一种烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法技术

本发明专利技术公开了一种烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法，包括如下步骤：（1）取待鉴定的烟草种子表面消毒；（2）烟草黑胫病菌的培养及其分生孢子悬浮液的制备；（3）烟草黑胫病菌毒素液的提取；（4）毒素液浸种后进行种子萌发，统计种子发芽率并进行抗性评价。本发明专利技术的方法操作简单、成本低、速度快、准确性高、适宜烟草育种研究中的黑胫病抗性鉴定。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于作物抗病性鉴定
，具体而言，涉及。
技术介绍
烟草黑胚病(Phytophthora parasitica var.nicotiane)是烟草生产上最具毁灭性的病害之一，是制约我国各烟区烟叶生产的最重要因素，可以危害烤烟、晾烟、晒烟、白肋烟、香料烟等所有的栽培烟草。1896年，Bred de Haan在爪哇首次发现烟草黑胫病。1924年，Cook在波多黎再吃观察到这个病害。此后，世界各主要产烟区陆续报道了烟草黑胫病发生为害情况，现该病已遍布温带、亚热带和热带各烟区。20世纪40年代，病区扩大到黄河流域、长江流域及珠江流域的各产烟省，在这些地区烟草黑胫病均已造成严重损失。据不完全统计，我国烟草黑胫病平均每年发病面积高达76373hm2，产量损失2869.26万kg，产值损失超过1.23亿元，仅次于烟草病毒病。生产实践表明，防治黑胫病最经济、有效、环保的措施就是选育抗病品种，抗性鉴定自然成为抗源挖掘利用、抗病育种、抗性监测等工作中重要的一环。因此，准确有效的抗性鉴定方法对烟草抗性材料的鉴定和抗病品种的选育是至关重要的。在以往黑胫病抗性材料的鉴定中，一般采用苗期接种鉴定本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法，其特征在于包括如下步骤：（1）取待鉴定的烟草种子表面消毒；（2）烟草黑胫病菌的培养及其分生孢子悬浮液的制备；（3）烟草黑胫病菌毒素液的提取：将步骤（2）制备的分生孢子悬浮液稀释为1×105～5×106个孢子含量，滤纸过滤，滤液高速离心，取上清液用0.45μm微孔滤膜过滤，得无菌的烟草黑胫病菌毒素液；（4）将步骤（1）表面消毒后的烟草种子用步骤（3）提取的毒素液浸泡4?8h，然后将烟草种子移到琼脂水培养基上，保持在相对湿度90%?95%、光照强度为10001x?20001x、温度在18℃?25℃的条件下，7?10d后开始观察发芽情况，根据发芽率判断供试材料的抗性...

【技术特征摘要】
1.一种烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法，其特征在于包括如下步骤: (1)取待鉴定的烟草种子表面消毒； (2)烟草黑胫病菌的培养及其分生孢子悬浮液的制备； (3)烟草黑胫病菌毒素液的提取:将步骤(2)制备的分生孢子悬浮液稀释为IXlO5 5 X IO6个孢子含量，滤纸过滤，滤液高速离心，取上清液用0.45Mfli微孔滤膜过滤，得无菌的烟草黑胫病菌毒素液； (4)将步骤(I)表面消毒后的烟草种子用步骤(3)提取的毒素液浸泡4-8h，然后将烟草种子移到琼脂水培养基上，保持在相对湿度90%-95%、光照强度为10001χ-20001χ、温度在18°C _25°C的条件下，7-10d后开始观察发芽情况，根据发芽率判断供试材料的抗性:发芽抑制率> 50%为感病品种，15% <发芽抑制率在> 50%为中抗品种，发芽抑制率< 15%为抗病品种。2.根据权利要求1所述的烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法，其特征在于:步骤(I)按如下方法操作:取待鉴定的烟草种子置于无菌培养皿中，用1% ( /V)硫酸铜溶液浸种5min，然后用无菌水冲洗3次。3.根据权利要求1所述的烟草黑胫病抗性的快速鉴定方法，其特征在于:...

【专利技术属性】
技术研发人员：冯超，孔凡玉，张成省，王静，杨举田，李乃会，张永春，
申请(专利权)人：中国农业科学院烟草研究所，
类型：发明
国别省市：