高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统及分离方法技术方案

本发明专利技术属于蛋白质组学技术领域，具体为高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统，及运用该系统的分离方法。本发明专利技术仅需要一台多元液相泵、一个十通阀和两个六通阀用于进行连接和在线两维切换，提高了自动化程度和仪器的集成度。蛋白质样品经过第一维IE分离之后的馏分直接通过十通阀被依次切换转移到多通道的第二维常规反相柱柱头上进行富集，反相色谱柱直接对其在线脱盐和梯度洗脱，经过两维常规色谱分离，高丰度蛋白质可以在两维色谱图上得到精确定位，从而达到准确除去的目的。本发明专利技术方法可完成大体积进样，浓缩除盐、阵列式分离及高丰度蛋白质的定位与去除，十分适合蛋白质组学研究所需的高丰度蛋白质定位去除及高通量分析。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于蛋白质组学
，具体涉及高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统，及运用该系统的分离方法。
技术介绍
随着人类基因组测序的完成，生命科学研究的重心也转移到了蛋白质组学的研究上。其主要问题集中在未知蛋白质的大规模鉴定及低丰度蛋白质的测定上。近年来，高效液相色谱技术作为高效的分离方法在蛋白质组学中发挥着愈来愈重要的作用。而与一维分离有限的分离能力相比，多维分离技术拥有更大的峰容量，且分离速度快、重现性好、自动化程度高，因此发展多维正交的液相色谱分离技术平台对于蛋白质组学的研究至关重要。当前，以Shotgun技术为代表的多维液相色谱技术路线在对未知蛋白质的大规模鉴定尤其是低丰度蛋白质鉴定方面有很强的优势。尽管多维色谱技术已经在蛋白质组学研究中体现出了其强大的分离分析能力，但是其分离模式还存在一定的缺陷。首先是多维色谱分离系统的通量有限，由于二维系统的第二维是单支反相色谱柱，所以不得不运用精确的仪器进行复杂而频繁的阀切换操作控制以实现串联型操作模式，且第二维的反相色谱柱所提供的分析通量有限，从而导致串联式操作模式的样品分析时间也大为延长。多维色谱分离模式的第二个缺陷本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种用于高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统，其特征在于由一个四元梯度色谱泵（3），一个配有2?mL?loop的六通道进样阀（1），一个液相六通阀（8），一个十通道电动切换阀（4），一个8通道分流器（7），8个Valco三通（5），一根IE色谱柱（2），8根常规反相色谱柱组成的阵列色谱柱（6）和一个紫外检测器组成；其中，配有2?mL?loop的六通道进样阀（1）与单一的IE色谱柱（2）进口端、色谱泵（3）相连构成系统的第一维IE进样分离装置；IE色谱柱（2）的出口端直接与十通阀（4）的进口端相连，十通阀（4）的出口分别与每个Valco三通（5）的一个端口（13）相连，实现第一维IE馏...

【技术特征摘要】
1.一种用于高丰度蛋白质去除的二维常规柱阵列式色谱分离系统，其特征在于由一个四元梯度色谱泵(3)，一个配有2 mL loop的六通道进样阀(1)，一个液相六通阀(8)，一个十通道电动切换阀(4)，一个8通道分流器(7)，8个Valco三通(5)，一根色谱柱(2)，8根常规反相色谱柱组成的阵列色谱柱(6)和一个紫外检测器组成；其中，配有2 mL loop的六通道进样阀(I)与单一的IE色谱柱(2)进口端、色谱泵(3)相连构成系统的第一维IE进样分离装置；IE色谱柱(2)的出口端直接与十通阀(4)的进口端相连，十通阀(4)的出口分别与每个Valco三通(5)的一个端口(13)相连，实现第一维IE馏分到第二维阵列色谱柱(6 )的转移；ValCo三通(5 )的另一个端口( 15 )直接与阵列RPLC色谱柱(6 )的进口端相连，8个Valco...

【专利技术属性】
技术研发人员：张祥民，高明霞，洪广峰，黄志，
申请(专利权)人：复旦大学，
类型：发明
国别省市：