肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器，培养容器(1)内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层(2)，培养容器(1)上部有器盖(3)。通过设置在培养基瓶内壁设置优化涂层，可以节约培养基的使用量，以促进培养基保持活性，可防止培养基中多余水分和菌液对培养的干扰，使培养结果的读值更加可靠，且生物安全性优异。降低了实验成本且简化了操作步骤；操作方便、省时省力、能够快速灭菌、利于生物制品的生产，便于监控检测，便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响，显著提高研究工作效率。（*该技术在2022年保护过期，可自由使用*）
【技术实现步骤摘要】
本技术涉及国际专利分类C12N微生物或酶繁殖变异或遗传工程
，尤其是肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器。
技术介绍
目前，肿瘤干细胞的定义之一是:肿瘤中具有自我更新能力并能产生异质性肿瘤细胞的细胞。传统观念认为，肿瘤是由体细胞突变而成，每个肿瘤细胞都可以无限制地生长。但这无法解释肿瘤细胞似乎具有无限的生命力以及并非所有肿瘤细胞都能无限制生长的现象。肿瘤细胞生长、转移和复发的特点与干细胞的基本特性十分相似，因此，有学者提出肿瘤干细胞的理论。这一理论为重新认识肿瘤的起源和本质，以及临床肿瘤治疗提供了新的方向和视觉角度。肿瘤干细胞对肿瘤的存活、增殖、转移及复发有着重要作用。从本质上讲，肿瘤干细胞通过自我更新和无限增值维持着肿瘤细胞群的生命力；肿瘤干细胞的运动和迁徙能力又使肿瘤细胞的转移成为可能；肿瘤干细胞可以长时间处于休眠状态并具有多种耐药分子而对杀伤肿瘤细胞的外界理化因素不敏感，因此肿瘤往往在常规肿瘤治疗方法消灭大部分普通肿瘤细胞后一段时间复发。培养即将取得的组织细胞接入培养瓶或培养板中的过程称为培养。如系组织块培养，则直接将组织块接入培养器皿底部，几个小时后组织块可贴牢在底部，再加入培养基。如系细胞培养，一般应在接入培养器皿之前进行细胞计数，按要求以一定的量，以每毫升细胞数表示，接入培养器皿并直接加入培养基。细胞进入培养器皿后，立即放入培养箱中，使细胞尽早进入生长状态。正在培养中的细胞应每隔一定时间观察一次，观察的内容包括细胞是否生长良好，形态是否正常，有无污染，培养基的PH是否太酸或太碱，由酚红指示剂指示，此外对培养温度和CO2浓度也要定时检查。一般原代培养进入培养后有一段潜伏期，数小时到数十天不等，在潜伏期细胞一般不分裂，但可贴壁和游走。过了潜伏期后细胞进入旺盛的分裂生长期。细胞长满瓶底后要进行传代培养，将一瓶中的细胞消化悬浮后分至两到三瓶继续培养。每传代一次称为“一代”。二倍体细胞一般只能传几十代，而转化细胞系或细胞株则可无限地传代下去。转化细胞可能具有恶性性质，也可能仅有不死性而无恶性。培养正在生长中的细胞是进行各种生物医学实验的良好材料。在肿瘤干细胞研究中应用软性接触镜材料是新的发展，而软性接触镜材料中，应用最广泛的是由甲基丙烯酸-2-羟基乙酯HEMA单体为主组成的共聚物水凝胶。近年来的研究进行综述公开了相应的知识，总结了 HEMA类接触镜的发展和分类，HEMA单体的共聚、材料性能及其在药物缓释中的应用，尤其是新近公开的文献认为poly-hema聚甲基丙烯酸羟乙基酯应用特性更为突出。鉴于此，建立一种能够快速有效的、且能够降低成本的检测方法十分必要。中国专利申请200410084407涉及细胞的分离培养方法及其应用，具体涉及一种脂肪间充质干细胞的分离培养方法及其应用。它包括取人体脂肪组织，用胶原酶消化，经梯度离心、过滤，随后在体外培养体系中进行扩增培养，其中所述体外培养体系含有D M EM / F 12、E F G和 F C S。中国专利申请201120530645 —种细菌培养瓶，包括瓶身、设于瓶身顶端的瓶口和设于瓶身下端的瓶底、以及瓶盖，所述瓶身的横截面为矩形，所述瓶底为斜面，所述瓶底斜面与所述瓶身中的两个相对的侧面相垂直。
技术实现思路
