本发明专利技术公开了一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，包括以下步骤：用50%甲醇提取红豆杉枝叶，充分提取出10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ，提取液用大孔吸附树脂吸附，先用30%乙醇进行淋洗除去杂质，再用50%乙醇洗脱得到目标产物，浓缩后得到富集10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ的产物。采用本发明专利技术技术方案，所用原料为可再生的红豆杉枝叶，充分利用了红豆杉资源，既做到了不破坏生态资源，又能高效提取到红豆杉中的10-去乙酰基巴卡亭Ⅲ，而且该方法用大孔树脂吸附，操作简单易行，减少了有机溶剂的使用量，降低了成本，有利于大规模工业生产。?
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种红豆杉植物成分的提取方法，具体的涉及一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭III的方法。
技术介绍
10-去乙酰基巴卡亭IIK 10-DAB III)是半合成抗癌药物紫杉醇(Taxol)和多西紫杉醇(docetaxel)的前体原料。紫杉醇最早从太平洋红豆杉树皮中提取出来的一种天然抗癌药物，多西紫杉醇是人工合成的新化合物。紫杉醇或多西紫杉醇能与肿瘤微管蛋白结合，并促进其聚合、抑制癌细胞有丝分裂，阻止癌细胞的增殖，它们有较广的抗癌谱，对顺钼、多柔比星等耐药肿瘤细胞株有效，临床上已用于肺癌、乳腺癌、头颈癌卵巢癌的治疗，其疗效好，副作用小。近年来研究表明，紫杉醇或多西紫杉醇对治疗其他疾病也有一定的潜力，如恶性黑色素瘤、类风湿性关节炎和早老性痴呆。紫杉醇被认为是迄今人类发现的疗效最好的抗癌药，随着紫杉醇和多西紫杉醇在临床上的应用，其原料得需求量也日益增加，野生红豆杉资源遭到了毁灭性的破坏，人工种植的红豆杉虽然成为解决紫杉醇原料短缺的重要途径，但是采用传统的方法，从红豆杉树皮中提取紫杉醇，资源耗费太大，而且人工种植周期长，仍然不能解决紫杉醇的原料问题。但是在许多红豆杉属的植物中，存在许多含量比紫杉醇高的紫衫烷类物质，它们结构相似，可以通过生物或者化学转化的手段转变成紫杉醇与多西紫杉醇，如10-去乙酰基巴卡亭III。10-去乙酰基巴卡亭III存在于多种紫衫属植物中，含量约为0.0052%-0.1185%，在传统的提取紫杉醇的生产工艺中常被当做废物丢弃掉，既浪费资源又污染环境。通过研究可以利用10-去乙酰 基巴卡亭III半合成紫杉醇与多西紫杉醇，因此寻找一种简便快捷，成本低的从红豆杉中富集10-去乙酰基巴卡亭III的方法，是世界范围内的一个研究热点。中国专利公开号CN 1660827A公开了一种提取10-去乙酰基巴卡亭III的方法，利用大孔树脂S-8、AB-8、X-5、D4020、NKA-9或D3520对10-去乙酰基巴卡亭III进行吸附。中国专利公开号CN 101230053A公开，利用D101-1和DlOl型号的大孔树脂对10-去乙酰基巴卡亭III进行吸附。中国专利公开号CN101235022A公开，利用AB-8型号大孔吸附树脂对10-去乙酰基巴卡亭III进行吸附。我们通过大量实验，对各种树脂进行筛选，发现MW-1树脂比以上所提到的树脂对10-去乙酰基巴卡亭III的吸附效果更好，增加了 10-去乙酰基巴卡亭III得提取效率，节约成本耗能较少，可连续大规模进行10-去乙酰基巴卡亭III提取生产。
技术实现思路
为克服现有技术中的不足，本专利技术提供一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭III的方法。为实现上述技术目的，达到上述技术效果，本专利技术通过以下技术方案实现: 一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭III的方法，包括以下步骤:经干燥粉碎后的红豆杉枝叶，于50°C下用50%甲醇提取4次各2 h，浓缩液的滤液经过MW-1树脂动态吸附，用30%乙醇进行淋洗除去杂质，再用50%乙醇洗脱得到目标产物，从而达到对10-去乙酰基巴卡亭III的初步富集。进一步的，所述10-去乙酰基巴卡亭III为中等极性物质，通过于50°C下用50%甲醇提取4次各2 h，可以将红豆杉中所述10-去乙酰基巴卡亭III充分提出，而将其他极性的紫衫烷类物质留在植物固形物中，可作为后期提取紫杉醇等得原料，通过重复多次提取，使得提取溶剂与植物细胞充分的接触，使所述10-去乙酰基巴卡亭III迅速彻底的转移至提取溶剂中，使效率提闻。