一种卷烟烟气凝集物毒理学生物测定方法技术

本发明专利技术属于卷烟烟气凝集物毒性细胞效应检测技术领域，具体涉及一种卷烟烟气凝集物毒理学生物测定方法。现有技术不能充分的反映其烟气凝集物的生物学毒性。为解决现有技术存在的问题，本发明专利技术提供的技术方案是：本发明专利技术在常规细胞培养技术下，以哺乳动物气管上皮细胞或肺上皮细胞为靶细胞，以烟气凝集物为待测样品，两者共育一定时间，以MTT法检测受试靶细胞增殖状态，反映待测样品是否刺激靶细胞增殖，以细胞增殖的多少反映待测样品的生物学活性，即“毒性”，本发明专利技术对细胞毒试验是一个有用的补充，即检测烟气凝集物对靶细胞增殖的刺激作用。这种细胞增殖刺激作用比直接的细胞毒作用更灵敏。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术属于卷烟烟气凝集物毒性细胞效应检测
，具体涉及。
技术介绍
目前卷烟烟气凝集物(cigarette smoke condensate CSC)的毒理学评价指标包括，卷烟烟气的细胞毒性(中性红细胞毒性试验)，细菌回复突变试验(AMES试验)，诱发小鼠微核形成率(微核试验)等三种检测方法，主要目的是检测其对细菌，哺乳动物细胞的致突变作用，中性红细胞毒试验检测的是卷烟烟气凝集物杀伤细胞的直接细胞毒性，细菌回复突变试验和微核形成试验反映的是烟气凝集物的基因毒作用，进而与肿瘤发生相关联。过去对于肿瘤的发生主要归结于基因毒，即其致突变性。目前认为肿瘤发生过程中除了基因损伤的积累外，细胞活跃的增殖是其癌变的前提。如果在烟气凝集物的作用下细胞被完全破坏，细胞的癌变即无从说起。因此，中性红试验的确可以反映烟气凝集物的细胞毒性，但从致癌这一目前所认为的吸烟最主要的危害来说，中性红细胞毒试验结合细菌回复突变和微核形成两种基因毒检测还不能充分的反映其烟气凝集物的生物学毒性。直接杀伤细胞所需的烟气凝集物剂量明显高于刺激细胞增殖所需的剂量，因此，细胞的增殖试验对细胞毒试验将是一个有用的补充。即本文档来自技高网...

【技术保护点】
一种卷烟烟气凝集物毒理学生物测定方法，其特征在于，包括以下步骤：1）烟气粒相物的获得：确定所要选用及需处理的样品，在恒温恒湿，即：20℃和60%相对湿度条件下平衡48h，通过德国Borgwaldt公司生产的?RM??20型转盘式20孔道吸烟机，在维持20℃和60%相对湿度条件下，在标准抽吸条件下，即：1?puff/?min?,?2?s/?puff?,?35?mL/?puff抽吸，烟气通过?85?mm直径的剑桥滤片收集；2）烟气粒相物的提取：将获得的滤纸片取下密封保存，处理时，用剪刀剪碎，放入50?mL离心管中，加入二甲基亚砜以使其完全浸没滤纸碎片，30℃下振荡4hrs后,??30℃，5000r...

【技术特征摘要】
1.一种卷烟烟气凝集物毒理学生物测定方法，其特征在于，包括以下步骤1)烟气粒相物的获得确定所要选用及需处理的样品，在恒温恒湿，即20°C和60%相对湿度条件下平衡48h，通过德国Borgwaldt公司生产的RM- 20型转盘式20孔道吸烟机， 在维持20°C和60%相对湿度条件下,在标准抽吸条件下，即1 puff/ min , 2 s/ puff , 35 mL/ puff抽吸,烟气通过85 mm直径的剑桥滤片收集；2)烟气粒相物的提取将获得的滤纸片取下密封保存，处理时，用剪刀剪碎，放入50 mL离心管中，加入二甲基亚砜以使其完全浸没滤纸碎片，30°C下振荡4hrs后，30°C， 5000rpm条件下离心，取上清液体，收集入离心管...

【专利技术属性】
技术研发人员：雷东锋，王一理，韩航航，邓宝安，任军林，王宗英，王科杰，王大锋，
申请(专利权)人：陕西中烟工业有限责任公司，
类型：发明
国别省市：