本发明专利技术公开了一种崇左金花茶组培繁殖方法及其诱导培养基，该方法采用改良MS+6-苄氨基嘌呤(6-BA)+3-吲哚乙酸(IAA)作为崇左金花茶丛生芽诱导培养基，这两种生长激素组合在合适的浓度和弱酸性的环境下，可激活崇左金花茶体细胞内的作用酶，促进崇左金花茶外植体的萌发和生长，培养55天就能形成粗壮的丛生芽，扩繁达20倍。本发明专利技术还采用1/2改良MS+吲哚丁酸(IBA)或1/2改良MS+奈乙酸(NAA)作为生根诱导培养基，能有效地促进崇左金花茶单苗生根形成新植株。应用上述三种诱导培养基的崇左金花茶组培繁殖方法，可快速有效地繁殖崇左金花茶，解决了其野生资源日益减少和自然繁殖率低的问题，有效地保护了这一世界上稀有的珍贵植物种质资源。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及植物组织培养繁殖领域，尤其是一种崇左金花茶组培繁殖方法及其诱导培养基。
技术介绍
崇左金花茶(C.chungtsoensis S. Y. Liang et L. D. Huang),常绿灌木，是最近新发现的金花茶珍稀品种，是继杜鹃红山茶之后，世界上发现的第二个四季开花的金花茶品种，它不但在金花茶族中颜色最鲜黄，而且全年不断开花。崇左金花茶仅在广西崇左的局部石灰岩低山地区有少量分布。该种与朽1檬黄金花茶近似，不同之处在于花大深黄色，花瓣 13-16瓣，四季开花。崇左金花茶花朵分布均匀，枝条稠密，全光照条件下可正常生长，具有很高的观赏价值，在家庭盆栽、园林美化以及茶花育种方面具有广阔的应用前景。崇左金花茶的自然分布范围狭窄、数量有限，由于枝条细弱、扦插生根率低，无性繁殖困难，难以满足园林花卉市场需求。迄今为止，国内外虽有一些关于金花茶组植物组织培养的报道，但未见关于崇 左金花茶的组培研究报道。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是提供一种崇左金花茶组培繁殖方法，以有效利用现有资源快速繁殖崇左金花茶，保护这一世界上稀有的珍贵植物种质资源。本专利技术要解决的另一技术问题是提供用于上述崇左金花茶组培繁殖方法的丛生芽诱导培养基和生根诱导培养基。为解决上述技术问题，本专利技术采用如下技术方案崇左金花茶组培繁殖方法，将崇左金花茶的外植体接种到丛生芽诱导培养基中进行培养，待丛生芽长至3cm时，将丛生芽分割成小丛或单苗接种到生根诱导培养基中进行培养；上述丛生芽诱导培养基以改良MS培养基为基础，含有下列浓度的物质6-节氛基嘿呤2 4mg/L 3_ Π引噪乙酸O. 6 O. 8mg/L其pH 值为 4. 5 5. 8 ;上述生根诱导培养基以1/2改良MS培养基为基础，含有下列浓度的物质Π引哚丁酸 O. 6 I. 2mg/L 或奈乙酸 O. 6 I. 2mg/L。外植体为幼嫩种子。幼嫩种子先经洗净并用O. I % HgCl2溶液消毒处理20 30min，再用O. 2% HgCl2 溶液消毒处理15 20min。培养均在温度25±2°C、光照时间12 14h. cf1、光照强度20001x的条件下进行。崇左金花茶丛生芽诱导培养基，以改良MS培养基为基础,含有下列浓度的物质6_节氛基嘿呤2 4mg/L 3-Π引噪乙酸O. 6 O. 8mg/L。崇左金花茶丛生芽诱导培养基的pH值为4. 5 5. 8。上述改良MS 培养基含有成分为=Ca(NO3)2 · 4H20 300mg/L;MgSO4 · 7H20 370mg/L ;KN031900mg/L; NH4NO3 1650mg/L; KH2PO4 340mg/L; Na2 · EDTA 37. 3mg/L; FeSO4 · 7H20 27. 8mg/L;KI0. 83mg/L; H3BO3 0. 63mg/L; MnSO4 · 4H20 22. 3mg/L; ZnSO4 · 7H20 8. 6mg/ L; Na2Mo · 4H20 0. 025mg/L; CuSO4 · 5H20 0. 025mg/L; CoCl2 · 6H20 0. 003mg/L;肌醇 50mg/L; 烟酸0. 5mg/L;盐酸批卩多酸0. 5mg/L;盐酸硫胺素0. 5mg/L;甘氨酸2mg/L。崇左金花生根诱导培养基，以1/2改良MS培养基为基础,含有下列浓度的物质Π引哚丁酸 O. 6 I. 2mg/L 或奈乙酸 O. 6 I. 2mg/L。上述1/2 改良 MS 培养基含有成分为=Ca(NO3)2 ·4Η20 150mg/L; MgSO4 ·7Η20 185mg/ L ;KN039 50mg/L; NH4NO3 825mg/L; KH2PO4 170mg/L; Na2 .EDTA 37. 