黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用技术

黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用，将黑枸杞进一步真空干燥，粉碎，加入95%乙醇回流2次，每次1小时；过滤，滤液于75℃旋蒸至稠，转移至蒸发皿中，水浴蒸干，于70℃真空干燥2小时，得干浸膏；加甲醇定容，过0.45μm有机系微孔滤膜；提取原花青素。采用科学合理的提取方法进一步揭示开发黑果枸杞果提取物具有降血糖、降血脂和降血压活性的新用途，为在治疗或预防糖尿病、高血脂和高血压的产品中有效充分应用提供新的技术措施。不但缩短了提取分离的时间，减少了工艺过程中的能耗，有效降低了生产成本，而且所得产品纯度高、性能稳定，提取物杂质少，质量优良，可应用具有抗氧化作用的医药保健品原料。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及国际专利分类A61K36/815枸杞属或C07D杂环化合物的处理
，尤其是黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用。
技术介绍
现有技术中，枸杞是重要的经济植物及药食兼用的佳品，属于茄科，枸杞属落叶灌木。这一属有80多种，在我国分布的有宁夏枸杞、枸杞、黑果枸杞、新疆枸杞、截萼枸杞、柱筒枸杞、云南枸杞7种枸杞。其中，传统药用价值的有3种,分别是黄果枸杞或宁夏枸杞变种、北方枸杞或枸杞变种、红枝枸杞或新疆枸杞变种3个变种。另外，新近引入药用的黑果枸杞。黑枸杞是野生爺科枸杞属植物,是黑果枸杞Lycium ruthenicumMurr的干燥果实，维吾尔文称阿勒卡特。黑枸杞属棘刺落叶小灌木，株高20-50厘米，是喜光树种，全光照条件下发育健壮，在庇荫条件下生长细弱，花果极少，适应性·很强，在盐碱荒地、盐化沙地、盐湖岸边、渠道两旁、河滩等各种盐溃化土壤中生长良好，能耐38.5°C的高温，耐寒性也很强，在-25.6°C低温条件下无冻害，在荒漠地仍能生长耐干旱，黑果枸杞是我国西北部分地区一种特有的野生植物资源，其浆果球形，成熟后的紫黑色，无毒有甜味。已知其药性与宁夏枸杞有相似之处，具有明目益肝，抗疲劳、美容、抑制肿瘤的作用。采用原子吸收法测定黑果枸杞中钙、镁、铜、锌、锰、铁、铅、镍、镉、钴、铬、钾、钠等元素的含量，结果表明:黑果枸杞中钠含量与其相当，但钙、镁、铜、锌、铁等元素的含量远高于宁夏枸杞中相应各元素的平均含量，钾、锰含量远低于其平均值，钴含量远高于绿叶蔬菜的含量，铬含量较牛奶中含量低，镍含量比谷物、腌肉、蔬菜中的高，尤其是，黑枸杞中铅、镉含量较一般植物中的0.5 3.0 μ g/g含量低得多。黑枸杞是天然补钴剂，钴对人体具有低毒和参与维生素B12组成和刺激造血的作用，黑果枸杞中钴的含量，远高于绿叶蔬菜的干重含量0.2 0.6ppm，但该浓度范围尚不会对人体构成毒害威胁，黑果枸杞具有作为单纯意义的补钴剂药物的作用。黑枸杞是天补镍剂铬、镍也都是人体所，必需的微量元素，但含量较高时会产生中毒现象，铬与人体中糖的代谢，脂质的代谢，蛋白质的合成，核酸代谢等有密切的关系。黑枸杞中铬的含量比正常牛奶中含量低(5 15ug/ml)，不会对人体产生中毒现象。镍在人体作为生物配体辅因子，促进肠内三价铁的吸收，黑果枸杞中镍的含量比谷物腌肉蔬菜(0.1 0.3 μ g/g)中的要高，但该浓度范围也不会对人体构成毒害威胁，因此黑果枸杞又具有作为单纯意义的补镍剂药物作用。黑枸杞其成熟浆果中富含紫红色色素，不仅可以作为天然食用色素使用，而且具有一定的生物活性，属于典型的天然花色苷类植物色素资源，具有优异的抗氧化、调血脂作用，同时，黑果枸杞果实多糖也具有一定的抗疲劳、降血糖的生物功效。黑果枸杞鲜果资源量丰富。同时，黑果枸杞测定rDNA-1TS全序列，已在Genbank注册，序列号为AY880681，从分子水平为该植物的鉴定提供了 DNA指纹图谱依据。传统医学关于黑枸杞的功效论述黑枸杞能滋补肝肾、益精明目、适用于腰膝酸软、头晕目眩、两眼昏花等症状，藏医药经典《四部医典》、《晶珠本草》等记载黑果枸杞主治心热病、心脏病、月经不调、停经等。《维吾尔药志》记载维吾尔医常用黑果枸杞果实及根皮治疗尿道结石、癣疥、齿龈出血等症，民间作滋补强壮以及降压药。现代科学研究证实了上述说法，并且认为黑果枸杞可以降低胆固醇，兴奋大脑神经，增强免疫功能，防治癌症，抗衰老和美容，黑果枸杞提取物可促进细胞免疫功能，增强淋巴细胞增殖及肿瘤坏死因子的生成，对白细胞介素II有双向调解作用，能缓解糖尿病患者多饮多食、体重减轻症。