本发明专利技术涉及调节干扰素相关发育调节因子1(IFRD1)的表达和/或功能的反义寡核苷酸，尤其是通过靶向干扰素相关发育调节因子1(IFRD1)的天然反义多核苷酸。本发明专利技术还涉及这些反义寡核苷酸的鉴定和它们在治疗IFRD1表达相关的疾病和病症中的用途。
【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】
本申请要求2010年10月27日提交的美国临时专利申请N0.61/407045的优先权，其通过引用整体并入本文。本专利技术的实施方案包括调节IFRDl和相关分子的表达和/或功能的寡核苷酸。背景DNA-RNA和RNA-RNA杂交对于核酸功能的许多方面是重要的，包括DNA复制、转录和翻译。杂交对于检测特定核酸或改变其表达的多种技术也是关键的。反义核苷酸，例如通过与靶RNA杂交从而干扰RNA剪接、转录、翻译和复制来破坏基因表达。反义DNA具有额外的特性，即DNA-RNA杂交物作被核糖核酸酶H消化的底物,这是在大多数细胞类型中存在的活性。反义分子可被递送到细胞中，如寡脱氧核苷酸(ODN)的情形，或反义分子可从内源基因表达为RNA分子。FDA最近批准了一种反义药物VHMVENEtm(用于治疗巨细胞病毒视网膜炎)，反映了反义药物具有治疗效用。概述提供本概述以展示本专利技术的概述，以简要地指出本专利技术的性质和实质。提交本概述应理解的是，其不会用来解释或限制权利要求书的范围或含义。在一个实施方案中，本专利技术提供通过利用靶向天然反义转录物任何区域的反义寡核苷酸而导致相应有义基因的上调来抑制天然反义转录物作用的方法。本文还预期,天然反义转录物的抑制可由siRNA、核酶和小分子实现,认为这些在本专利技术的范围中。一个实施方案提供 调节生物系统(包括但不限于体内或体外患者细胞或组织)中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法,包括将所述生物系统或所述细胞或组织与长度为约5至约30个核苷酸的反义寡核苷酸接触,其中所述寡核苷酸与包括SEQ ID NO: 2的核苷酸I至740或SEQ ID NO: 3的天然反义转录物核苷酸I至418或SEQ ID NO:4的天然反义转录物核苷酸I至540或SEQ ID NO: 5的天然反义转录物核苷酸I至546或SEQ ID NO: 6的天然反义转录物核苷酸I至429或SEQ ID NO: 7的天然反义转录物核苷酸I至429中的5至30个连续核苷酸的多核苷酸的反向互补序列具有至少50%序列同^一注,从而体内或体外调节所述生物系统(包括体内或体外所述患者细胞或组织)中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达。在实施方案中，寡核苷酸靶向存在于生物系统中的IFRDl多核苷酸的天然反义序列，例如，SEQ ID N0:2至7所列的核苷酸及其任何变体、等位基因、同系物、突变体、衍生物、片段及其互补序列。反义寡核苷酸的实例如SEQ ID N0:8至16所列。另一实施方案提供体内或体外调节患者细胞或组织中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法，包括将所述细胞或组织与长度为5至30个核苷酸的反义寡核苷酸接触，其中所述寡核苷酸与IFRDl多核苷酸的反义的反向互补序列具有至少50%序列同一性;从而体内或体外调节患者细胞或组织中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达。另一实施方案提供体内或体外调节患者细胞或组织中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法,包括将所述细胞或组织与长度为5至30个核苷酸的反义寡核苷酸接触,其中所述寡核苷酸与IFRDl反义多核苷酸的反义寡核苷酸具有至少50%序列同一,注；从而体内或体外调节患者细胞或组织中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达。在另Iv实施方案中，本专利技术包括调节生物系统中-[FiRDl多核昔酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括将所述生物系统与祀向IFRDl多核苷酸的天然反义转录物的至少一个反义寡核苷酸相接触，由此调节所述生物系统中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达。