3mg/L; FeSO4 *7H20 27. 8mg/ L;KI0. 83mg/L; H3BO3 0. 63mg/L; MnSO4 · 4H20 22. 3mg/L; ZnSO4 · 7H20 8. 6mg/L; Na2Mo · 4H200.025mg/L; CuSO4 · 5H20 0. 025mg/L; CoCl2 · 6H20 0. 003mg/L;肌醇 50mg/L;烟酸 0. 5mg/L; 盐酸批卩多酸0. 5mg/L;盐酸硫胺素0. 5mg/L;甘氨酸2mg/L。本专利技术采用改良MS+6-苄氨基嘌呤(6-BA)+3_吲哚乙酸(IAA)作为崇左金花茶丛生芽诱导培养基，这两种生长激素组合在合适的浓度和弱酸性的环境下，可激活崇左金花茶体细胞内的作用酶，促进崇左金花茶外植体的萌发和生长，培养55天就能形成粗壮的丛生芽，扩繁达20倍。本专利技术还采用1/2改良MS+吲哚丁酸(IBA)或1/2改良MS+奈乙酸 (NAA)作为生根诱导培养基，能有效地促进崇左金花茶单苗生根形成新植株。应用上述三种诱导培养基的崇左金花茶组培繁殖方法，可快速有效地繁殖崇左金花茶，解决了其野生资源日益减少和自然繁殖率低的问题，有效地保护了这一世界上稀有的珍贵植物种质资源。具体实施方式实施例I(I)丛生芽诱导取崇左金花茶幼嫩种子，先用洗洁精清洗表面污垢，接着流水冲洗30min，然后在超净工作台上用75%乙醇处理30s，无菌水冲洗2次，再用O. IHgCl2消毒20min，无菌水冲洗5次；再用O. 2% HgCl2消毒15min,无菌水冲洗6次；用无菌滤纸吸干水分,挑出乳白色种胚植于用改良MS添加6-BA 4mg/L、IAA O. 6mg/L, pH值调节至5. O的培养基上，在温度为25土 1°C，光照时间为12h. cf1，光照强度20001x的条件下，培养65天，平均得到15. 2倍的丛生芽，丛生芽较粗壮，绿色，生长稍缓慢。(2)生根诱导待丛生芽生长至3 4cm时，将丛生芽分割成小丛或单苗接种到生根诱导培养基， 生根诱导培养基配方为在1/2改良MS上，添加IBA 0.6mg/L制成；在温度为25±1°C，光照时间为12h. cf1，光照强度20001x的条件下，培养30天开始生长出白色的不定根，50天长出I 2条，粗壮，长度约Icm的不定根。实施例2(I)丛生芽诱导取崇左金花茶幼嫩种子，先用洗洁精洗去表面污垢，接着流水冲洗30min，然后在超净工作台上用75%乙醇处理40s，无菌水冲洗2次，再用O. IHgCl2消毒25min，无菌水冲洗5次；再用O. 2% HgCl2消毒15min,无菌水冲洗6次；用无菌滤纸吸干外植体,挑出乳白色种胚植于用改良MS添加6-BA 3mg/L、IAA O. 70mg/L, pH值调节至5. 5的培养基上，在温度为25±1°C，光照时间为12h. cf1，光照强度20001x的条件下，培养60天，平均得到18倍的丛生芽，丛生芽粗壮，叶浓绿色、肥厚，长势好。(2)生根诱导待丛生芽生长至3 4cm时，将丛生芽分割成小丛或单苗接种到生根诱导培养基， 生根诱导培养基配方为在1/2改良MS上，添加IBA I. 2mg/L制成；在温度为25±1°C，光照时间为12h. cf1，光照强度20001x的条件下，培养30天开始生出白色的不定根，50天长出 2 3条，粗壮，长度约2cm的不定根。实施例3(I)丛生芽诱本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种崇左金花茶组培繁殖方法，其特征在于：将崇左金花茶的外植体接种到丛生芽诱导培养基中进行培养，待丛生芽长至3cm时，将丛生芽分割成小丛或单苗接种到生根诱导培养基中进行培养；所述丛生芽诱导培养基以改良MS培养基为基础，含有下列浓度的物质：6?苄氨基嘌呤2～4mg/L??3?吲哚乙酸0.6～0.8mg/L其pH值为4.5～5.8；所述生根诱导培养基以1/2改良MS培养基为基础，含有下列浓度的物质：吲哚丁酸0.6～1.2mg/L或奈乙酸0.6～1.2mg/L。
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：杨舒婷，王华新，林茂，唐遒冥，龚建英，孙利娜，杜铃，廖美兰，陈尔，陈宝玲，李娜，黄欣，汪小玉，杜禹，
申请(专利权)人：广西壮族自治区林业科学研究院，
类型：发明
国别省市：
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