一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法技术

本发明专利技术属于天然药物领域，涉及一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的新方法。步骤包括粉碎过后的苹果皮用含碱的低碳链醇或丙酮的水溶液进行提取，多次提取后的提取液浓缩至原提取液体积的1/2～1/16，滴加酸使浓缩液pH＝1～6，室温或置于冰箱5℃冷藏1小时以上。过滤后所得滤饼用纯水洗涤后，再次再用低浓度低链醇或丙酮水溶液进行洗涤，过滤取其滤饼，干燥，用低极性溶剂脱脂后，得熊果酸粗品。熊果酸粗品经低碳链醇、低碳醇水溶液、丙酮、乙酸乙酯、氯仿、二氯甲烷或它们混合物进行重结晶后得熊果酸晶体。本发明专利技术原料易得，工艺简单有效，成本低廉，可获得高纯度产品，非常适合规模化生产。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属天然药物领域，具体涉及一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法。技术背景近年来，我国苹果加工业发展迅速，浓缩果汁产能每年达140—160万吨，罐头、脆片、苹果醋等产量约40万吨。与此同时，苹果加工业产生了大量的苹果皮渣。据学者统计，按皮渣占全果质量30％计算，我国苹果经加工后每年产生的皮渣约200万吨。然而，鲜苹果渣含水量很高，具有高度的生物降解性(BOD值)，极易腐败变质，如未经合理处置，将会导致环境的极大污染。苹果皮中熊果酸含量较高，为提取和分离熊果酸提供了优良的原料。熊果酸(Ursolicacid)又名乌苏酸或乌索酸，属三萜类化合物，分子式为C30H18O3，化学名称为3β-羟基-熊果烷-12-烯-28-羧酸。熊果酸，又名乌索酸、乌苏酸，其性质稳定，颜色和气味不随时间改变，而且有很好的触摸感。具有广泛的生物活性，在医学上还具有保肝、抗肝炎、抗氧化、抗菌、降血脂、抗动脉粥样硬化、降低血糖、增强免疫力的作用，熊果酸及其盐或衍生物能作为蛋白酶抑制剂，能有效预防和治疗皮炎、皮肤粗糙、干燥等；熊果酸及其衍生物能抗紫外线、改善和恢复真皮胶原纤维束结构,起到美白和防皱作用。曾被中国医学科学院肿瘤医院实验证明其有望成为有效、低毒的新型天然抗癌药物，甚至对于艾滋病亦有很好的抑制作用。本专利技术人曾申请的专利技术专利“一种从苹果皮中分离熊果酸的方法”(专利号ZL201310119064.9)公开了一种从苹果皮中分离熊果酸的方法，本申请与该专利存在很多的差异。本申请专利是采用含碱溶液直接提取，部分浓缩，调酸析出熊果酸的分离方法，并且本专利不需要先除果胶步骤，也不需要活性炭脱色的过程，所本专利大大简化了分离过程，使分离过程更简单和高效。在专利“一种从泡桐叶中提取高纯度熊果酸的方法”(申请号CN201210557534.5)、“一种高纯度熊果酸的制备方法”(申请号CN201510918458.X)、“一种从柿叶中提取活性成分熊果酸的方法”(专利号ZL200410025770.8)、“从柿叶中提取活性成分熊果酸的方法”(专利号ZL200510118223.9)中，虽然也利用了碱溶酸沉的原理来分离熊果酸，但这些专利都是先用普通溶剂提取，再对提取物或浸膏进行碱溶，再酸沉，并且在后续的分离过程中都需继续使用活性炭或白土脱色才能得纯度较高的熊果酸。而本专利申请是用含碱溶液作为溶剂直接进行提取，并且后续分离过程也不需要活性炭脱色或白土的过程，故本专利大大简化了分离过程，使分离过程更简单和高效。
技术实现思路
