用于检测分析物的方法和组合物技术

本发明专利技术涉及用于检测一种或多种分析物的方法和器械。分析物包括感染剂(例如致病性病毒)的试剂或组分，以及酶、蛋白质和生物标志。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于检测分析物的方法和组合物优先权本申请要求于2009年5月11日提交的美国临时申请61/177，272和于2009年7月23日提交的美国临时申请61/228，135的优先权，所述美国临时申请各自在此通过引用合并入本文。关于政府支持的研究的声明本专利技术的部分在由疾病控制中心(Center for Disease Control)授予的合同号200-2007-19345下在美国政府的支持下进行。政府对于本专利技术的部分可拥有某些权利。
技术介绍
本专利技术涉及用于样品(例如得自受试者的生物学样品)中的一种或多种分析物例如抗原的测定。特别地，本专利技术涉及利用特异性靶向所选分析物的结合部分来检测一种或多种分析物的方法和装置。分析物可以是例如一种或多种感染剂。许多类型的测定已用于检测各种物质(通常称为分析物或配体)在身体样品中的存在。这些测定一般涉及抗原-抗体反应(例如配体、抗配体、配体-受体)，并且可以利用包含放射性、酶促、荧光或可视觉观察的金属可溶性标签的合成的缀合物，和用于观察结果的特别设计的反应器室。大多数目前的测试经设计用于进行定量测定，但在许多情况下，所需要的只是定性鉴定，例如阳性/阴性指示。定性测定必须是非常灵敏的，因为在测试流体中，目的分析物的浓度通常较小。进一步地，假阳性可以是麻烦的，特别是对于凝集作用和其他快速检测法例如浸溃片和变色测试。已开发了使用金属可溶性标签或其他类型的有色粒子的夹心免疫测定和其他检测法。此类技术仍遭遇在经设计用于检测多个靶分析物的快速检测法中遇到的问题。此外，随着高致病性试剂例如流感病毒的出现，需要开发有效的实验室或及时现场护理系统(Pointof Care System),其可以有效且精确地检测一种或多种感染剂,包括感染剂的不同类型或亚型。例如，流行性感冒通常可见于局部暴发流行或遍及全世界的流行中。流行可以在任何时间出现，并且可以在很少的警告或无警告的情况下爆发地发生。受累人数可以从数百到数十万到数百万不等。流行可以是短期的，持续数天或数周，但较大的流行可以持续数月。尽管流行性感冒在大多数个体中通常很弱，但它对于老人、非常年轻或虚弱的个体是危及生命的。然而，流感的某些毒株例如HlNl和H5已显示即使在健康和年轻个体中也是致命的。因此，需要开发有效检测病原体例如流行性感冒的一个或多个类型和亚型的装置和方法，无论感染是由流行性感冒的一般或预期的亚型(季节性流感)还是由其可以是流行性或大范围流行性感冒的致病因子的亚型(例如禽流感或猪流感)引起。本专利技术的目的是，提供用于检测生物学样品中的分析物的快速和灵敏的方法。另一个目的是，提供具有高灵敏度和比常规测定更少的假阳性的测定。进一步目的是，提供用于检测生物学样品中存在的低水平的分析物的器具或系统。另一个目的是，提供测定系统，其涉及最低限度数目的方法步骤，且即使当由缺乏专门训练的人员使用时，也获得可靠结果O本专利技术的一个目的是，提供用于测试感染剂的系统，其在数分钟内提供鉴定一种或多种感染剂的结果。进一步的目的是，提供其中在测试工具上的结果对于靶分析物而言同样特异和灵敏的系统，虽然结果可以在完成获得结果所需的反应后I到数小时读取。根据下述说明书、附图和权利要求，本专利技术的这些及其他目的和特征将是显而易见的。专利技术概述在本专利技术的一个方面，提供了样品收集装置，其配置为允许混合溶液中的样品，其中该溶液包含检测一种或多种靶分析物所需的试剂。样品收集装置可以配置为允许在样品收集装置的样品接受管组件和上部密封的隔室(chamber)组件之间气密密封，由此当样品收集装置与测试装置偶联时，接受管和上部密封的隔室能够压配(pressure-fit)在一起，提供帮助释放样品收集装置中含有的流体的正的反压(positive back pressure)。在另一个方面，本专利技术提供了包含横向流动膜、在横向流动方向的上游的包含流体的隔室的测试装置，其中所述隔室能够可控制地将流体释放到横向流动材料内。该装置包括含有一个或多个测试区带和一个或多个对照区的多个可寻址线路，和分配在每个可寻址线路中的多个捕获部分配偶体(partner)。