包含用于使赭曲毒素去毒的酰胺酶的食品添加剂制造技术

本发明专利技术涉及酰胺酶和包含能够降解赭曲毒素的酰胺酶的饲料或食品添加剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本专利技术涉及使霉菌毒素去毒的方法。更具体地讲，本专利技术涉及酰胺酶和包含至少一种用于使赭曲毒素(尤其是赭曲毒素A)去毒的酰胺酶的饲料和/或食品添加剂。
技术介绍
霉菌毒素是基本上属于曲霉属(Aspergillus)、青霉素(Penicillium)和镰刀菌属(Fusarium)的真菌的有毒次级代产物。它们可在广泛的农业商品上以及在世界范围的各种农艺、生态和采收后条件下产生。霉菌毒素可在田地中、饲料或食品材料的存储期间，或在食品链的后面的时间点进入食品链中。它们在食品和饲料中积聚是对人和动物健康的一个巨大威胁，因为消费霉菌毒素污染的饮食可能会导致致畸效果、致癌效果和雌激素效果或免疫抑制效果。在1985年，世界卫生组织估计大约25%的世界粮食被霉菌毒素污染(Jelinek等人1989)。由于粮食和谷物全球输入和输出的增加以及不断变化的环境和气候特点，该数字自此以后有可能已经增长。目如有超过400种霉菌毒素有文献记载，但最令人关注的以及因此研究最多的霉菌毒素包括:黄曲霉毒素、脱氧瓜萎镰菌醇、玉米赤霉烯酮、伏马毒素和赭曲毒素。尽管存在许多产毒素霉菌物种，但仅少数霉菌毒素被视为对人而言是值得注意的。三个真菌属(曲霉属、青霉属和镰刀菌属)最常涉及霉菌毒素污染的情形。真菌的定植、生长和霉菌毒素产生通常受多种因素影响。最重要的因素是温度和水活度。一般来讲，在温暖区域黄曲霉素是主要的关注点。这是因为产生这些毒素的曲霉属物种可找到热带区域存在的最适条件。相比之下，镰刀菌属和青霉属物种具有较低的最适温度，因此适应于更温和的气候。赭曲毒素、伏马毒素和玉米赤霉烯酮因此在提供这些条件的区域产生。赭曲毒素是一组由曲霉菌属或青霉属的数种真菌作为次级代谢物产生的霉菌毒素，是由香豆素衍生物组成的弱有机酸。有三种公认的赭曲毒素，定为A、B和C。赭曲毒素A是赭曲毒素家族中最丰富的成员，因而最常被检查到，但也是最有毒性的。赭曲毒素A(赭曲毒素A)是谷物和其他富含淀粉的食品中存在的肾毒性的、致畸的和致癌的霉菌毒素。除了谷物和谷物产品外，赭曲毒素A也存在于广泛的其他食品中，包括咖啡、可可、酒、啤酒、干豆、调味料、干果、葡萄汁、猪肾和暴露于受该霉菌毒素污染的饲料的非反刍动物的其他肉和肉产品。许多国家已对食品中的赭曲毒素A水平设定了极限，取决于食品的类型和质量，通常在I至IOppb (份/十亿份)之间。权利要求1.一种分离的酰胺酶，其能够降解赭曲毒素。2.根据权利要求1所述的酰胺酶，其中所述赭曲毒素是赭曲毒素A。3.根据权利要求1或权利要求2所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中的至少一个,优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个:1)x_P_G_x_x_D_x_H_x_H_x_xG；2)G-x-T；3)G-x-x-x-G-P；4)G-H-x-D；5)D_G_x_x_x_C_x_x_x_x_R_x_x_x_R_x_x-A_x_x_I_K；6)G-G-V-x-S-x-x-D-x-P；7)V_x-A_H_x_x_G_x_x_G；8)H-x-x-x-x-D； 9)G-V-x-1-x-x-G-T-D。4.根据权利要求中I至4中任一项所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO: I的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID NO: 1的位置11111、11113、11191、1(246、11287、11289、11307 和0378。5.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶是至少30%、至少40%、至少50%、至少60%、至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少97%或至少99%纯的。6.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶是在PH3-9和21-40°C下温育时可降解赭曲毒素的酰胺酶。7.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含具有SEQID NO: 1、SEQID NO:3 或 SEQ ID NO:5-11、13、14 或 15 中任一者的序列，或具有与 SEQ ID NO: 1、SEQ IDNO:3 或 SEQ ID NO:5-ll、13、14 或 15 中的任一者具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或与SEQ ID NO:USEQ ID N0:3或SEQ ID NO:5-11、13、14或15相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽。8.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中所述酰胺酶包含:具有SEQID NO:1或SEQ ID NO: 3 的序列或具有与 SEQ ID NO:1 或 SEQ ID NO: 3 具有至少 70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多肽序列，或者与SEQ ID NO:1或SEQ ID N0:3相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多肽；或由包含SEQ ID NO:2的序列或包含与SEQ IDNO:2具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的多核苷酸，或由于遗传密码子的简并性而与SEQ ID N0:2不同的多核苷酸表达所产生的多肽；或由与SEQ ID N0:2相差一个或多个氨基酸添加、缺失和/或置换的多核苷酸，或在严格条件下杂交至SEQ ID N0:2的互补序列或杂交至与所述互补序列具有至少70%、75%、80%、90%、95%、98%、99%同一性的序列的序列表达所产生的多肽。9.根据任一前述权利要求所述的酰胺酶，其中在pH7.0和40°C下所述酰胺酶每毫克蛋白质每分钟水解约至少100、至少200、至少300、至少400至约900纳摩尔赭曲毒素A。10.一种饲料或食品添加剂，其包含能够降解赭曲毒素的酰胺酶。11.根据权利要求10所述的饲料或食品添加剂，其中所述赭曲毒素是赭曲毒素A。12.根据权利要求10或权利要求11所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶是分离的。13.根据权利要求10至12中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶包含如下氨基酸序列基序中至少一个，优选至少两个、至少三个、至少四个、至少五个、至少六个、至少七个、至少八个，更优选九个:1)x_P_G_x_x_D_x_H_x_H_x_xG；2)G-x-T；3)G-x-x-x-G-P；4)G-H-x-D；5)D_G_x_x_x_C_x_x_x_x_R_x_x_x_R_x_x-A_x_x_I_K；6)G-G-V-x-S-x-x-D-x-P；7)V_x-A_H_x_x_G_x_x_G；8)H-x-x-x-x-D；9)G-V-x-1-x-x-G-T-D。14.根据权利要求10至13中任一项所述的饲料或食品添加剂，其中所述酰胺酶具有Tim桶结构，所述桶结构包括包含6个组氨酸残基、I个赖氨酸残基和I个天冬氨酸残基的活性位点，其中当将所述酰胺酶和SEQ ID NO:1的三级结构相比较时所述活性位点中的所述氨基酸残基对应于 SEQ ID NO:l 的位置 H111、H1本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...

【专利技术属性】
技术研发人员：于书坤，CH波尔森，S达尔斯加尔德，王华明，I尼科莱夫，
申请(专利权)人：杜邦营养生物科学有限公司，
类型：
国别省市：