本专利技术目的在于提供一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法，分离工艺简单，成本低，收率高，非常适合工业化生产，具有很高的经济与社会效益。本专利技术是通过如下技术方案实现的：一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法，具体步骤如下：(1)取新鲜苹果皮、干苹果皮或榨汁后的苹果渣任一种，粉碎；(2)按液固比mL/g1/1～20/1加入体积比浓度为50～95％低碳链醇或丙酮水溶液，再加入质量是提取溶剂的0.1％～10％的碱，在20～100℃下加热回流提取、或者100～1000w功率超声波提取、或100～1000w功率微波辅助提取、或加压溶剂提取(0.1～20Mpa)，提取1～4次，每次的提取时间为0.5～6h，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，合并提取液；(3)取提取液，常压或减压回收溶剂至原来提取液体积的1/2～1/16，滴加酸，使溶液pH调至1～6，于-20℃～5℃冷藏或室温静置1-24h，得静置液；(4)取静置液，过滤或离心，取固体不溶物，不溶物按液固比mL/g1/1～100/1用水分散，100～1000w超声辅助洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，过滤或离心，取不溶物，再按液固比mL/g1/1～20/1用体积比浓度5％～40％低碳链醇或丙酮的水溶液分散，100～1000w超声洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，再次过滤或离心，取不溶物，干燥；(5)取干燥后的不溶物，按液固比mL/g10/1～100/1加入低极性溶剂，在20～90℃下，加热回流或100～1000w功率超声波或100～1000w功率微波辅助脱脂1～5次，每次0.1～4h，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，取不溶物，干燥得到熊果酸粗品；(6)取熊果酸粗品，按液固比mL/g10/1～500/1加入低碳链醇或体积比浓度80％～100％低碳链醇的水溶液、或乙酸乙酯、或丙酮、或氯仿、或二氯甲烷，或它们的混合物，进行结晶和重结晶，过滤或离心，取固体，干燥得到熊果酸晶体。所述低碳链醇是甲醇、乙醇、异丙醇或它们的任意比混合物中的一种。所述碱是氢氧化钠、氢氧化钾、氢氧化钙、碳酸钠、碳酸钾、碳酸氢钠或碳酸氢钾或它们的任意比混合物中的一种。所述酸是盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、亚硫酸或乙酸中或它们的任意比混合物中的一种。所述低极性溶剂是石油醚、正己烷、环己烷、正庚烷或它们的任意比混合物中的一种。所述提取过程可以是在超声波或微波辅助下进行提取，或冷浸、或加热回流提取、或加压溶剂提取提取。本专利技术的优点是：1、熊果酸含有羧基，利用碱溶液作为溶剂直接对苹果皮进行提取，可提高提取效率，减少杂质的溶出。提取液经调成酸性后，熊果酸溶解度降低，使其沉淀析出，并去除大部分杂质；2、本专利技术不需活性炭脱色过程，使分离过程更简单、高效；3、本专利技术不需采用层析技术，采用了提取、洗涤、脱脂、结晶等工艺，所得产品纯度高，工艺简便，适合规模化生产；综上所述，本专利技术具有工艺简便有效，原料易得，生产装置简单的显著特点，有利于规模化生产。具体实施方式实施例1：取新鲜苹果皮粉碎，按液固比mL/g1/1加入95％乙醇和质量是提取溶剂0.1％的氢氧化钠，在超声辅助下提取(600W、30℃、搅拌、转速为500r/min，6h)，过滤，取滤液，苹果皮重复上述步骤提取三次。三次滤液合并，减压回收乙醇至原体积的1/5，缓慢滴加(搅拌、转速500r/min)盐酸溶液至pH＝3，放入冰箱5℃冷藏6h。取冷藏液，过滤，取滤饼，按液固比mL/g1/1分散于蒸馏水，超声洗涤(20min、功率500W、30℃)，过滤，重复洗涤步骤一次。过滤后取滤饼，滤饼按液固比mL/g1/1分散于体积分数浓度为40％的乙醇溶液中，超声洗涤(20min、功率500W、30℃)，过滤，反复洗涤两次，取滤饼，干燥。滤饼干燥后按液固比mL/g10/1用石油醚1000w超声波辅助脱脂(30℃、4h、3次)，过滤,取固体得熊果酸粗品。熊果酸粗品按液固比mL/g20/1用95％乙醇重结晶得到熊果酸晶体，熊果酸纯度为97％。实施例2：取干燥苹果皮粉碎，按液固比mL/g20/1加入体积比浓度为50％丙酮和质量为提取溶剂2％的氢氧化钠，回流提取(80℃、搅拌、转速为500r/min，2h)，过滤，取滤液，苹果皮重复上述步骤提取两次。