在一个实施方案中，测试装置包括测试条。测试条包含至少2个邻近的可寻址的线路(其具有固定至其上的不同类别的捕获部分配偶体)。在一个实施方案中，每个可寻址线路经配置用于检测不同的靶分析物。在另一个方面，提供了用于检测一种或多种靶分析物的方法，其包括，使样品与试剂在样品收集装置中混合，以形成复合物，其中该复合物包含捕获探针、靶分析物和检测探针，并且其中该复合物通过存在于样品收集装置的远端的分隔物(split-s印turn)从样品收集装置释放到测试装置。允许复合物运行通过包含具有多个可寻址线路的测试条的测试装置，其中各个可寻址线路配置用于检测不同分析物，并且其中测试条的每个可寻址线路包含一个类型的固定的捕获部分配偶体的群体，其与样品收集装置中存在的捕获部分互补。在一个进一步的实施方案中，测试装置包含具有一个或多个对照线路的测试条。在另外一个方面，本专利技术提供了用于检测分析物的系统，其包含样品收集装置和测试装置。在另一个方面，本专利技术提供了试剂盒，其包含测试装置和多种特异性结合试剂。通过引用合并本说明书中提及的所有出版物和专利申请通过引用合并入本文，其程度就如同每个单独的出版物或专利申请被明确并且单独地指出通过引用合并。附图简述本专利技术的新特征在附加的权利要求中进行阐述。通过参考下列专利技术详述和附图将能够更好地理解这些特征和优点，所述专利技术详述阐述了利用本专利技术的原理的示例性实施方案，并且在所述附图中:附图说明图1举例说明了样品收集装置。图2举例说明了样品收集装置:2A举例说明了样品收集装置，其显示上部隔室和取样部件的放大视图，2B举例说明了取样部件。图3举例说明了分解的样品收集装置的一个实施方案。图4举例说明了样品收集装置的一个实施方案。图5A-C举例说明了样品收集装置上的部件指示物。图6举例说明了样品收集装置上的分隔物。图7举例说明了样品收集装置的出口区的示意图。图8举例说明了样品收集装置的出口区的分配尖端的示意图。 图9举例说明了样品收集装置的出口区的示意图。图10举例说明了在样品收集装置的出口区和测试装置的端口之间的界面的示意图。图11举例说明了与测试装置偶联的示例性样品收集装置。图12举例说明了包括样品收集装置和测试装置的诊断测试系统的一个实施方案。图13举例说明了测试装置。图14举例说明了测试装置的示意图，所述测试装置包含用于接受样品收集装置的分隔物的插管。图15描述了测试装置的放大的示意图，所述测试装置具有用于接受样品收集装置的分隔物的插管。图16举例说明了测试装置。图17举例说明了测试装置的示意图。图18举例说明了测试条上的多个分析物的pRNA结合的示意图。 图19举例说明了横向流动测试。图20举例说明了与12-碳间隔子(spacer)连接的锚定分子苯二异硫氰酸酯(PDITC)。专利技术详述本专利技术的各个方面涉及利用特异性结合部分和捕获部分来定性和/或定量分析样品中所选的分析物的装置和结合对测定。本专利技术在用于检测样品中可能存在的一种或多种感染剂的各种测定中是有用的。在本专利技术中有用的测定包括但不限于，竞争性免疫测定、非竞争性免疫测定、夹心免疫测定和阻断本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】2009.05.11 US 61/177,272;2009.07.23 US 61/228,1351.用于检测一种或多种分析物在样品中的存在、不存在或水平的系统，其包含:配置用于使患者样品与一种或多种免疫试剂混合以形成一种或多种可捕获和可检测的免疫复合物的样品收集装置；和包含用于捕获所述免疫复合物的横向流动膜的测试装置，其中所述样品收集装置和所述测试装置配置为形成气密密封和/或将所述样品通过分隔物释放到所述横向流动膜上。2.包含主体的样品收集装置，所述主体包含: (a)上部隔室，其包含上部密封区室和至少一个可破坏的密封，所述上部密封区室含有一种或多种溶液； (b)与所述上部隔室流体联系的样品收集器具； (C)与所述上部隔室流体联系的样品接受管，其中所述管包含刚性材料；其中当偶联在一起时，所述上部隔室和所述样品接受管配置为形成气密密封； (d)下部隔室，其与所述样品接受管流体联系，含有一种或多种试剂；和 (e)其中所述试剂包含多个分析物结合组，其中每个组包含: (i)捕获探针，其包含:(I)能够特异性结合靶分析物的结合部分，和(2)捕获部分配偶体；和 ( )检测探针，其包含:(I)能够特异性结合靶分析物的第二结合部分，和(2)标记；和 (iii)其中所述多个分析物结合组各自设计为结合不同的靶分析物。