从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品技术

本发明专利技术公开了一种从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品，取罗汉果叶，加水煮沸提取2～3次，每次50～100min，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附，水洗树脂至流出液无色，再用乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇，于冰箱中放置20～30h，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干，即得山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙粗提物。本发明专利技术所提供的提取工艺简单，科学合理，可行性强，所得提取物的纯度高，精品纯度可达95％以上；且本发明专利技术所得提取物具有良好的自由基清除活性，应用前景广阔。另外，利用本发明专利技术技术可对大量废弃的罗汉果叶加以充分利用，提高自然资源的利用率，减少浪费。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品，特别是提取山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙的方法及其产品，属于药用活性成分的提取

技术介绍
罗汉果作为广西桂北地区的传统特产，也是我国特有的药用植物，主要分布在两广、云南、江西、湖南南部等地区，主产于广西永福、临桂和龙胜等县。罗汉果通常生长在山间阴湿、风凉地带，同属植物共有7种，我国有4种，其中罗汉果、翅子罗汉果 均可入药，其果实的提取物对治疗呼吸系统和消化系统疾病有相近的功效。罗汉果中含有丰富的黄酮甙、甘露醇、维生素E等，在防癌、美容等方面有良好功效。这使得罗汉果的开发应用前景异常光明，市场前景广阔。黄酮是一类重要的化合物，根据类黄酮化学结构进行分类，主要有黄酮醇(flavonols)、黄酮(flavones)、黄烷酮(flavanoes)、黄烷醇(flananols)或儿茶酚(catechins)、花色昔(anthocyanins)、异黄酮(isoflavones)、二氢黄酮醉 (dihydroflavonols)及查尔酮(chalcones)等8类。另外，还有一些其它类型的黄酮，如香豆素(coumarins)等。黄酮类化合物(flavonoids)是许多常用中草药的有效成分，除具有抗菌、消炎、抗突变、降压、清热解毒、镇静、利尿等作用外，在抗氧化、抗癌、防癌、抑制脂肪酶等方面也有显著效果。随着对罗汉果研究的深入，罗汉果叶的研究也日益受到人们的关注。罗汉果叶来源充足，仅广西桂林的罗汉果种植面积已超过10000亩，每亩可产叶200公斤，但大量的罗汉果叶秋后割下后便扔掉或者焚烧，没有加以利用。在药理活性方面文献记载罗汉果叶可治疗廯症外，还对致病菌金黄色葡萄糖球菌、白色葡萄糖球菌、卡他双球菌有较强的抑制作用。罗汉果叶晒干后水煎服临床治疗慢性咽喉炎及慢性支气管炎。陈全斌等采用磷钼络合物法研究了罗汉果叶总黄酮提取物的抗氧化能力。从国内外的研究近况来看，有关罗汉果叶方面的研究，陈全斌等测定了其总黄酮含量并从水提取物中分离得到两个黄酮甙山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙和槲皮素-3-0-β-D-葡萄糖-7-0-a-L-鼠李糖甙。但是，目前还没有从罗汉果叶中提取黄酮甙成分单体及其单体活性研究的相关报道。
技术实现思路
本专利技术所要解决的技术问题是采用合理的工艺条件从罗汉果叶中提取制备纯度较高的山奈酚_3，7-a-L- 二鼠李糖甙；经测定，所得提取物具有良好的自由基清除活性。本专利技术的技术方案从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法为取罗汉果叶，力口 10 30倍重量的水煮沸提取2 3次，每次提取50 lOOmin，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附，水洗树脂至流出液无色，再用30% 75%乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇，于冰箱中放置20 30h，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干， 即得山奈酚-3，7-a-L- 二鼠李糖甙粗提物。前述山奈酚-3，7-a_L-二鼠李糖甙粗提物经过硅胶柱层析，用氯仿与甲醇体积比为20 1 1 1的溶液进行梯度洗脱，收集5 1洗脱部位，放置，结晶，所得晶体即为山奈酚-3，7-a-L- 二鼠李糖甙提取物。