本发明专利技术涉及冬凌草茎用蒸馏水80℃提取制备水提物、涉及该水提物的HPLC-(-)ESI-Q-TOF-MS/MS指纹图谱、涉及该水提物的HPLC-(+)ESI-Q-TOF-MS/MS指纹图谱、进一步涉及该水提物在S180小鼠模型上的抗肿瘤活性及作为抗肿瘤剂的应用。
【技术实现步骤摘要】
冬凌草茎水提物、其制备方法、指纹图谱及作为抗肿瘤剂的应用专利
本专利技术涉及冬凌草茎用蒸馏水80°C提取制备水提物、涉及该水提物的HPLC-(-)ES1-Q-TOF-MS/MS指纹图谱、涉及该水提物的HPLC-(+) ES1-Q-TOF-MS/MS指纹图谱、进一步涉及该水提物在S180小鼠模型上的抗肿瘤活性及作为抗肿瘤剂的应用。本专利技术属于生物医药领域。
技术介绍
恶性肿瘤严重威胁人类的健康。根据WHO公布的预测数据，2020年全世界癌症发病率将增加50%，全球每年新增癌症患者人数将达到1500万人。虽然监床已经有足够数量的抗肿瘤药物可供选择，但是因为毒副作用而不尽人意。在抗癌药物的研究中，寻找天然抗肿瘤药物非常吸引研究兴趣。全球应用的175种抗癌药物中，有57%直接或间接来源于天然产物。可是它们仍然存在严重的毒副作用。寻找活性明确，毒副作用低的天然抗肿瘤药物尤其吸引研究兴趣。冬凌草(DLC),是唇形科香茶菜属植物碎米極Rabdosia rubescens (Hemsl.) Hara的全草。冬凌草为多年生草本植物，广泛分布于我国黄河长江流域，主产于河南济源太行山、王屋山区一带。因具有清热解毒、清咽利喉和消肿止痛功能，民间常年将冬凌草叶当作茶叶煮水饮用。在过去的30多年里，冬凌草的化学成分及药理作用研究主要集中在叶的脂溶性部分，代表性成分为冬凌草甲素和冬凌草乙素。虽然曾经研究冬凌草叶水提物对食管癌、贲门癌、肝癌、乳腺癌的治疗作用，但是这些作用没有与指纹图谱相关联。所有报道的抗肿瘤作用都集中在冬凌草叶水提物，没有涉及冬凌草茎水提物，更没有冬凌草茎水提物的抗肿瘤作用与指纹图谱相关联的报道见诸文献。通过长期的抗肿瘤剂研究积累，专利技术人锁定酚酸与二萜是具有抗肿瘤活性的结构类型。通过生源分析专利技术人预测到冬凌草茎中含丰富的酚酸与二萜。按照这些认识，专利技术人提出本专利技术，用 HPLC-(-)ES1-Q-TOF-MS/MS 和 HPLC-(+)ES1-Q-TOF-MS/MS 指纹图谱指纹图谱揭示冬凌草茎水提物的化学成分、用S180小鼠模型揭示冬凌草茎水提物的抗肿瘤作用。
技术实现思路
本专利技术所要解决的第一个技术问题是提供一种制备冬凌草茎水提物的方法。本专利技术所要解决的第二个技术问题是建立HPLC- (_) ES 1-Q-T0F-MS/MS和HPLC- (+) ES1-Q- TOF-MS/MS分析方法，获取冬凌草茎水提物的指纹图谱以便控制冬凌草茎水提物的质量。本专利技术所要解决的第三个技术问题是用S180小鼠模型评价冬凌草茎水提物的抗肿瘤作用，为肿瘤治疗提供冬凌草茎水提物作为抗肿瘤活性高无副作用的物质。本专利技术涉及冬凌草茎水提物的制备工艺，该工艺包括冬凌草茎用热水提取、水提物过滤、滤液减压浓缩至干、得到的干粉用HPLC-㈠ES1-Q-TOF-MS/MS和HPLC- (+)ES1-Q-TOF-MS/MS分析得指纹图谱、得到的干粉用S180小鼠模型评价冬凌草茎水提物的抗肿瘤作用。为了进一步阐述本专利技术，下面给出一系列实施例。这些实施例完全是例证性的，它们仅用来对本专利技术进行具体描述，不应当理解为对本专利技术的限制。附图说明图1a冬凌草茎水提物在(_)ES1-Q-TOF-MS检测的离子流指纹图谱图1b冬凌草茎水提物在(+) ES1-Q-TOF-MS检测的离子流指纹图谱具体实施方式实施例1冬凌草茎水提物的制备40g干冬凌草茎自来水洗净、凉干、切成大约Icm长的茎段、加1000-1800mL温度为70-900C的热蒸镏水渗滤，优选加1200mL温度为80°C的热蒸镏水渗滤。渗滤液流出的速度为10-30mL/分钟，优选20mL/分钟。流出液于40_60°C减压浓缩，优选于50°C减压浓缩，得到3g冬凌草茎水提物，为淡黄色固体。研成粉末，供后面的研究使用。实施例2冬凌草茎水提物的HPLC-㈠ES1-Q-TOF-MS/MS指纹图谱和HPLC- (+)ES1-Q-TOF-MS/MS 指纹图谱HPLC:ffaters 2795Separations Module ；Detector:ffaters 2489Dual absorbance detector ；Kromasil C18 (Dikma)反相柱(5_ μ m, 250_mm_X_4.6_mm)；保护柱(5_μ m, 10_mm_X_4.6_mm)；流动相:乙腈/水(含0.5%和0.05%冰醋酸)；流动相流速:0.3ml/min ；进样量:50μ1;洗脱方式:梯度洗脱(具体梯度见表I)。表I冬凌草茎水提物HPLC-分析流动相梯度表a本文档来自技高网...
【技术保护点】
冬凌草茎水提物的制备工艺，该工艺包括将干冬凌草茎用自来水洗净之后切碎，按1∶40(g/mL)的比例用70?90℃的热水渗滤，渗滤液流出的速度为10?30mL/分钟，流出液于40?60℃减压浓缩，得到冬凌草茎水提物干粉。
【技术特征摘要】
1.冬凌草茎水提物的制备工艺，该工艺包括将干冬凌草茎用自来水洗净之后切碎，按I: 40 (g/mL)的比例用70-90°C的热水渗滤，渗滤液流出的速度为10-30mL/分钟，流出液于40-60°C减压浓缩，得到冬凌草茎水提物干粉。2.根据权利要求1所述的方法，其中干冬凌草茎与用于渗滤的热水的比例为I: 30(g/mL)ο3.根据权利要求1所述的方法，其中用于渗滤的热水的温度为80°C。4.根据权利要求1所...
【专利技术属性】
技术研发人员：彭师奇，赵明，姚兴河，彭莉，
申请(专利权)人：彭莉，
类型：发明
国别省市：
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