用。优选地，抗体特异性结合至RORl的胞外域、RORl的胞内域或结合至编码RORl的核苷酸序列。对于抗体，我们是指完整抗体和其抗原结合片段。这种片段如下进行定义。抗体包含通过二硫键连接在一起的MjO, 000-70, 000的两个相同多肽(称为“重链”)，其中每个都连接至凡25，000的一对相同多肽之一(称为“轻链”)。在不同抗体分子的重链的单个N-端之间和不同抗体分子的单个轻链之间存在相当大的序列可变性，并且这些区域因此被称为“可变区”。相反，在不同抗体分子的重链的单个C-端之间和不同抗体分子的单个轻链之间具有相当大的序列相似性，并且这些区域因此被称为“恒定区”。在一般情况下，获自人类的抗体分子涉及IgG、IgM、IgA、IgE和IgD的任何种类，由分子中存在的重链的性质而相互不同。某些种类也具有子类，如IgG1UgG2、等。此外，在人类中，轻链可以是K链或λ链。本文参考的抗体包括参考人类抗体物种的所本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：英格丽德·泰格，
申请(专利权)人：凯塞若公司，
类型：
国别省市：