基于DNA自组装的非酶离子检测方法技术

技术编号:9166685 阅读:129 留言:0更新日期:2013-09-19 15:37
本发明专利技术公开了基于DNA自组装的非酶离子检测方法,使用捕获探针捕获被离子特异性酶切反应中生成的单链核酸,之后与自组装探针反应生成长DNA双链,通过确定DNA双链的量来确定离子浓度。具有操作简单,检出限低,线性范围大,特异性好,反应迅速,检测结果准确可靠的优点。

【技术实现步骤摘要】

【技术保护点】
基于DNA自组装的非酶离子检测的方法,包括如下步骤:1)??设计捕获探针CP、自组装探针SP1和SP2,CP的一端连接有分离标记,另一端与底物DNA链的一端MP互补;探针SP1的5’端和3’端可分别和SP2的3’端和5’端互补,自组装形成双链DNA,SP1和SP2的5’端和3’端中至少部分序列、探针CP和MP共互补形成双链复合体;2)??将底物DNA链、待测离子依赖型DNA酶和样本加入反应液中,混匀,反应完全;3)??在上述反应液中加入CP,充分反应使其与底物DNA链被切断而形成的MP链杂交,得到CP?MP杂交链;4)??将CP?MP杂交链分离,清洗去除其他游离DNA链;5)??将纯化的CP?MP杂交链、SP1、SP2加入反应液,反应完全以形成自组装双链,得到CP?MP?SP1?SP2双链复合体;6)??将CP?MP?SP1?SP2双链复合体,清洗去除其他游离DNA链;7)??通过检测清洗后的DNA链中双链DNA的量,确定待测离子的量。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员:曾令文葛晨晨陈俊华
申请(专利权)人:中国科学院广州生物医药与健康研究院
类型:发明
国别省市:

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