本发明专利技术涉及一种植物繁殖，即一种利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法。以牛皮杜鹃为例，其步骤如下：（1）10月下旬采集牛皮杜鹃枝条，将枝条进行低温休眠，水培促其侧芽萌发生长，处理后切割成1叶1段作为外植体备用；牛皮杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基为：培养基＋KT?0.13～0.14mg·L-1＋IBA0.05～0.08mg·L-1＋NAA?0.02～0.05mg·L-1＋GA3?2.70～2.90mg·L-1；具有步骤简捷、成本低、可操作性强，提高种苗生产效率，可直接应用于杜鹃花工厂化育苗。
【技术实现步骤摘要】
本专利技术涉及一种，即利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法。
技术介绍
在现有技术中，长白山杜胃$花属植物包括牛皮杜胃$ {Rhododendron chrysanthumPall.)、短果杜醇{Rhododendron brachycarpum D. Don)、照白杜醇{Rhododendronmicranthum Turcz.)、小叶杜匿$ {Rhododendron parvifolium Adams.)、大字杜匿${Rhododendron schlippenbachii Maxim.)、兴安杜匿$ {Rhododendron dauricum L.)、迎红杜匿$ {Rhododendron mucronulaturn Turcz.)、毛租杜匿$ {Rhododendron confertissimumNakai)和荀叶杜醇{Rhododendron redowskianum Maxim.)等共有9个种,均为吉林省重点保护植物，其中牛皮杜鹃和苞叶杜鹃为我国国家三级保护的珍贵稀有植物，短果杜鹃为长 白山区珍贵稀有植物，牛皮杜鹃、毛毡杜鹃、照白杜鹃和小叶杜鹃是常绿灌木，短果杜鹃为常绿小乔木，兴安杜鹃为半常绿灌木。牛皮杜鹃、苞叶杜鹃和毛毡杜鹃分布海拔达2500米高，属高山杜鹃。牛皮杜鹃、大字杜鹃、照白杜鹃、小叶杜鹃、迎红杜鹃和兴安杜鹃全株挥发油含量较高，为精油和药用植物。这9种杜鹃均可通过人工引种驯化为园林绿化植物。以上9种杜鹃对水土保持和维持生态平衡起重要作用，是杜鹃花育种的种质资源。但其在我国分布甚狭，仅在长白山有较大种群分布，其它地区仅为零星分布，由于人们乱采乱挖，野生资源遭到极大威胁。这9种杜鹃花种子细小，萌发率低，萌发后形成的小苗成活率极低；扦插繁殖需要大量的野生杜鹃枝条，对野生资源破坏极大，且生根率和移栽成活率极低，开发和利用受到极大限制。目前，9种杜鹃花的离体繁殖报道较多，通过愈伤组织再分化芽苗、腋芽丛生和直接再生等途径具有增殖系数高等优点，但仍存在外植体诱导愈伤组织再分化、腋芽丛生和直接再生周期较长，获得不定芽再进一步生根速度较慢、步骤复杂、成本高、可操作性差，长期连续增殖极易发生退化和变异等缺点。
技术实现思路
本专利技术的目的是针对上述不足而提供一种方法可行、步骤简捷、成本低和繁殖速度快的利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法。本专利技术的技术解决方案是，其步骤如下 (1)10月下旬采集牛皮杜鹃枝条，将枝条进行低温休眠，温度控制在-10 -5°C,60d后取出并将顶芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其侧芽萌发生长；待侧芽萌发长至2. 50 cm时，将鲜嫩的侧芽剪下，去除嫩叶及叶柄，用体积分数的75%乙醇涮洗60 S，移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min，无菌水冲洗10次，无菌滤纸吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后切割成I叶I段作为外植体备用； (2)牛皮杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基为培养基+KT O. 13 O. 14mg · Γ1 + IBA 0. 05 O. 08 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 70 I. 90mg·!/1 ;培养基中附加琼脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g吨―1，调节pH值至5. 6，嫩茎段在光照周期9 hM'光照强度1000 Ix和温度23±2 1条件下培养茎段35 d ;培养基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 盐酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 烟酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。