两次滤液合并，减压回收溶剂至原体积的1/2，缓慢滴加(搅拌、转速600r/min)盐酸溶液至pH＝6，放入冰箱5℃冷藏1h。过滤，取滤饼，按mL/g100/1分散于蒸馏水，超声洗涤(30min、功率100W、40℃)，过滤，重复洗涤步骤8次。过滤后取滤饼，滤饼按液固比mL\本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取新鲜苹果皮、干苹果皮或榨汁后的苹果渣任一种，粉碎；(2)按液固比mL/g1/1～20/1加入体积比浓度为50～95％低碳链醇或丙酮水溶液，再加入质量是提取溶剂的0.1％～10％的碱，在20～100℃下加热回流提取、或者100～1000w功率超声波提取、或100～1000w功率微波辅助提取、或加压溶剂提取(0.1～20Mpa)，提取1～4次，每次的提取时间为0.5～6h，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，合并提取液；(3)取提取液，常压或减压回收溶剂至原来提取液体积的1/2～1/16，滴加酸，使溶液pH调至1～6，于‑20℃～5℃冷藏或室温静置1‑24h，得静置液；(4)取静置液，过滤或离心，取固体不溶物，不溶物按液固比mL/g1/1～100/1用水分散，100～1000w超声辅助洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，过滤或离心，取不溶物，再按液固比mL/g1/1～20/1用体积比浓度5％～40％低碳链醇或丙酮的水溶液分散，100～1000w超声洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，再次过滤或离心，取不溶物，干燥；(5)取干燥后的不溶物，按液固比mL/g 10/1～100/1加入低极性溶剂，在20～90℃下，加热回流或100～1000w功率超声波或100～1000w功率微波辅助脱脂1～5次，每次0.1～4h，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，取不溶物，干燥得到熊果酸粗品；(6)取熊果酸粗品，按液固比mL/g 10/1～500/1加入低碳链醇或体积比浓度80％～100％低碳链醇的水溶液、或乙酸乙酯、或丙酮、或氯仿、或二氯甲烷，或它们的混合物，进行结晶和重结晶，过滤或离心，取固体，干燥得到熊果酸晶体。...

【技术特征摘要】
1.一种碱提法从苹果皮中分离熊果酸的方法，其特征在于：包括以下步骤：(1)取新鲜苹果皮、干苹果皮或榨汁后的苹果渣任一种，粉碎；(2)按液固比mL/g1/1～20/1加入体积比浓度为50～95％低碳链醇或丙酮水溶液，再加入质量是提取溶剂的0.1％～10％的碱，在20～100℃下加热回流提取、或者100～1000w功率超声波提取、或100～1000w功率微波辅助提取、或加压溶剂提取(0.1～20Mpa)，提取1～4次，每次的提取时间为0.5～6h，搅拌速度0～2000r/min，过滤或离心，合并提取液；(3)取提取液，常压或减压回收溶剂至原来提取液体积的1/2～1/16，滴加酸，使溶液pH调至1～6，于-20℃～5℃冷藏或室温静置1-24h，得静置液；(4)取静置液，过滤或离心，取固体不溶物，不溶物按液固比mL/g1/1～100/1用水分散，100～1000w超声辅助洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，过滤或离心，取不溶物，再按液固比mL/g1/1～20/1用体积比浓度5％～40％低碳链醇或丙酮的水溶液分散，100～1000w超声洗涤5～120分钟，洗涤1～8次，再次过滤或离心，取不溶物，干燥；(5)取干燥后的不溶物，按液固比mL/g10/1～100/1加入低极性溶剂，在20～90℃下，加热回流或100～1000w功...

【专利技术属性】
技术研发人员：范杰平，刘蓉，金棱，曹亚慧，袁天桃，
申请(专利权)人：南昌大学，
类型：发明
国别省市：江西;36