3.权利要求1的样品收集装置，其中所述捕获部分配偶体选自寡核苷酸、抗生物素蛋白、链霉亲和素、吡喃糖基RNA(pRNA)、适体或其组合。4.权利要求2的样品收集装置，其中所述pRNA包含选自SEQID NO:120至SEQ ID NO:126的序列。5.权利要求1的样品收集装置，其中所述靶分析物是流感病毒或其组分。6.权利要求1的样品收集装置，其中所述提取溶液或所述试剂包含提取试剂。7.权利要求1的样品收集装置，其还包含网格膜，所述网格膜使所述下部隔室中的试剂与所述样品接受管的其余部分分离。8.权利要求7的样品收集装置，其中所述试剂还包含染料，所述染料能够指示所述样品与所述试剂的充分混合。9.权利要求1的样品收集用具，其中所述上部隔室包含至少2个亚隔室。10.权利要求9的样品收集装置，其中所述亚隔室各自含有溶液。11.权利要求1的样品收集装置，其中所述接触能够形成相对于环境压力的正压差异，所述正压差异能够从所述样品收集装置排出溶液。12.权利要求1的样品收集装置，其中所述下部隔室还包含当穿孔时能够释放溶液的分隔物。13.权利要求12的样品收集装置，其中所述分隔物包含氯丁橡胶。14.权利要求1的样品收集装置，其还包含存在于所述样品接受管上的第一和第二指示物，其中所述指示物提供在所述上部隔室和所述样品接受管之间的适当接触的指示。15.权利要求1的样品收集装置，其中所述样品收集器具与所述上部隔室附着。16.包含主体的测试装置，所述主体包含:(a)所述主体中的横向流动膜； (b)位于在所述隔室和所述横向流动膜之间存在的间隙的上游的隔室； (C) 一个或多个对照线路；和 (d)多个可寻址线路，每个线路包含捕获部分配偶体，其中所述捕获部分配偶体选自多个分子类别，并且任何2个邻近的可寻址线路包含不同类别的捕获部分配偶体。17.权利要求15的装置，其中所述多个可寻址线路中的至少一个包含含有pRNA的固定的捕获部分配偶体。18.权利要求16的装置，其中所述pRNA包含选自SEQID NO:120-SEQ ID NO:126的序列。19.权利要求16的装置，其中所述pRNA与锚定蛋白质连接。20.权利要求18的装置，其中所述锚定蛋白质是单克隆抗体或牛血清白蛋白。21.用于检测一种或多种靶分析物的方法，其包括: (a)从受试者中获得样品，并且在样品收集装置内混合所述样品，其中所述样品收集装置包含: 1.上部隔室，其包含上部密封区室和至少一个可破坏的密封，所述上部密封区室含有一种或多种溶液； 2.与所述上部隔室流 体联系的样品收集器具； 3.与所述上部隔室流体联系的样品接受管，其中所述管包含刚性材料；其中当偶联在一起时，所述上部隔室和样品接受管配置为形成气密密封； 4.下部隔室，其与所述样品接受管流体联系，含有一种或多种试剂；和其中所述试剂包含多个分析物结合组，其中每个组包含: a)捕获探针，其包含:(1)能够特异性结合靶分析物的结合部分，和(2)捕获部分配偶体；和 b)检测探针，其包含:(I)能够特异性结合靶分析物的第二结合部分，和(2)标记；和其中所述多个分析物结合组各自设计为结合不同的靶分析物； (b)破坏所述上部隔室的密封，以将一种或多种溶液释放到所述样品接受管内，从而释放来自所述样品收集器具的所述样品且使所述样品与所述试剂混合； (c)将(b)中形成的所述混合物应用于包含多个可寻址线路的测试条，其中所述可寻址线路各自包含固定的捕获部分配偶体，所述固定的捕获部分配偶体能够与(a) (4)中的不同的所述捕获探针结合，由此每个可寻址线路配置为结合不同的靶分析物；和 (d)测定标记是否存在于一个或多个可寻址线路中；从而检测样品是否含有一种或多种靶分析物。22.权利要求20的方法，其中所述标记是铕。23.权利要求20的方法，其中所述一种或多种靶分析物是流感病毒或其组分。24.权利要求20的方法，其中所述可寻址线路中的至少一个包含选自SEQID NO:120-SEQ ID NO:126 的 pRNA 序...

【专利技术属性】
技术研发人员：R·L·伊根，G·P·利加德，D·D·布克，C·J·约翰逊，A·贝伦基，S·伍卡耶罗维驰，J·齐斯，S·卡斯塔南，
申请(专利权)人：连接DX股份有限公司，
类型：
国别省市：