本技术的专利技术目的在于提供一种肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器。实现本技术的专利技术目的措施在于:培养容器内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层，培养容器上部有器盖。本技术的优点在于，通过设置在培养基瓶内壁设置优化涂层，可以节约培养基的使用量，以促进培养基保持活性，可防止培养基中多余水分和菌液对培养的干扰，使培养结果的读值更加可靠，且生物安全性优异。降低了实验成本且简化了操作步骤；操作方便、省时省力、能够快速灭菌、利于生物制品的生产，便于监控检测，便于研究细胞代谢、物理、化学、生物因素的影响，显著提高研究工作效率。附图说明图1是本技术中一种的培养皿容器结构示意图图2是本技术中的另一种的培养板容器结构示意图附图标记包括:培养容器1，底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层2，器盖3，板孔4，板座5。具体实施方式以下通过实施例进一步说明。培养容器I内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层2，培养容器I上部有器盖3。前述中，培养容器I为培养皿，该培养皿培养容器I内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层2 ;另外，培养容器I上部有器盖3，该器盖3开口与培养容器I培养皿上部配八口 ο前述中，培养容器I为培养板，培养容器I上布均勻分布有板孔4 ;另外，培养容器I底部安装板座5 ;同时，培养容器I上部器盖3，该器盖3开口与培养容器I培养板上部配入口 ο实施例1:如附图1所示，培养容器I为培养皿。器盖3与培养容器I培养皿横截面均呈圆形。培养容器I为用于盛载液体培养液或固体琼脂培养液进行细胞培养的玻璃或塑料圆形器皿。培养容器I一般由玻璃或者塑料作成。前述中，在培养容器I为培养皿应用于传代培养时:I).培养容器I培养皿中的细胞覆盖率达到80%_90%时要传代。2).把原有培养基吸掉。3).加适当的胰蛋白酶，能覆盖细胞就行，消化1-2分钟。4).细胞都变圆后加如入等体积的含血清的培养基终止消化。5).用移液枪吹打细胞，把细胞都悬浮起来。6).把细胞吸到15ml的离心管中，1000转离心5分钟。7).倒掉上清液，加l_2ml培养基，把细胞都吹起来。8).根据细胞种类把细胞传到几个培养容器I培养皿中。一般情况下，癌细胞分5个，正常细胞传3个，然后继续培养。前述中，将SW480细胞培养于培养容器I为培养皿底部的DMEM培养基内，添加10%胎牛血清，置于37°C、含5%C02的恒温培养箱内培养，每天更换一次培养液；待细胞培养至约85%贴壁时，更换培养液，继续在相同条件下培养24小时；选择状态良好，95%汇合且位于指数生长期的细胞备用。加入0.25%胰酶-EDTA消化贴壁细胞；4°C下1500rpm离心5min收集细胞沉淀,用TSC Medium,即DMEM无血清培养基,添加10ng/ml EGF+10ng/mlbFGF+10ng/mlNoggin + 1000U/ml insulin,重悬细胞沉淀，然后放入polyhema处理的培养瓶中进行克隆形成培养。实施例2:如附图2所示，培养容器I为培养板，培养容器I上布均匀分布有板孔4 ;板孔4为平底或圆底，即U型和V型；板孔4孔数为6、12、24、48或96孔；而且，根据材质的不同，培养容器I为培养板为Terasaki板和普通细胞培养板，培养板培养容器I上部加盖方形器盖3。在以上实施例中，未及叙述的涉及实施的其他必要技术等采用现有技术，不再依次列举详述。权利要求1.肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器，其特征是:培养容器(I)内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层(2)，培养容器(I)上部有器盖(3)。2.如权利要求1所述的肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器，其特征在于，培养容器(I)为培养皿，该培养皿培养容器(I)内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层⑵。3.如权利要求1所述的肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器，其特征在于，培养容器(I)为培养板，培养容器(I)上布均勻分布有板本文档来自技高网...
【技术保护点】
肿瘤干细胞聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理培养容器，其特征是：培养容器(1)内具有底部聚甲基丙烯酸羟乙基酯处理涂层(2)，培养容器(1)上部有器盖(3)。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：黄盼华，
申请(专利权)人：上海基赛生物医药科技有限公司，
类型：实用新型
国别省市：
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