【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种连作障碍土壤中自毒物质降解菌改良作物品质的应用,属于微生物肥料,更具体的说,是涉及一种连作障碍自毒物质降解菌及其制备的复合微生物肥料。
技术介绍
随着栽培年限的增加,土壤自毒物质累计、次生盐溃化现象不断出现并日益加重,严重影响了作物的产量和品质,阻碍作物生产的可持续发展。此外,土壤中自毒物质的连年累计使得土壤微生态环境趋于恶性循环。总之,一种可以改善土壤团粒结构,营造有益菌群的连作障碍自毒物质降解菌及其制备的复合微生物肥料尚未见报道。
技术实现思路
本专利技术就是针对上述问题,提供了一种连作障碍自毒物质降解菌及其制备的复合微生物肥料。为了实现本专利技术的上述目的,本专利技术采用如下技术方案一种自毒物质降解菌的保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区大屯路,中国科学院微生物研究所,保藏编号为CGMCC No. 6896,保藏日期为2012年11月28日,分类命名为枯草芽孢杆菌Bacillus subtilis,所述自毒物质降解菌的分离方法包括如下步骤(I)菌株的分离采用逐渐提高苯甲酸浓度的驯化方法,将连作10年的番茄根 ...
【技术保护点】
一种自毒物质降解菌,其特征在于,其保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC?No.6896,保藏日期为2012年11月30日。
【技术特征摘要】
1.一种自毒物质降解菌,其特征在于,其保藏机构为中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为CGMCC No. 6896,保藏日期为2012年11月30日。2.—种自毒物质降解菌的分离筛选方法,其特征在于, 所述自毒物质降解菌的分离方法包括如下步骤, (1)菌株的分离 采用逐渐提高苯甲酸浓度的驯化方法,将连作10年的番茄根系土壤悬液按10%的接种量接种于含有IOOmg / L苯甲酸的无机盐培养基中,30°C下摇床150r / min,培养3天后,以10%接种量转至苯甲酸浓度为300mg / L的无机盐培养基中,继续培养; 按此方式连续循环3次,三次所用的无机盐培养基,苯甲酸的浓度依次为300mg / L、600mg / LUOOOmg / L,然后进行平板涂布,将培养皿放于30°C恒温培养箱中培养72h,挑取单菌落,转接入苯甲酸浓度为IOOOmg / L的无机盐培养基中,反复涂布,得到苯甲酸降解菌菌悬液; 所述的无机盐培养基的组成为(NH4)2SO4 2g / LjKH2PO4 2g / LjNa2HPO4L 3 g /L,苯甲酸100 1000m g / L,NaCl 5 g / L,余量为水;培养基的PH=6. 8 7. 2 ; (2)菌株的筛选与鉴定 a.初筛将5ml步骤(I)所述的无机盐培养基加到15mmX150mm试管中,121°C下灭菌30min后冷却,接着将I ml步骤(I)得到的苯甲酸降解菌菌悬液加入到试管中,每株菌重复2管,28°C下避光培养5天,每24h观察记录I次生长情况; b.复筛将50ml步骤(I)所述的无机盐培养基加到250ml三角瓶中,121°C下灭菌30min后冷却,接着将Iml初筛得到的苯甲酸降解菌菌悬液加入到三角瓶中,加入Iml无菌水,每处理重复3次,28 V下避光培养10天,检测苯甲酸残留量,同时设立空白对照组,空白对照组中用水代替无菌水,计算降解率; c.鉴定对复筛获得的菌株进行16SrDNA序列测定, 采用通用引物进行PCR扩增,反应总体系为,取PCR产物Iul进行I %琼脂糖凝胶电泳,EB染色后紫外检测.用琼脂糖凝胶纯化试剂盒切胶回收PCR产物进行测序分析; 菌株的16SrDNA序列测序结果登录GenBank,并用BLAST与GenBank中的16SrD...
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