【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及流式细胞术
，更具体地讲，涉及一种利用流式细胞仪检测弱抗原表达水平的流式细胞分析方法。
技术介绍
流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)是一种在功能水平上对单细胞或其他生物粒子进行定量分析和分选的检测手段。它以激光为激发光源，可以高速分析上万个细胞，并能同时从一个细胞中测得多个参数，具有速度快、精度高、准确性好等优点，成为当代最先进的细胞定量分析技术，被广泛应用于医学临床以及各个生物研究领域。当前，绝大多数流式细胞仪在理论性能参数上认为能检测到单个细胞上低至100个荧光分子数的弱抗原。但是在实际工作中，不同实验室对这类弱抗原表达的结果判断存在很大偏差。目前在实际操作中，通常会通过常规设置同型对照或阴性对照的方法来判定目的抗原的表达。这对于强阳性和阴性标本容易判断，但抗原表达量低时，结果很难判断。即使在操作中选用荧光强度最强的荧光素如藻红蛋白(PE)标记的单抗也无法改善结果。也有研究者尝试采用间接标记法来改善抗原表达弱的数据分析问题。但间接标记法一方面耗时长，增加了细胞的丢失；另一方面非特异性荧光背景强，因此该方法并不适合临床标本...
【技术保护点】
一种利用流式细胞仪检测抗原表达水平的方法，首先将目的细胞进行免疫荧光染色，然后将染色后的细胞上流式细胞仪检测、进行数据计算和分析，其特征在于：在设定所述流式细胞仪的参数时，将待测荧光通道的分辨率降低；获取同型对照或阴性细胞以及目的细胞待测抗原的几何平均荧光强度，再计算出各自的几何平均荧光强度率，以同型对照或阴性细胞的几何平均荧光强度率为界值，若目的细胞待测抗原的几何平均荧光强度率比同型对照或阴性细胞的几何平均荧光强度率高出预定值，则为该待测抗原表达。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：吴雨洁，陈昕，李建勇，仇红霞，
申请(专利权)人：南京医科大学第一附属医院，
类型：发明
国别省市：
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