优选的提取方法为取罗汉果叶，加30倍重量的水煮沸提取3次，每次提取 50min，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附，水洗树脂至流出液无色，再用30% 75%乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇，于冰箱中放置Mh，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干，得山奈酚_3，7-a-L- 二鼠李糖甙粗提物；将粗提物经过硅胶柱层析，用氯仿与甲醇体积比为20 1 1 1的溶液进行梯度洗脱，收集5 1洗脱部位，放置，结晶，所得晶体即为山奈酚-3，7-a-L- 二鼠李糖甙提取物。前述提取方法中，所述的大孔树脂为DlOl型大孔树脂。前述冰箱中的温度维持在4 10°C。以上所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法提取得到的山奈酚_3，7-a-L-二鼠李糖甙提取物。罗汉果叶中黄酮甙提取工艺的选择实验过程中，专利技术人发现利用乙醇-水体系得出的黄酮甙含量稍高于水煮沸条件下的黄酮甙含量，然而从节约药品、能源等方面考虑，决定采用水煮沸提取。并以温度(A)， 液料比(B)，提取时间(C)，提取次数(D)进行四因素三水平正交实验，其实验结果如下表1四因素三水平正交实验权利要求1.从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法，其特征在于取罗汉果叶，加10 30倍重量的水煮沸提取2 3次，每次提取50 lOOmin，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附，水洗树脂至流出液无色，再用30% 75%乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇， 于冰箱中放置20 30h，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干，即得山奈酚-3， 7-a-L-二鼠李糖甙粗提物。2.根据权利要求1所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法，其特征在于将山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙粗提物经过硅胶柱层析，用氯仿与甲醇体积比为20 1 1 1 的溶液进行梯度洗脱，收集5 1洗脱部位，放置，结晶，所得晶体即为山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙。3.根据权利要求1或2所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法，其特征在于取罗汉果叶，加30倍重量的水煮沸提取3次，每次提取50min，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附， 水洗树脂至流出液无色，再用30% 75%乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇，于冰箱中放置Mh，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干，得山奈酚-3， 7-a-L-二鼠李糖甙粗提物；将粗提物经过硅胶柱层析，用氯仿与甲醇体积比为20 1 1 1的溶液进行梯度洗脱，收集5 1洗脱部位，放置，结晶，所得晶体即为山奈酚_3， 7-a-L-二鼠李糖甙。4.根据权利要求3所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法，其特征在于所述的大孔树脂为DlOl型大孔树脂。5.根据权利要求3所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法，其特征在于冰箱中的温度为4 10°C。6.如要求1-5中任一项所述从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法提取得到的山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙。全文摘要本专利技术公开了一种从罗汉果叶中提取黄酮甙成分的方法及其产品，取罗汉果叶，加水煮沸提取2～3次，每次50～100min，过滤，合并滤液，进大孔树脂吸附，水洗树脂至流出液无色，再用乙醇或无水甲醇洗脱，收集洗脱液并除去乙醇或甲醇，于冰箱中放置20～30h，析出沉淀，沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液蒸干，即得山奈酚-3，7-a-L-二鼠李糖甙粗提物。本专利技术所提供的提取工艺简单，科学合理，可行性强，所得提取物的纯度高，精品纯度可达95％以上；且本专利技术所得提取物具有良好的自由基清除活性，应用前景广阔。另外，利用本专利技术技术可对大量废弃的罗汉果叶加以充分利用，提高自然资源的利用率，减少浪费。文档编号C07H1/08GK102464685SQ20101053834公开日2012年5月23日 申请日期2010年11月9日 优先权日2010年11月9日专利技术者杨国栋 申请人:杨国栋本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】

【专利技术属性】
技术研发人员：杨国栋，
申请(专利权)人：杨国栋，
类型：发明
国别省市：