本发明专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法。其特点是：超临界CO2流体萃取技术在萃取过程中保持着药用植物的有效成分，萃取过程中不发生化学反应，安全性好，不仅萃取的效率高而且能耗较少，提高了生产效率也降低了费用成本。应用大孔吸附技术分离纯化草苁蓉甙，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量30％以上的草苁蓉甙半成品和含量95％以上的草苁蓉甙终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的缺点。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种草苁蓉甙的纯化方法，特别是涉及一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法。
技术介绍
草苁蓉，为列当科植物草苁蓉的全草，一年生寄生草本。全草含8-表脱氧马钱子式酸(8-epideoxyloganic acid),草灰蓉苯丙烯醇式(rossicaside) B、C、D,草灰蓉苯丙烯醇式A,草灰蓉式(boschnaside),草灰蓉醒式(boschnaloside),松脂酹-β -D-卩比喃葡萄糖式(pinoresinol-β-D-glucopyranoside),对-香豆酸(p-coumaric acid),对-香豆酸甲酯(methyl p-coumarate), β-谷留醇(β-sitos-terol),齐墩果酸(oleanolicacid), 3-表齐墩果酸(3-epioleanol·ic acid), β _D_卩比喃葡萄糖基(1 — 4) α-卩比喃鼠李糖基-(I — 3) -D- (4-0-咖啡酸基)批喃葡萄糖(β -D-glucopyranosyl (I — 4) - a -L-rhamnopyranosyl-(I — 3)-D-(4-0-caffeoyl)-glucopyranose), C9>C10>C11 職内酯(C9、C10、Cllterpene lactones) 0主要用于补肾壮阳；润肠通便；止血。主肾虚阳痿；遗精；腰膝冷痛；小梗遗浙；尿血；宫冷不孕；带下；崩漏。草苁蓉甙是一种对人类健康有显著保健作用的天然活性物质，已引起国际社会的谱遍关柱。近年来，人们发现天然植物草苁蓉中含有大量的草苁蓉甙，由于原料草苁蓉来源较广，从中提取草苁蓉甙已取得了可喜进展。目前国内对草苁蓉甙的提取方法主要是甲醇制备工艺，其工艺主要为干品粉碎后用甲醇浸泡过夜，在用布氏滤斗过滤，提取4次，合并滤液，最后旋转蒸发、减压浓缩、喷雾干燥得草苁蓉甙，所用的提取分离方法其效果远远不如超临界CO2流体萃取后进行大孔吸附树脂分离的效果。
技术实现思路
本专利技术的目的在于克服常规技术提取率相对较低、提取纯度低等缺点，提供一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法。为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法，其步骤如下(I)将干草苁蓉粉碎，加入到C02超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，萃取压力为20MPa 40MPa，温度为50°C 60°C，萃取时间IOOmin 140min，得萃取物；(2)将经步骤(I)处理的草苁蓉萃取液用盐酸调其pH值为3. O 4. 0，静置、抽滤、减压浓缩得草苁蓉甙粗提物；(3)将所得草苁蓉甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液；(5)将草苁蓉甙各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得草苁蓉甙半成品，其含量为在30%以上；(6)将所得草苁蓉甙半成品上硅胶层析柱，并以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂；(7)将所收集的草苁蓉甙浓缩液用溶剂结晶，分离结晶，洗涤，干燥精制得草苁蓉甙，其含量在95%以上。所述步骤(3)中，所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X-5、NKA-9、S_8、D 3520、D4006、H103、D4020、AB-8H和NKA-H型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。本专利技术应用超临界CO2流体萃取可确保原有的色、味不因受热破坏，更能确保其中热敏性，易氧化物质不被破坏；还可在萃取的过程中同时对萃取物进行分离纯化；大孔吸附技术分离纯化草苁蓉甙，对草苁蓉甙的吸附选择性良好，吸附快解析也快，吸附容量较大；提取方便快捷，原料来源丰富，生产成本低廉，分离效果明显，提取纯度高，可以得到含量35%以上的草苁蓉甙半成品和含量95%以上的草苁蓉带终产品，克服了常规提取率相对较低、提取纯度低的特点。本专利技术选用理化性质稳定、表面积较大、交换速度较快、机械强度高、抗污染能力强、热稳定性好的大孔吸附树脂，不容于酸、碱及有机媒，对有机物选择性较好，不受无机盐类技强离子低分子化合物存在的影响，可以通过物理吸附从溶液中有选择地吸附草苁蓉甙，吸附快、解析也快，吸附容量较 大。