一种从野生蝙蝠葛里提取生物碱的新型工艺方法技术

本发明专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生蝙蝠葛里提取总生物碱的方法，特别是涉及一种利用生物酶解，超高压提取结合柱层析分离纯化总生物碱的新方法。本发明专利技术优点：1、采用生物酶解技术，充分溶出细胞内生物碱有效成分。2、采用超高压提取技术，可缩短提取时间，降低能耗，减少杂质成分溶出，不仅提高有效成分收率，而且纯度高。3、通过柱层析技术的吸附分离，使提取的总生物碱进一步纯化。本发明专利技术利用生物酶解法，促使有效成分充分溶出，再采用超高压提取、柱层析分离纯化，所得总生物碱纯度提高到93.6％。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于天然有机化学领域，涉及一种从大兴安岭野生蝙蝠葛里提取总生物碱的方法，特别是涉及一种利用生物酶解，超高压提取结合柱层析技术纯化总生物碱的新方法。
技术介绍
蝙蝠葛，又名山豆根，缠绕性落叶木质藤木，长达10余米。根状茎细长，外皮常呈层状或片状脱落，断面黄白色，味极苦。小枝绿色，叶互生，肾形或卵圆形，长5-12cm，全缘或3-7浅裂，叶柄盾状着生。花单性异株，短圆锥花序腋生，花小，夏日开黄绿色小花，花期5-6月。核果近球形，熟时紫黑色，果期7-9月。根茎含蝙蝠葛碱、粉汉防己碱、蝙蝠葛双碱、青藤碱、山豆根碱、山豆根诺林等。国内一般采用有机溶剂提取法和酸性水溶液提取法提取生物碱，存在着操作时间长、温度高，得率不稳定等缺点，本专利技术的不同之处在于主要采用生物酶解，超高压提取结合柱层析纯化生物碱的方法，产品纯度高、得率高。
技术实现思路
本专利技术优点本专利技术主要采用生物酶解技术，超高压提取技术，超高压能缩短提取时间，减少杂质溶出，提高收率。本专利技术方法提取快捷、产品纯度高，得率高，选用食品允许使用的乙醇做超高压提取溶剂，无化学残留。`为实现上述目的，本专利技术采用的技术方案是—种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度总生物碱的方法，其步骤如下(I)生物酶解蝙蝠葛干燥根粉碎至20-40目，酶浓度0.81. 2g/l，酶解温度45-50°C，酶解时间3-4h，得混合液；(2)预处理按不同浓度的乙醇溶剂和原料以一定比例将粗提液混合后包装好，并密封； (3)超闻压提取将包装袋放入超高压容器内，在超高压力200-400MPA，室温条件下处理3_5min ；(4)得粗品将所得液在60°C真空干燥，得生物碱粗品；(5)氧化铝柱层析取适量粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上100200目碱性氧化铝层析柱；(6)洗脱以2_4BV/h流速，用不同浓度乙醇进行洗脱，薄层色谱法跟踪监测；(7)干燥收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压浓缩，60°C真空干燥，得到含量90 %以上的生物碱成品。具体实施例方式实施例1 :一种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度总生物碱的方法，其步骤如下(I)生物酶解IOOg蝙蝠葛干燥根粉碎至20目，酶浓度O. 8g/l，酶解温度45°C，酶解时间3h，得混合液；(2)预处理溶剂和原料比按50 I的比例混合，加入的乙醇浓度为50%，装好包装袋，密封；(3)超高压提取将包装袋放入超高压容器内，在超高压力200MPA、室温条件下处理3min ；(4)得粗品将所得液在60°C真空干燥，得总生物碱粗品；(5)氧化铝柱层析取IOg粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上100目碱性氧化铝层析柱；(6)洗脱以2BV/h流速，用50 160170%乙醇进行洗脱，薄层色谱法跟踪监测；(7)干燥收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压浓缩，60°C真空干燥，得到含量为921%的总生物喊成品2. 34g。实施案例2 :—种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度总生物碱的方法，其步骤如下(I)生物酶解500g蝙蝠葛干燥根粉碎至40目，酶浓度1. Og/Ι，酶解温度50°C，酶解时间3. 5h，得混合液；(2)预处理溶剂和原料比按60 I混合，加入乙醇浓度为60%，装好包装袋，密封；(3)超高压提取将包装袋放入超高压容器内，在超高压力300MPA下，室温条件处理4min ；(4)得粗品将所得液在60°C真空干燥，得生物碱粗品；(5)氧化铝柱层析取30g粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上200目碱性氧化铝层析柱；(6)洗脱以3BV/h流速，用60^^70%乙醇进行洗脱，薄层色谱法跟踪监测；(7)干燥收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压浓缩，60°C真空干燥，得到含量为92. 7%的总生物碱成品2. 29g。实施案例3 :—种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度总生物碱的方法，其步骤如下(I)生物酶解200g蝙蝠葛干燥根粉碎至40目，酶浓度1. 2g/l，酶解温度50°C，酶解时间4h，得混合液；(2)预处理溶剂和原料比按70 I的比例混合，加入乙醇浓度为70%，装好包装袋，密封；(3)超闻压提取将包装袋放入超高压容器内，在超高压力400MPA，室温条件下处理5min ；(4)得粗品将所得液在60°C真空干燥，得生物碱粗品；(5)氧化铝柱层析取20g粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上200目碱性氧化铝层析柱；(6)洗脱以4BV/h流速，用70^^80%乙醇进行洗脱，薄层色谱法跟踪监测；(7)干燥收集各阶段 洗脱液浓缩，回收乙醇，减压浓缩，60°C真空干燥，得到含量为93. 6%的总生物喊成品2. 36g。本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度蝙蝠葛总生物碱的方法，其步骤如下：(1)生物酶解：蝙蝠葛干燥根粉碎至20?40目，酶浓度0.8?1.2g/l，酶解温度45?50℃，酶解时间3?4h，得混合液；(2)预处理：按不同的溶剂和原料比将粗提液混合后包装好，并密封；(3)超高压提取：将包装袋放入超高压容器内，在超高压力200?400MPA，室温条件下处理3?5min；(4)得粗品：将所得液在60℃真空干燥，得生物碱粗品；(5)氧化铝柱层析：取适量粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上100?200目碱性氧化铝层析柱；(6)洗脱：以2?4BV/h流速，用不同浓度乙醇进行洗脱，薄层色谱法跟踪监测；(7)干燥：收集各阶段洗脱液浓缩，回收乙醇，减压浓缩，60℃真空干燥，得到含量90％以上的生物碱成品。

【技术特征摘要】
1.一种采用生物酶解、超高压提取结合柱层析分离纯化，最终得到高纯度蝙蝠葛总生物碱的方法，其步骤如下 (1)生物酶解蝙蝠葛干燥根粉碎至20-40目，酶浓度0.8-1.2g/l，酶解温度45-50°C，酶解时间3-4h，得混合液； (2)预处理 按不同的溶剂和原料比将粗提液混合后包装好，并密封； (3)超闻压提取 将包装袋放入超高压容器内，在超高压力200-400MPA，室温条件下处理3-5min ； (4)得粗品 将所得液在60°C真空干燥，得生物碱粗品； (5)氧化铝柱层析取适量粗品粉末，溶于乙醇，湿法上样，上100-200目碱性氧化铝层析柱； (6)洗脱以2-4BV/h流速，用不同浓度乙醇进行洗脱...

【专利技术属性】
技术研发人员：张亚红，姚德坤，姚德利，万莉，
申请(专利权)人：大兴安岭林格贝有机食品有限责任公司，
类型：发明
国别省市：