在另一个实施方案中，本专利技术包括调节生物系统中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法，所述方法包括将所述生物系统与靶向IFRDl多核苷酸的天然反义转录物的区域的至少一个反义寡核苷酸相接触，由此调节所述生物系统中IFRDl多核苷酸的功能和/或表达。在实施方案中，本专利技术包括增加生物系统中的具有SEQ ID NO:1的IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法,所述方法包括将所述生物系统与靶向所述IFRDl多核苷酸的天然反义转录物的至少-一个反义寡核苷酸相接触，由此增加所述IFRDl多核苷酸或其表达产物的功能和/或表达。在另一个实施方案中，本专利技术包括增加生物系统中的具有SEQID NO:1的IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的方法,所述方法包括将所述生物系统与$E向所述IFRDl多核苷酸的天然反义转录物的至少一个反义寡核苷酸相接触，由此增加所述IFRDl多核苷酸或其表达产物的功能和/或表达，其中所述天然反义转录物选自SEQ ID NO:2至7。在另一个实施方案中，本专利技术包括增加生物系统中的具有SEQID NO:1的IFRDl多核苷酸的功能和/或表达的 方法,所述方法包括将所述生物系统与靶向所述IFRDl多核苷酸的天然反义转录物的至少一个反义寡核苷酸相接触，由此增加所述IFRDl多核苷酸或其表达产物的功能和/或表达，其中所述天然反义转录物选自SEQ ID NO: 2至7并且其中所述反义寡核苷酸选自SEQ ID NO:8至16中的至少一."Is.。在实施方案中，组合物包括一种或多种结合有义和/或反义IFRDl多核苷酸的反义寡核苷酸。在实施方案中，寡核苷酸包括一种或多种修饰或取代的核苷酸。在实施方案中，寡核苷酸包括一种或多种修饰的键。在又一实施方案中，修饰的核苷酸包括包含硫代磷酸酯、膦酸甲酯、肽核酸、2’ -O-甲基、氟-或碳、亚甲基或其它锁核酸(LNA)分子的修饰的碱基。优选地,修饰的核苷酸是锁核酸分子，包括a-L-LNA。在实施方案中，将寡核苷酸通过任何递送路径(包括但不限于口服、透皮、经由吸入方式、皮下、肌内、静脉内或腹膜内)施用给患者。在实施方案中，寡核苷酸以药物组合物施用。治疗方案包括向患者施用反义化合物至少一次；然而，可修改该治疗以包括经一段时间的多个剂量。该治疗可与一种或多种其它类型的治疗联合。在实施方案中，将寡核苷酸封装在脂质体中或连接于载体分子(例如,胆固醇、TAT 肽)。其它方面在以下描述。附图简述附图说明图1是实时PCR结果的图,其显示利用Lipofectamine2000引入的硫代磷酸酯寡核苷酸处理518A2细胞后，与对照相比，IFRDlmRNA的倍数变化+标准差。标为CUR-0498、CUR-0496、CUR-0500、CUR-0484、CUR-0488、CUR-0486、CUR-0492、CUR-0490 和 CUR-0494 的条柱分别对应用SEQ ID N0:15、14、16、8、10、9、12、ll和13处理的样品。序列表描述-SEQ ID NO:1:智人‘干扰素相关发育调节因子I’(IFRDl),转录变体3,mRNA(NCBI 登记号:ΝΜ_001007245) ；SEQ ID NO:2:天然 IFRDl 反义序列(Hs.657074)；SEQ ID N0:3:天然 IFRDl 反义序列(Hs.642044) ；SEQ ID N0:4:天然 IFRDl 反义序列(Hs.709100) ；SEQ ID NO:5:天然 IFRDl 反义序列(CD673697 的反向序列)；SEQ IDNO:6:天然IFRDl反义序列(AA625894的反向序列)；SEQ ID NO:7:天然IFRDl反义序列(DB50本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】...
【专利技术属性】
技术研发人员：J·克拉德，O·霍克瓦舍曼，C·科伊托，
申请(专利权)人：库尔纳公司，
类型：
国别省市：
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