进一步的，所用大孔树脂为MW-1型号大孔树脂，所述树脂对10-去乙酰基巴卡亭III具有特异性吸附，上样流速I mL/min，温度为35°C，采用梯度洗脱的方法:3 BV的30%乙醇洗脱出去极性大的杂质，然后用9 BV 50%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，经过富集后所述10-去乙酰基巴卡亭III的含量可以提高8.76倍以上。进一步的，所用工艺用于红豆杉枝叶，包括欧洲红豆杉、南方红豆杉、中国红豆杉、东北红豆杉、西藏红豆杉或曼地亚红豆。与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果: 本专利技术以红豆杉可再生枝叶为原料，不破坏植物资源，实现了对红豆杉资源的高效充分的利用；采用50%乙醇多次对植物原料的提取，使原料中的10-去乙酰基巴卡亭III被充分提取，回收率高；采用的MW-1型号大孔树脂富集方法，比以往专利中的树脂吸附效果好，可以充分对植物资源中的10-去乙酰基巴卡亭III进行特异性吸附，可以提高效率，更有效的提高洗脱馏分中10-去乙酰基巴卡亭III的含量；优化了洗脱程序和洗溶液，可以使用相对较简单的方法和相对较低浓度的洗脱溶液达到理想的分离和富集效果，并且重复性好，简单易行，可以实现大规模的工厂化生产。上述说明仅是本专利技术技术方案的概述，为了能够更清楚了解本专利技术的技术手段，并可依照说明书的内容予以实施，以下以本专利技术的较佳实施例并配合附图详细说明如后。本专利技术的具体实施方式由以下实施例及其附图详细给出。附图说明图1为在检测波长为228nm下用20%乙醇洗脱时的谱 图2为在检测波长为228nm下用30%乙醇洗脱时的谱 图3为在检测波长为228nm下用40%乙醇洗脱时的谱 图4为在检测波长为228nm下用50%乙醇洗脱时的谱 图5为在检测波长为228nm下用60%乙醇洗脱时的谱 图6为在检测波长为228nm下用70%乙醇洗脱时的谱 图7为在检测波长为228nm下用80%乙醇洗脱时的谱 图8为在检测波长为228nm下用90%乙醇洗脱时的谱 图9为在检测波长为228nm下用100%乙醇洗脱时的谱图。具体实施例方式下面将参考附 图并结合实施例，来详细说明本专利技术。一种从红豆杉枝叶初分离10-去乙酰基巴卡亭III的方法，包括以下步骤: 经干燥粉碎后的红豆杉枝叶，于50°c下用50%甲醇提取4次各2 h，浓缩液的滤液经过MW-1树脂动态吸附，用30%乙醇进行淋洗除去杂质，再用50%乙醇洗脱得到目标产物，从而达到对10-去乙酰基巴卡亭III的初步富集。进一步的，所述10-去乙酰基巴卡亭III为中等极性物质，通过于50°C下用50%甲醇提取4次各2 h，可以将红豆杉中所述10-去乙酰基巴卡亭III充分提出，而将其他极性的紫衫烷类物质留在植物固形物中，可作为后期提取紫杉醇等得原料，通过重复多次提取，使得提取溶剂与植物细胞充分的接触，使所述10-去乙酰基巴卡亭III迅速彻底的转移至提取溶剂中，使效率提闻。进一步的，所用大孔树脂为MW-1型号大孔树脂，所述树脂对10-去乙酰基巴卡亭III具有特异性吸附，上样流速I mL/min，温度为35°C，采用梯度洗脱的方法:3 BV的30%乙醇洗脱出去极性大的杂质，然后用9 BV 50%乙醇洗脱，收集洗脱液，浓缩至干，经过富集后所述10-去乙酰基巴卡亭III的含量可以提高8.76倍以上。进一步的，所用工艺用于红豆杉枝叶，包括欧洲红豆杉、南方红豆杉、中国红豆杉、东北红豆杉、西藏红豆杉或曼地亚红豆。试验用红豆杉枝叶提取液的制备:采集红豆杉枝叶干燥粉碎后，称取15kg，加入75 L 50%甲醇水溶液，50°C下提取2小时，然后重复3次，合并浓缩提取液并且过滤。用HPLC检测上述滤液中1本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种从红豆杉枝叶初分离10?去乙酰基巴卡亭Ⅲ的方法，包括以下步骤：经干燥粉碎后的红豆杉枝叶，于50℃下用50%甲醇提取4次各2?h，浓缩液的滤液经过MW?1?树脂动态吸附，用30%乙醇进行淋洗除去杂质，再用50%乙醇洗脱得到目标产物，从而达到对10?去乙酰基巴卡亭Ⅲ的初步富集。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：李贺然，史志冉，李永霞，王炳义，杜志红，富雪洋，胡文，刘顺，郝杰，
申请(专利权)人：苏州大学，
类型：发明
国别省市：
还没有人留言评论。发表了对其他浏览者有用的留言会获得科技券。