【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及多克隆位点的人工设计与合成方法，具体涉及适用于多种表达载体的多克隆位点(MCS)的合成、克隆与验证。
技术介绍
多克隆位点(Multiple cloning sites, MCS)是包含多个限制性内切酶酶切位点的长度为几十个碱基的DNA序列，也称为多位点接头，是基因工程中常用到的载体质粒的标准配置序列。MCS序列中，每个限制性酶切位点通常是唯一的，即它们在一个特定的载体质粒中只出现一次，在不破坏质粒基本组成结构的基础上，用一种或两种内切酶进行酶切反应，在MCS特定的识别位点形成缺口，以此将外源基因或者序列克隆至表达载体中，对于研究和分析基因功能是必需的。MCS广泛应用于分子克隆和亚克隆工程中，是应用分子生物学、生物工程、分子遗传学等研究的重要实验工具。常用的克隆载体、表达载体等质粒中均含有MCS序列。然而，由于基因结构的复杂性和多样性，在将外源基因插入含有MCS的载体中时，MCS序列包含的酶切位点的种类有时难以满足特定研究需求，导致特定基因功能分析无法顺利进行，形成分子生物学研究领域的瓶颈。因此，迫切需要一种简单有效的MCS序列的人工设计与合成方法...
【技术保护点】
一种多克隆位点的人工设计与合成方法，其特征在于多克隆位点的人工设计与合成方法按以下步骤实现：一、选择在表达载体及特定目的基因插入序列中都不存在的酶切位点；二、将两两酶切位点之间以ATAT碱基结构串联，在串联后的碱基序列两端各添加与表达载体克隆区相同的两个酶切位点后得到序列；三、在步骤二中的序列两末端再随机添加2～6个GC或AT碱基，然后送至测序公司合成，即完成了多克隆位点的人工设计与合成。
【技术特征摘要】
1.一种多克隆位点的人工设计与合成方法，其特征在于多克隆位点的人工设计与合成方法按以下步骤实现 一、选择在表达载体及特定目的基因插入序列中都不存在的酶切位点； ~■、将两两酶切位点之间以ATAT喊基结...
【专利技术属性】
技术研发人员：常玉梅，李世国，梁利群，唐然，陶然，
申请(专利权)人：中国水产科学研究院黑龙江水产研究所，
类型：发明
国别省市：
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