—种利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法，其步骤如下 (1)10月下旬采集短果杜鹃枝条，将枝条进行低温休眠，温度控制在-10 -5 °C,60d后取出并将顶芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其侧芽萌发生长；待侧芽萌发长至2. 50 cm时，将鲜嫩的侧芽剪下，去除嫩叶及叶柄，用体积分数的75%乙醇涮洗60 S，移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min，无菌水冲洗10次，无菌滤纸吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后切割成I叶I段作为外植体备用； (2)短果杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是培养基+KT O. 09 O. 12mg · Γ1 + IBA O. 03 O. 07 mg · Γ1 + NAA O. 04 O. 06 mg · Γ1 + GA3 2. 80 3. 00mg·!/1 ;培养基中附加琼脂粉7. 8 g·!/1，添加蔗糖10.0 g · Λ调节pH值至5. 6，嫩茎段在光照周期9 hM'光照强度1000 Ix和温度23±2 1条件下培养茎段35 d ;培养基成分和含量87 mg · L-1 (NH4)2SO4, 375 mg · L-1NH4NO3,180 mg · L-1KNO3, 320 mg · L-1CaCl2 · 2H20, 245mg .L-1MgSO4 ·7Η20，436 mg .L-1KH2PO4 ；18. 4 mg .L-1FeSO4 ·7Η20，24. 9 mg .L-1Na2 .EDTA ·2Η20 ；12. 4 mg · L-1MnSO4 · 4H20, 7. 2 mg · L-1ZnSO4 · 7H20，5. 7 mg · L^1H3BO3jO. 32 mg · L-1KLO. 05mg · L-1Na2MO4 · 2H20 ；0. 3 mg · I71 盐酸硫胺素 VB1,0. 25 mg · I71 烟酸,75 mg · I71 肌醇,0. 25mg · L-1甘氨酸。，其步骤如下 (1)10月下旬采集照白杜鹃枝条，将枝条进行低温休眠，温度控制在-10 -5 °C,60d后取出并将顶芽去除，在300倍液的赤霉素溶液中水培促其侧芽萌发生长；待侧芽萌发长至2. 50 cm时，将鲜嫩的侧芽剪下，去除嫩叶及叶柄，用体积分数的75%乙醇涮洗60 S，移至饱和次氯酸钠溶液中浸泡8 min，无菌水冲洗10次，无菌滤纸吸干表面水分，去除被乙醇和次氯酸钠毒伤的组织后切割成I叶I段作为外植体备用； (2)照白杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基是培养基+KT O. 17 O. 25mg · I/1 + IAA O. 20 O. 25 mg · Γ1 + NAA O. 02 O. 05 mg · Γ1 + GA3 2. 30 2. 60mg·!/1 ;培养本文档来自技高网...
【技术保护点】
一种利用长白山杜鹃花属植物茎段试管内高效成苗方法，其特征在于步骤如下：（1）以牛皮杜鹃枝条水培侧芽嫩茎段作为外植体备用；（2）牛皮杜鹃茎段生根同时腋芽萌发生长的培养基为：培养基＋KT？？0.13～0.14？mg·L？1＋IBA？0.05～0.08？mg·L？1＋NAA？？0.02～0.05？mg·L？1＋GA3？？2.70～2.90？mg·L？1；培养基中附加琼脂粉7.8？g·L？1，添加蔗糖10.0？g·L？1，调节pH值至5.6，嫩茎段在光照周期9？h·d？1、光照强度1000？lx和温度23±2？℃条件下培养茎段35？d；培养基成分和含量：87？mg·L？1(NH4)2SO4，375？mg·L？1NH4NO3，180？mg·L？1KNO3，320？mg·L？1CaCl2·2H2O，245？mg·L？1MgSO4·7H2O，436？mg·L？1KH2PO4；18.4？mg·L？1FeSO4·7H2O，24.9？mg·L？1Na2·EDTA·2H2O；12.4？mg·L？1MnSO4·4H2O，7.2？mg·L？1ZnSO4·7H2O，5.7？mg·L？1H3BO3，0.32？mg·L？1KI，0.05？mg·L？1Na2MO4·2H2O；0.3？mg·L？1盐酸硫胺素VB1，0.25？mg·L？1烟酸，75？mg·L？1肌醇，0.25？mg·L？1甘氨酸。...
【技术特征摘要】
【专利技术属性】
技术研发人员：顾地周，杨丽娟，朱俊义，姜云天，冯颖，郭志欣，陆爽，潘雨，禚玲玲，张学士，
申请(专利权)人：通化师范学院，
类型：发明
国别省市：
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