黑果枸杞内含的有效提取物知识得到少量公开，对柴达木野生黑果枸杞果实中的主要营养成分进行了分析，结果表明，黑果枸杞鲜果含水质量分数85.03%，其干果蛋白质量分数10.61 %，脂肪6.66 %，多糖4.28 %，总黄酮质量分数4.29 %，原花青素3.42 %，果实含有Y-VE及δ-VE，每百克分别为0.0075和0.016mg，从黑果枸杞籽中提取的构祀籽油维生素E含量较果实要高的多，籽油富含a-VE、γ-VE及δ-VE，每百克分别为0.1906mg、1.8939mg和0.045mg，黑果枸杞中氨基酸种类相对较丰富，亮氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、异亮氨酸等含量相对较高，黑果枸杞中矿质元素丰富，其中钾的含量最高，且远高于钠的含量，属于高钾低钠的食品。为探讨该资源色素提取和精制技术条件，公开的文章中列举了部分提取方法。比如，成熟浆果中富含紫红色色素，属于典型的天然花色苷类植物色素资源。采用单因素比较和正交实验法，得到黑果枸杞色素的最佳提取条件为:以PH3.0的80%乙醇作浸提剂，提取温度50°C，提取时间3h，固液配比1: 40;用X-5大孔吸附树脂对色素进行精制，以树脂柱径高比1: 15、流速3mL/min、pH3.0、色素液浓度lg/L为最佳吸附条件，色素吸附量可达0.03715g/mL湿树脂体积；而以95% 7醇做洗脱液，在pH2.0、流速5mL/min、3倍于柱床体积的洗脱液条件下解吸附效果最佳，色素回收率达到97.78% ;制取的色素产品外观呈紫红色，色价为36.7。该方法简单易行，具有很好的重复性，色素产率达到9.07%。并且进一步证明，在上述技术条件下制取 的色素理化性质研究表明，黑果枸杞色素Pigment ofLyciumruthenicum Murr.,简称:PLR属花色苷类,为水溶性色素,在酸性条件下,具有一定的耐热性能，但耐氧化性能不佳；对室内、外自然光与紫外光的耐受性较好；对还原剂有一定的耐受性；适用PH范围广，尤以酸性状态色泽最佳；蔗糖和防腐剂以及金属离子Zn2+、Mg2+、Ca2+、K+、Na+对色素稳定性无不良影响，而Fe2+、Fe3+、Cu2+、A13+、Pb2+、Sn2+则随离子浓度增加而对色素的不利影响加大。当向色素液中加入稳定剂(0.04%维生素則+0.01(%单宁酸+0.01%半胱氨酸)后，即可提高色素耐热性。毒理学实验证明，PLR对KM小鼠的LD50大于24g/kg BW，说明该受试物属于无毒级物质。遗传毒性试验=Ames试验、骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸变试验的结果皆为阴性，未显示出致突变性。而30天喂养试验表明，PLR在2.4g/kg、l.2g/kg、0.24g/kg BW剂量时，对动物的身体、脏器的生长发育以及血液生化指标等均无明显不良影响。而且，色素中的有害微量元素含量均低于国家卫生标准。由此说明黑果枸杞色素具有食用安全性。在药理学研究中体外抗氧化实验表明，PLR具有一定的抗氧化能力，表现出很强的DPPH自由基清除活性，IC50达到0.164mg/mL ;能显著的抑制小鼠红细胞溶血，IC50为0.112mg/mL ;能增强小鼠血清抗活性氧能力，抑制小鼠肝组织脂质过氧化产物MDA生成和小鼠肝线粒体肿胀度，并显示出一定的量效关系。高脂血症预防实验显示，PLR可降低小鼠血清总TC和TG、LDL-C的含量，升高血清和肝组织T-AOC、GSH-PX活性，显著降低肝组织MDA含量(P < 0.05)，说明黑果枸杞色素对高脂血症小鼠血脂水平升高和脂质过氧化均有一定抑制作用。另外，公开的黑果枸本文档来自技高网...

【技术保护点】
黑枸杞有效提取物、提取方法以及提取物应用，其特征是：将黑枸杞进一步真空干燥，粉碎，加入含1％Hcl的95％乙醇，回流2次，每次1小时；过滤，滤液于75℃旋蒸至稠，转移至蒸发皿中，水浴蒸干，于70℃真空干燥2小时，得干浸膏；加甲醇定容，过0.45um有机系微孔滤膜；提取原花青素；或者，将黑枸杞进一步真空干燥，粉碎，加入含95％乙醇，回流2次，每次1小时；过滤，滤液于75℃旋蒸至稠，转移至蒸发皿中，水浴蒸干，于70℃真空干燥2小时，得干浸膏；加甲醇定容，过0.45um有机系微孔滤膜；提取原花青素。

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：黄盼华，
申请(专利权)人：上海基赛生物医药科技有限公司，
类型：发明
国别省市：