具体实施例方式实施案例1:一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法，其步骤如下(I)将500g干草苁蓉粉碎后过60目筛，加入到CO2超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为1%，萃取压力为20MPa，温度为50°C，CO2流量为lmg/g生药· min,萃取时间IOOmin,得萃取物；(2)将经步骤⑴处理的草苁蓉萃取液用盐酸调其pH值为3.0，静置、抽滤、减压浓缩得草苁蓉甙粗提物；(3)将所得草苁蓉甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开大学所生产的NKA-H型树脂；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液；(5)将草苁蓉甙各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得草苁蓉甙半成品，其含量为30.2% (6)将所得草苁蓉甙半成品上硅胶层析柱，并以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂；(7)将所收集的草苁蓉甙浓缩液用无水乙醇结晶，分离结晶，洗涤，干燥精制得草苁蓉甙，其含量在95. 3%。实施案例2 : —种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法，其步骤如下(I)将500g干草苁蓉粉碎后过70目筛，加入到CO2超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，夹带剂占总萃取溶剂的体积百分比为2%，萃取压力为30MPa，温度为55°C，CO2流量为2mg/g生药· min,萃取时间120min,得萃取物；(2)将经步骤(I)处理的草苁蓉萃取液用盐酸调其pH值为38，静置、抽滤、减压浓缩得草苁蓉甙粗提物；(3)将所得草苁蓉甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附，所用的大孔树脂为天津南开大学所生产的D4006型树脂；(4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液；(5)将草苁蓉甙各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得草苁蓉甙半成品，其含量为31.5% ；(6)将所得草苁蓉甙半成品上硅胶层析柱，并以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂；(7)将所收集的草 苁蓉甙浓缩液用无水乙醇结晶，分离结晶，洗涤，干燥精制得草苁蓉甙，其含量在96. 1%。实施案例3 : —种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用超临界CO2流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法，其步骤如下：(1)将干草苁蓉粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，萃取压力为20MPa～40MPa，温度为50℃～60℃，萃取时间100min～140min，得萃取物；(2)将经步骤(1)处理的草苁蓉萃取液用盐酸调其pH值为3.0～4.0，静置、抽滤、减压浓缩得草苁蓉甙粗提物；(3)将所得草苁蓉甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附；(4)用40％、50％、60％、70％、80％、90％不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液；(5)将草苁蓉甙各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得草苁蓉甙半成品，其含量为30％以上；(6)将所得草苁蓉甙半成品上硅胶层析柱，并以丙酮∶甲醇以1∶1、2∶1、3∶1、4∶1、5∶1、6∶1、7∶1不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂；(7)将所收集的草苁蓉甙浓缩液用溶剂结晶，分离结晶，洗涤，干燥精制得草苁蓉甙，其含量在95％以上。所述步骤(3)中所用的大孔吸附树脂为天津南开大学所产生的X?5、NKA?9、S?8、D3520、D4006、H103、D4020、AB?8H和NKA?II型树脂中的一种，吸附为静态吸附或动态吸附。...
【技术特征摘要】
1.一种利用超临界c(v流体萃取和大孔吸附树脂耦合法富集纯化草苁蓉中草苁蓉甙的方法，其步骤如下 (1)将干草苁蓉粉碎，加入到CO2超临界萃取器中，用乙醇作为夹带剂，萃取压力为20MPa 40MPa，温度为50°C 60°C，萃取时间IOOmin 140min，得萃取物； (2)将经步骤(I)处理的草苁蓉萃取液用盐酸调其pH值为3.0 4.0，静置、抽滤、减压浓缩得草苁蓉甙粗提物； (3)将所得草苁蓉甙粗提物用大孔吸附树脂进行吸附； (4)用40%、50%、60%、70%、80%、90%不同浓度的乙醇对大孔吸附树脂进行洗脱，用薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液； (5)将草苁蓉甙各阶段洗脱液浓缩回收乙醇，得草苁蓉甙半成品，其含量为30%以上； (6)将所得草苁蓉甙半成品上硅胶层析柱，并以丙酮甲醇以1: 1、2 1、3 1、4 : 1、5 : 1、6 1、7 I不同体积比例进行洗脱，薄层色谱法跟踪检测，收集草苁蓉甙各阶段洗脱液，减压浓缩，回收溶剂； (7)将所收集的草苁蓉甙浓缩液用溶...
【专利技术属性】
技术研发人员：万莉，姚德坤，张亚红，姚德利，
申请(专利权)人：大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：
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